摘要 | 第2-4页 |
Abstract | 第4-6页 |
符号说明 | 第10-12页 |
文献综述 | 第12-27页 |
1. 流感病毒的概述 | 第12-15页 |
1.1 禽流感病毒的病原学 | 第12-13页 |
1.2 流感病毒抗原变异与组织亲嗜性和受体特异性的关系 | 第13-14页 |
1.3 流感病毒抗原变异与复制能力的关系 | 第14页 |
1.4 禽流感病毒的监控 | 第14-15页 |
2. 单克隆抗体的制备及其应用 | 第15-18页 |
2.1 利用杂交瘤技术生产单克隆抗体 | 第15-16页 |
2.2 利用噬菌体展示技术合成单克隆抗体 | 第16-17页 |
2.3 单克隆抗体制备效率的改善措施 | 第17页 |
2.4 单克隆抗体在流感病毒抗原变异方面的应用 | 第17-18页 |
参考文献 | 第18-27页 |
第一章 H9N2亚型禽流感病毒血凝素单抗的制备 | 第27-44页 |
1. 材料 | 第27-30页 |
1.1 病毒株 | 第27页 |
1.2 SPF鸡胚、实验动物、细胞系 | 第27页 |
1.3 主要试剂 | 第27-28页 |
1.4 主要试剂的配制 | 第28-30页 |
1.5 主要设备仪器 | 第30页 |
2. 方法 | 第30-36页 |
2.1 疫苗的制备 | 第30-31页 |
2.2 动物免疫 | 第31页 |
2.3 SP2/0骨髓瘤细胞的复苏与准备 | 第31-32页 |
2.4 免疫脾细胞的制备 | 第32页 |
2.5 饲养细胞的制备 | 第32页 |
2.6 细胞融合 | 第32-33页 |
2.7 最适抗原包被浓度的确定 | 第33页 |
2.8 杂交瘤细胞上清的ELISA检测 | 第33页 |
2.9 杂交瘤细胞的亚克隆 | 第33-34页 |
2.10 杂交瘤细胞的冻存与复苏 | 第34页 |
2.11 单克隆抗体腹水的制备 | 第34页 |
2.12 单克隆抗体的检测 | 第34-35页 |
2.13 病毒抗原的免疫组织化学检测 | 第35-36页 |
3. 结果 | 第36-41页 |
3.1 制备疫苗的结果 | 第36页 |
3.2 动物免疫结果 | 第36页 |
3.3 最适抗原包被浓度的确定结果 | 第36页 |
3.4 杂交瘤细胞的建株 | 第36页 |
3.5 单克隆抗体的效价检测结果 | 第36-37页 |
3.6 单克隆抗体的Western blot鉴定结果 | 第37-38页 |
3.7 单克隆抗体特异性鉴定结果 | 第38页 |
3.8 病毒抗原的免疫组织化学检测结果 | 第38-41页 |
4. 讨论 | 第41-42页 |
5. 结论 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-44页 |
第二章 单克隆抗体在抗原变异上的应用 | 第44-54页 |
1. 材料 | 第44-46页 |
1.1 病毒株 | 第44页 |
1.2 细胞系 | 第44页 |
1.3 质粒和基因 | 第44页 |
1.4 主要试剂 | 第44-45页 |
1.5 主要试剂的配制 | 第45页 |
1.6 主要设备仪器及耗材 | 第45-46页 |
2. 方法 | 第46-47页 |
2.1 五株单克隆抗体对不同病毒HI效价的检测 | 第46页 |
2.2 单克隆抗体所针对位点的初步筛选 | 第46-47页 |
2.2.1 转染质粒的准备 | 第46页 |
2.2.2 HA蛋白在293T细胞内的表达及表达蛋白的检测 | 第46-47页 |
3. 结果 | 第47-50页 |
3.1 五株单克隆抗体对不同传代病毒病毒HI效价的检测结果 | 第47-48页 |
3.2 含HA突变的真核表达载体的构建结果 | 第48-49页 |
3.3 单克隆抗体所针对位点的初步筛选结果 | 第49-50页 |
4. 讨论 | 第50-51页 |
5. 结论 | 第51-53页 |
参考文献 | 第53-54页 |
全文小结 | 第54-55页 |
致谢 | 第55-56页 |