| 摘要 | 第6-8页 |
| abstract | 第8-9页 |
| 英文缩略表 | 第14-16页 |
| 第一章 引言 | 第16-29页 |
| 1.1 前言 | 第16页 |
| 1.2 鼠痘病毒的生物学特性 | 第16-18页 |
| 1.3 机体对鼠痘的固有抗性 | 第18-25页 |
| 1.3.1 宿主天然免疫对鼠痘的固有抗性 | 第18-23页 |
| 1.3.1.1 Ⅰ型干扰素 | 第18-21页 |
| 1.3.1.2 诱导Ⅰ型干扰素抗ECTV感染的宿主分子 | 第21-22页 |
| 1.3.1.3 病毒蛋白影响机体Ⅰ型干扰素的表达和信号转导 | 第22-23页 |
| 1.3.2 NK细胞抗ECTV的作用 | 第23-24页 |
| 1.3.3 其它参与抗ECTV天然免疫的分子和细胞 | 第24-25页 |
| 1.4 获得性免疫在鼠痘中的固有抗性 | 第25-27页 |
| 1.4.1 B细胞和抗体 | 第25-26页 |
| 1.4.2 T细胞 | 第26-27页 |
| 1.4.2.1 CD8+T细胞 | 第26-27页 |
| 1.4.2.2 CD4+T细胞 | 第27页 |
| 1.5 展望与总结 | 第27-28页 |
| 1.6 研究目的与意义 | 第28-29页 |
| 第二章 ECTV感染易感/抗性小鼠脾脏组织的转录组学研究 | 第29-49页 |
| 2.1 材料和方法 | 第30-35页 |
| 2.1.1 细胞、鼠痘病毒和实验小鼠 | 第30页 |
| 2.1.2 主要仪器设备 | 第30页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第30页 |
| 2.1.4 引物设计 | 第30-32页 |
| 2.1.5 动物感染实验及感染验证 | 第32-33页 |
| 2.1.6 组织病毒滴度测定 | 第33页 |
| 2.1.7 脾脏组织芯片检测 | 第33页 |
| 2.1.8 芯片数据整理和分析 | 第33-34页 |
| 2.1.9 RNA提取及反转录 | 第34页 |
| 2.1.10 荧光定量RT-PCR | 第34页 |
| 2.1.11 组织病理试验 | 第34页 |
| 2.1.12 数据分析 | 第34-35页 |
| 2.2 结果与分析 | 第35-45页 |
| 2.2.1 ECTV对BALB/c和C57BL/6小鼠的致病力 | 第35-36页 |
| 2.2.2 ECTV感染BALB/c和C57BL/6小鼠后转录表达分析 | 第36-38页 |
| 2.2.3 qPCR验证芯片数据 | 第38-39页 |
| 2.2.4 DEGs分析 | 第39-40页 |
| 2.2.5 天然免疫差异基因的分析 | 第40-44页 |
| 2.2.6 BALB/c和C57BL/6小鼠感染前后遗传背景基因的分析 | 第44-45页 |
| 2.3 讨论 | 第45-49页 |
| 第三章 HSP70促进ECTV增殖的研究 | 第49-61页 |
| 3.1 材料和方法 | 第49-53页 |
| 3.1.1 细胞和鼠痘病毒 | 第49-50页 |
| 3.1.2 主要仪器设备 | 第50页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第50页 |
| 3.1.4 载体构建 | 第50页 |
| 3.1.5 细胞转染 | 第50-51页 |
| 3.1.6 RNA干扰实验 | 第51页 |
| 3.1.7 Western-blot检测 | 第51页 |
| 3.1.8 细胞毒性检测 | 第51页 |
| 3.1.9 槲皮素和VER155008处理细胞试验 | 第51-52页 |
| 3.1.10 ECTV基因组荧光定量PCR的建立 | 第52页 |
| 3.1.11 ECTV基因组拷贝数的检测 | 第52页 |
| 3.1.12 病毒滴度测定 | 第52-53页 |
| 3.1.13 数据分析 | 第53页 |
| 3.2 结果与分析 | 第53-59页 |
| 3.2.1 ECTV基因组荧光定量PCR的建立 | 第53-54页 |
| 3.2.2 ECTV感染上调体内外Hspa1b的表达 | 第54-55页 |
| 3.2.3 过表达Hspa1b促进ECTV的增殖 | 第55-56页 |
| 3.2.4 RNAi敲降Hspa1b降低ECTV增殖 | 第56-57页 |
| 3.2.5 Hspa1b化学抑制剂对ECTV增殖的影响 | 第57-58页 |
| 3.2.6 Hspa1b促进病毒DNA的复制 | 第58-59页 |
| 3.3 讨论 | 第59-61页 |
| 第四章 cGAS-STING信号通路抗ECTV感染的研究 | 第61-77页 |
| 4.1 材料和方法 | 第62-65页 |
| 4.1.1 细胞、病毒和实验小鼠 | 第62页 |
| 4.1.2 主要设备 | 第62页 |
| 4.1.3 主要试剂 | 第62-63页 |
| 4.1.4 载体 | 第63页 |
| 4.1.5 RNA提取和荧光定量PCR | 第63页 |
| 4.1.6 双荧光素酶试验 | 第63页 |
| 4.1.7 RNA干扰试验 | 第63-64页 |
| 4.1.8 Western-Blot检测 | 第64页 |
| 4.1.9 ELISA检测 | 第64页 |
| 4.1.10 ECTV基因组DNA拷贝数的测定 | 第64页 |
| 4.1.11 病毒毒价的测定 | 第64页 |
| 4.1.12 动物实验 | 第64-65页 |
| 4.1.13 腹膜巨噬细胞的分离 | 第65页 |
| 4.1.14 组织病理试验 | 第65页 |
| 4.1.15 数据分析 | 第65页 |
| 4.2 结果与分析 | 第65-73页 |
| 4.2.1 ECTV能够诱导L929和RAW264.7中Ⅰ型IFN的表达,但却不能诱导NIH3T3细胞中Ⅰ型IFN的表达 | 第65-66页 |
| 4.2.2 ECTV诱导IFN-α/β依赖STING和cGAS | 第66-68页 |
| 4.2.3 ECTV感染能够诱导TBK1和IRF3的磷酸化 | 第68-69页 |
| 4.2.4 cGAS-STING-TBK1-IRF3通路驱动干扰素的表达以对抗ECTV的感染 | 第69-71页 |
| 4.2.5 STING和cGAS能够限制ECTV的增殖 | 第71页 |
| 4.2.6 STING和cGAS是机体抗鼠痘的关键 | 第71-73页 |
| 4.3 讨论 | 第73-77页 |
| 第五章 全文结论 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-91页 |
| 致谢 | 第91-92页 |
| 作者简介 | 第92页 |
