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CD169、CD163和3非翻译区人工微小RNA对猪繁殖与呼吸综合征病毒感染猪肺巨噬细胞的抑制作用

摘要第2-4页
Abstract第4-5页
英文缩写表第7-11页
综述一:猪繁殖与呼吸综合征病毒研究进展第11-16页
    1. 分类地位和理化特性第11-12页
    2. 基因组结构和编码蛋白第12-14页
        2.1. 病毒非结构蛋白第13页
        2.2. 病毒主要囊膜蛋白第13页
        2.3. 病毒次要囊膜蛋白第13-14页
        2.4. 病毒核衣壳蛋白第14页
    3. 病毒受体第14-15页
    4. 免疫应答第15-16页
综述二:微小RNA及其传递载体第16-20页
    1. miRNA的结构与功能第16-17页
        1.1. 结构与表达第16-17页
        1.2. 功能第17页
    2. miRNA的人工合成与表达第17-18页
    3. miRNA表达载体第18-19页
        3.1. 病毒载体第18-19页
        3.2. 非病毒性载体第19页
    4. 总结第19-20页
研究内容一:重组腺病毒和外排体传送的CD169、CD163人工微小RNA对猪繁殖与呼吸综合征病毒感染的抑制作用第20-37页
    1. 材料第20-22页
        1.1. 细胞、质粒、菌株和毒株第20-21页
        1.2. 工具酶和主要试剂第21页
        1.3. 培养基与溶液第21-22页
        1.4. 主要实验设备第22页
    2. 方法第22-28页
        2.1. 重组腺病毒制备和鉴定第22-25页
            2.1.1. 感受态细胞制备第22页
            2.1.2. 穿梭载体准备第22-23页
            2.1.3. 重组质粒的制备第23-24页
            2.1.4. 重组腺病毒的制备第24-25页
        2.2. amiRNA表达检测第25-26页
            2.2.1. 细胞的rAd转导第25页
            2.2.2. amiRNA表达检测第25-26页
            2.2.3. amiRNA的抑制作用检测第26页
        2.3. 外排体制备和检测第26-27页
            2.3.1. 外排体制备第26-27页
            2.3.2. 外排体中amiRNA检测第27页
            2.3.3. 外排体内amiRNA的活性检测第27页
        2.4. amiRNA抗病毒作用检测第27-28页
    3. 结果第28-34页
        3.1. 重组腺病毒制备与鉴定第28-30页
        3.2. amiRNA表达与分泌检测第30-31页
        3.3. amiRNA抑制靶基因表达检测第31-32页
        3.4. Sn和CD163 amiRNA的抗病毒作用检测第32-34页
    4. 讨论第34-37页
研究内容二:外排体传递的3'UTR微小RNA对PRRSV复制的抑制作用第37-50页
    1. 材料第37-38页
        1.1. 细胞,质粒,菌株和毒株第37-38页
        1.2. 工具酶和主要试剂第38页
        1.3. 培养基与溶液第38页
        1.4. 主要实验设备第38页
    2. 方法第38-41页
        2.1. 细胞的培养第38-39页
        2.2. 重组腺病毒制备、感染和amiRNA检测第39页
        2.3. 外排体分离纯化、western blot和形态学鉴定第39-40页
        2.4. 外排体标记、细胞传递和观察第40页
        2.5. amiRNA定量检测第40-41页
        2.6. 外排体介导的amiRNA抗病毒作用检测第41页
        2.7. 数据处理第41页
    3. 结果第41-48页
        3.1. 重组腺病毒转导细胞的amiRNA表达第41-42页
        3.2. 外排体的鉴定第42-43页
        3.3. 外排体介导的amiRNA分泌第43-44页
        3.4. 外排体介导的amiRNA传递第44-45页
        3.5. 外排体向PAM的amiRNA传递第45-46页
        3.6. 外排体传递的amiRNA的抗病毒作用第46-48页
    4. 讨论第48-50页
参考文献第50-61页
发表论文第61-62页
致谢第62-63页

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