| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 符号说明 | 第10-11页 |
| 第一章 综述 | 第11-23页 |
| 1.1 植物多倍体化研究 | 第11-13页 |
| 1.1.1 植物多倍体 | 第11页 |
| 1.1.2 多倍体的产生及鉴定 | 第11-12页 |
| 1.1.2.1 多倍体产生途径 | 第11-12页 |
| 1.1.2.2 多倍体的鉴定 | 第12页 |
| 1.1.3 植物多倍体的特征及农业应用 | 第12-13页 |
| 1.1.3.1 植物多倍体的特征 | 第12页 |
| 1.1.3.2 植物多倍体的应用 | 第12-13页 |
| 1.2 异源多倍体甘蓝型油菜的人工合成及研究进展 | 第13-17页 |
| 1.2.1 禹式三角模型及甘蓝型油菜起源 | 第13-14页 |
| 1.2.2 甘蓝型油菜的重要经济价值及其育种现状 | 第14-15页 |
| 1.2.3 人工合成甘蓝型油菜的研究现状 | 第15-17页 |
| 1.2.3.1 人工合成甘蓝型油菜的获得方法 | 第15-16页 |
| 1.2.3.2 人工合成甘蓝型油菜的研究现状 | 第16-17页 |
| 1.3 植物异源多倍体的研究价值 | 第17-22页 |
| 1.3.1 植物异源多倍化过程中的遗传变异 | 第17页 |
| 1.3.2 植物异源多倍化过程中的表观遗传变异 | 第17-20页 |
| 1.3.2.1 表观遗传学与DNA甲基化 | 第17-18页 |
| 1.3.2.2 异源多倍化过程中的表观遗传学研究 | 第18-20页 |
| 1.3.3 人工合成甘蓝型油菜的遗传与表观遗传研究进展 | 第20-22页 |
| 1.3.3.1 人工合成甘蓝型油菜的遗传变化 | 第20-21页 |
| 1.3.3.2 人工合成甘蓝型油菜的表观遗传变化 | 第21-22页 |
| 1.4 研究目的 | 第22-23页 |
| 第二章 材料与方法 | 第23-39页 |
| 2.1 植物材料 | 第23页 |
| 2.2 实验所用试剂及培养基 | 第23-24页 |
| 2.2.1 实验所用试剂配方 | 第23-24页 |
| 2.2.2 胚胎挽救所用培养基 | 第24页 |
| 2.3 实验使用的仪器与设备 | 第24-25页 |
| 2.4 人工合成甘蓝型油菜及其鉴定 | 第25-27页 |
| 2.4.1 人工杂交与胚胎挽救 | 第25页 |
| 2.4.2 人工合成甘蓝型油菜的分子鉴定 | 第25-27页 |
| 2.4.2.1 植物总DNA提取 | 第25-26页 |
| 2.4.2.2 人工合成甘蓝型油菜的SSR鉴定 | 第26-27页 |
| 2.4.3 人工合成甘蓝型油菜的细胞学鉴定 | 第27页 |
| 2.4.3.1 染色体数目的统计 | 第27页 |
| 2.4.3.2 花粉活性观察 | 第27页 |
| 2.4.4 人工合成甘蓝型油菜农艺性状及产量性状的统计 | 第27页 |
| 2.5 全基因组DNA甲基化水平测定 | 第27-28页 |
| 2.5.1 植物DNA提取与预处理 | 第27-28页 |
| 2.5.2 HPLC法分析植物全基因组DNA甲基化水平 | 第28页 |
| 2.6 人工合成的甘蓝型油菜MSAP分析 | 第28-32页 |
| 2.6.1 植物全基因组DNA提取 | 第28页 |
| 2.6.2 DNA接头和MSAP引物 | 第28-29页 |
| 2.6.3 DNA酶切 | 第29-30页 |
| 2.6.4 连接接头 | 第30页 |
| 2.6.5 预扩增 | 第30-31页 |
| 2.6.6 选择性扩增 | 第31页 |
| 2.6.7 扩增产物的检测 | 第31-32页 |
| 2.6.7.1 聚丙烯酰胺凝胶制备 | 第31-32页 |
| 2.6.7.2 电泳 | 第32页 |
| 2.6.7.3 银染程序 | 第32页 |
| 2.6.7.4 条带统计分析 | 第32页 |
| 2.7 甲基化差异条带回收克隆及定量分析 | 第32-39页 |
| 2.7.1 甲基化差异条带的回收和克隆 | 第32-34页 |
| 2.7.1.1 聚丙烯酰胺凝胶差异条带回收 | 第32-33页 |
| 2.7.1.2 琼脂糖凝胶回收再次扩增产物 | 第33页 |
| 2.7.1.3 连接与转化 | 第33-34页 |
| 2.7.1.4 菌落PCR与测序 | 第34页 |
| 2.7.2 MSAP差异片段的表达分析 | 第34-39页 |
| 2.7.2.1 植物RNA的提取 | 第34-35页 |
| 2.7.2.2 总RNA中DNA的消化 | 第35页 |
| 2.7.2.3 cDNA的合成 | 第35-36页 |
| 2.7.2.4 定量PCR扩增 | 第36-39页 |
| 第三章 结果与分析 | 第39-57页 |
| 3.1 甘蓝型油菜的人工合成与鉴定 | 第39-47页 |
| 3.1.1 胚胎挽救与甘蓝型油菜的再生 | 第39-41页 |
| 3.1.2 人工合成甘蓝型油菜的SSR鉴定 | 第41-42页 |
| 3.1.2.1 C基因组特异性条带分析 | 第41页 |
| 3.1.2.2 A和C基因组共显性条带分析 | 第41-42页 |
| 3.1.3 人工合成甘蓝型油菜F1代的细胞学鉴定 | 第42-43页 |
| 3.1.4 人工合成甘蓝型油菜F1代及其亲本的形态观察 | 第43-45页 |
| 3.1.5 人工合成甘蓝型油菜F1代及其亲本的花粉活力统计 | 第45-46页 |
| 3.1.6 人工合成甘蓝型油菜F1代及亲本的农艺性状和产量性状分析 | 第46-47页 |
| 3.2 人工合成甘蓝型油菜F1代及其亲本的全基因组甲基化水平分析 | 第47-49页 |
| 3.3 人工合成甘蓝型油菜F1代及其亲本的MSAP分析 | 第49-53页 |
| 3.3.1 MSAP条带汇总 | 第49-51页 |
| 3.3.2 新合成的甘蓝型油菜DNA甲基化类型 | 第51-53页 |
| 3.3.3 人工合成甘蓝型油菜F1代的DNA甲基化水平变化 | 第53页 |
| 3.4 MSAP差异条带的克隆与定量分析 | 第53-57页 |
| 3.4.1 MSAP差异条带的克隆和测序 | 第53-54页 |
| 3.4.3 差异条带的序列比对 | 第54-56页 |
| 3.4.4 克隆基因在人工合成甘蓝型油菜及其亲本中的表达分析 | 第56-57页 |
| 第四章 讨论 | 第57-63页 |
| 4.1 甘蓝型油菜的人工合成 | 第57-59页 |
| 4.1.1 人工杂交与胚胎挽救 | 第57页 |
| 4.1.2 人工合成甘蓝型油菜的农艺性状和产量性状 | 第57-59页 |
| 4.2 人工合成甘蓝型油菜的表观遗传变化 | 第59-61页 |
| 4.2.1 人工合成甘蓝型油菜的全基因组甲基化变化 | 第59页 |
| 4.2.2 人工合成的甘蓝型油菜及其亲本的MSAP分析 | 第59-61页 |
| 4.3 甲基化差异条带的定性与定量分析 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-70页 |
| 硕士期间发表论文 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
