| 摘要 | 第6-7页 |
| abstract | 第7页 |
| 第一章 引言 | 第11-24页 |
| 1.1 植物免疫概述 | 第11-12页 |
| 1.2 PAMP诱导的植物免疫PTI与识别受体PRR | 第12-16页 |
| 1.2.1 PRR的结构特点和类别 | 第12-13页 |
| 1.2.2 识别受体PRR复合物的形成和解聚 | 第13页 |
| 1.2.3 PRR受体在时空维度的表达与调控 | 第13-14页 |
| 1.2.4 PRR受体对不同来源MAMP的识别 | 第14-16页 |
| 1.3 效应子诱导的植物免疫ETI与胞内受体NLR | 第16-19页 |
| 1.3.1 NLR的结构域概述和NLR的进化过程 | 第16-17页 |
| 1.3.2 NLR识别效应子的经典模型 | 第17-18页 |
| 1.3.3 NLR受体对 | 第18页 |
| 1.3.4 NLR的整合型诱饵结构模型NLR-ID | 第18-19页 |
| 1.4 实验技术手段 | 第19-21页 |
| 1.4.1 金门克隆技术 | 第19页 |
| 1.4.2 外源基因在植物中的瞬时表达技术 | 第19-20页 |
| 1.4.3 基因沉默技术 | 第20-21页 |
| 1.5 研究背景 | 第21-22页 |
| 1.5.1 真菌激发子PeaT1互作蛋白研究 | 第21页 |
| 1.5.2 NLR受体对RPR1和RPR2的研究 | 第21-22页 |
| 1.6 研究目的和意义 | 第22-24页 |
| 第二章 真菌蛋白激发子PeaT1互作蛋白功能分析 | 第24-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第24页 |
| 2.1.1 植物与菌株 | 第24页 |
| 2.1.2 实验试剂与仪器 | 第24页 |
| 2.2 试验方法 | 第24-29页 |
| 2.2.1 PtBP1沉默片段的选取 | 第24-25页 |
| 2.2.2 VIGS载体的构建 | 第25-26页 |
| 2.2.3 VIGS沉默效率的检测 | 第26-27页 |
| 2.2.4 PtBP1基因沉默植株与野生型植株对PeaT1诱导的抗病性研究 | 第27-28页 |
| 2.2.5 荧光定量PCR检测烟草抗病相关基因 | 第28-29页 |
| 2.3 实验结果分析 | 第29-34页 |
| 2.3.1 PtBP1沉默片段的选择 | 第29-30页 |
| 2.3.2 PtBP1沉默效率检测 | 第30-31页 |
| 2.3.3 PeaT1诱导的PtBP1沉默株的抗病性 | 第31-34页 |
| 2.4 本章小结与讨论 | 第34-35页 |
| 第三章 水稻NLR蛋白对RPR1和RPR2序列分析 | 第35-41页 |
| 3.1 材料与方法 | 第35-36页 |
| 3.1.1 含有WRKY结构域的NLR | 第35页 |
| 3.1.2 NLR-WRKY序列分析 | 第35页 |
| 3.1.3 引物设计 | 第35-36页 |
| 3.2 实验结果 | 第36-40页 |
| 3.2.1 WRKY结构域的比对和分析 | 第36-37页 |
| 3.2.2 NLR蛋白对结构分析 | 第37-38页 |
| 3.2.3 金门克隆引物设计 | 第38-40页 |
| 3.3 本章小结与讨论 | 第40-41页 |
| 第四章 水稻NLR蛋白对RPR1和RPR2基因克隆 | 第41-55页 |
| 4.1 实验材料 | 第41页 |
| 4.2 实验方法 | 第41-46页 |
| 4.2.1 分段PCR | 第41-42页 |
| 4.2.2 琼脂糖凝胶电泳 | 第42页 |
| 4.2.3 核酸胶纯化 | 第42页 |
| 4.2.4 金门克隆Level-1的载体构建 | 第42-43页 |
| 4.2.5 金门克隆Level0和Level1的载体构建 | 第43-44页 |
| 4.2.6 质粒抽提 | 第44-45页 |
| 4.2.7 酶切法筛选阳性克隆 | 第45页 |
| 4.2.8 大肠杆菌电转化法 | 第45-46页 |
| 4.2.9 蓝白斑筛选 | 第46页 |
| 4.3 实验结果 | 第46-54页 |
| 4.3.1 PCR扩增基因片段 | 第46-47页 |
| 4.3.2 酶切法筛选T-A克隆(金门克隆Level-1)的阳性重组质粒 | 第47-49页 |
| 4.3.3 构建金门克隆Level0重组质粒pICSL01005::RPR | 第49-50页 |
| 4.3.4 构建金门克隆Level1重组质粒 | 第50-54页 |
| 4.4 本章小结与讨论 | 第54-55页 |
| 第五章 NLR蛋白对RPR1和RPR2的功能分析 | 第55-64页 |
| 5.1 实验材料 | 第55页 |
| 5.2 实验方法 | 第55-58页 |
| 5.2.1 农杆菌注射法 | 第55-56页 |
| 5.2.2 激光共聚焦显微技术 | 第56页 |
| 5.2.3 反转录PCR | 第56-58页 |
| 5.3 实验结果 | 第58-62页 |
| 5.3.1 蛋白RPR1和RPR2都定位于植物细胞核 | 第58-59页 |
| 5.3.2 早期HR反应 | 第59-60页 |
| 5.3.3 克隆RPR1和RPR2的CDS序列 | 第60-62页 |
| 5.4 本章小结与讨论 | 第62-64页 |
| 第六章 全文结论 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 作者简历 | 第77页 |
