| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 主要符号表 | 第12-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-27页 |
| 1.1 细菌漆酶的结构与特性 | 第13-19页 |
| 1.1.1 漆酶的催化反应与生理功能 | 第13-14页 |
| 1.1.2 细菌漆酶的分布与特性 | 第14-16页 |
| 1.1.3 Bacilluslicheniformis微生物学特性 | 第16-17页 |
| 1.1.4 Bacilluslicheniformis的含铜氧化酶 | 第17-19页 |
| 1.2 Bacilluslicheniformis漆酶的研究进展 | 第19-22页 |
| 1.2.1 野生型BliCotA | 第19-20页 |
| 1.2.2 Escherichiacoli原核表达 | 第20-21页 |
| 1.2.3 Pichiapastoris真核表达 | 第21-22页 |
| 1.3 漆酶在离子液体中的催化反应 | 第22-25页 |
| 1.3.1 离子液体与漆酶的相容性 | 第22-23页 |
| 1.3.2 筛选嗜盐性漆酶 | 第23-24页 |
| 1.3.3 漆酶定点突变 | 第24页 |
| 1.3.4 介质工程 | 第24-25页 |
| 1.3.5 基于离子液体的固定化技术 | 第25页 |
| 1.4 本研究的目的、意义和主要内容 | 第25-27页 |
| 1.4.1 本研究相关的科学与技术问题 | 第25-26页 |
| 1.4.2 本研究的目的和意义 | 第26页 |
| 1.4.3 本研究的技术路线和主要内容 | 第26-27页 |
| 第二章 BacilluslicheniformisYlmD基因的异源表达与活性鉴定 | 第27-49页 |
| 2.1 引言 | 第27页 |
| 2.2 材料与方法 | 第27-33页 |
| 2.2.1 材料与试剂 | 第27-28页 |
| 2.2.2 密码子优化 | 第28-29页 |
| 2.2.3 E.coliDH5ɑ感受态细胞的制备 | 第29页 |
| 2.2.4 引物设计与基因合成 | 第29-30页 |
| 2.2.5 重组载体的构建 | 第30-31页 |
| 2.2.6 转化DH5ɑ及阳性克隆筛选 | 第31页 |
| 2.2.7 转化BL21(DE3) | 第31-32页 |
| 2.2.8 YlmD的大量表达及纯化 | 第32页 |
| 2.2.9 活性测试 | 第32-33页 |
| 2.2.10 生物信息学分析 | 第33页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第33-48页 |
| 2.3.1 密码子优化 | 第33-35页 |
| 2.3.2 基因克隆 | 第35-39页 |
| 2.3.3 YlmD蛋白的表达与鉴定 | 第39-42页 |
| 2.3.4 YlmD的生化鉴定 | 第42-46页 |
| 2.3.5 生物信息学分析 | 第46-48页 |
| 2.4 本章小结 | 第48-49页 |
| 第三章 BacilluslicheniformisCotA的表达及其高温催化特性的研究 | 第49-71页 |
| 3.1 引言 | 第49页 |
| 3.2 材料与方法 | 第49-55页 |
| 3.2.1 实验材料与试剂 | 第49-50页 |
| 3.2.2 分子克隆 | 第50-52页 |
| 3.2.3 蛋白表达 | 第52-53页 |
| 3.2.4 高温酶活测试 | 第53-54页 |
| 3.2.5 BliCotA/HOBT高温处理硫酸盐浆 | 第54-55页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第55-69页 |
| 3.3.1 CotA密码子优化及基因合成 | 第55-56页 |
| 3.3.2 分子克隆和蛋白表达 | 第56-59页 |
| 3.3.3 高温漆酶活力分析方法 | 第59-62页 |
| 3.3.4 干扰因素分析 | 第62-65页 |
| 3.3.5 BliCotA的高温催化特性 | 第65-68页 |
| 3.3.6 BliCotA/HOBT高温漂白纸浆的初步实验 | 第68-69页 |
| 3.4 本章小节 | 第69-71页 |
| 第四章 Bacilluslicheniformis漆酶与离子液体相互作用的分子机制研究 | 第71-93页 |
| 4.1 引言 | 第71-72页 |
| 4.2 材料与方法 | 第72-75页 |
| 4.2.1 酶与试剂 | 第72页 |
| 4.2.2 蛋白质序列 | 第72-73页 |
| 4.2.3 多序列比对和同源建模 | 第73页 |
| 4.2.4 分子对接 | 第73-74页 |
| 4.2.5 化学分析测试 | 第74-75页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第75-91页 |
| 4.3.1 氨基酸序列比对 | 第75-77页 |
| 4.3.2 同源模建 | 第77-78页 |
| 4.3.3 模型评价 | 第78-80页 |
| 4.3.4 漆酶与木质素单体模型化合物分子对接 | 第80-85页 |
| 4.3.5 漆酶与木质素二聚体和寡聚体模型物分子对接 | 第85-86页 |
| 4.3.6 漆酶与烷基咪唑离子液体的分子对接 | 第86-88页 |
| 4.3.7 烷基咪唑离子液体对漆酶催化抑制动力学 | 第88-91页 |
| 4.4 本章小结 | 第91-93页 |
| 结论 | 第93-96页 |
| 本论文的主要结论 | 第93-94页 |
| 本论文创新之处 | 第94-95页 |
| 对未来工作建议 | 第95-96页 |
| 参考文献 | 第96-104页 |
| 攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第104-105页 |
| 致谢 | 第105-106页 |
| 附件 | 第106页 |
