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虾夷扇贝卵黄蛋白原基因克隆、表达和免疫功能研究

摘要第5-8页
Abstract第8-10页
前言第14-16页
第一章 文献综述第16-39页
    1 贝类的免疫防御机制第16-20页
        1.1 先天性免疫和获得性免疫第16页
        1.2 贝类免疫系统第16-20页
    2 卵黄蛋白原研究概述第20-31页
        2.1 卵黄蛋白原的合成第21-22页
        2.2 卵黄蛋白原的结构特征第22-26页
        2.3 卵黄蛋白原的生物学功能第26-29页
        2.4 海洋贝类卵黄蛋白原的研究现状第29-31页
    3 母源性免疫研究概述第31-38页
        3.1 母源免疫因子第32-33页
        3.2 母源免疫在水产动物中的研究进展第33-37页
        3.3 母源免疫在水产动物研究中存在的问题第37-38页
    4 本研究的目的和意义第38-39页
第二章 虾夷扇贝卵黄蛋白原基因克隆及表达规律的研究第39-62页
    引言第39-40页
    1 材料与方法第40-49页
        1.1 材料来源与暂养第40页
        1.2 总 RNA 提取第40-42页
        1.3 cDNA 合成及质量检测第42-43页
        1.4 卵黄蛋白原基因克隆第43-47页
        1.5 序列分析第47页
        1.6 组织表达分析第47-48页
        1.7 卵巢中卵黄蛋白原 mRNA 年度表达规律第48-49页
        1.8 卵黄蛋白原基因对细菌刺激的响应模式第49页
    2 结果第49-59页
        2.1 RNA 及 cDNA 质量第49-50页
        2.2 卵黄蛋白原基因 cDNA 序列特征第50-56页
        2.3 卵黄蛋白原在不同组织的表达第56-57页
        2.4 卵黄蛋白原在卵巢发育不同时期的表达变化第57-58页
        2.5 鳗弧菌刺激虾夷扇贝后卵黄蛋白原的表达模式第58-59页
    3 讨论第59-62页
第三章 虾夷扇贝卵黄蛋白原结构域的体外表达及免疫活性第62-77页
    引言第62-63页
    1 材料与方法第63-69页
        1.1 RNA 提取及反转录第63页
        1.2 表达载体的构建第63-64页
        1.3 重组蛋白的表达与检测第64-65页
        1.4 重组蛋白的纯化第65-66页
        1.5 重组蛋白的复性第66-67页
        1.6 重组蛋白 Western blot 鉴定第67-68页
        1.7 重组蛋白与细菌的结合第68页
        1.8 重组蛋白与 LTA、LPS 的结合第68-69页
        1.9 重组蛋白抑菌活性检测第69页
    2 结果第69-75页
        2.1 重组蛋白和 TRX-His-tag peptide 的表达、纯化第69-72页
        2.2 重组蛋白与细菌的结合活性第72-73页
        2.3 重组蛋白与 LTA 和 LPS 结合的活性第73-74页
        2.4 重组蛋白的抑菌作用第74-75页
    3 讨论第75-77页
第四章 虾夷扇贝卵黄蛋白原的分离纯化及抑菌功能第77-87页
    引言第77-78页
    1 材料与方法第78-81页
        1.1 材料来源第78页
        1.2 样品前处理第78页
        1.3 卵黄蛋白原的分离纯化及检测第78-79页
        1.4 BCA 法测定蛋白浓度第79-80页
        1.5 卵黄蛋白原抑菌活性研究第80-81页
    2 结果第81-85页
        2.1 卵黄蛋白原的分离纯化及鉴定第81-83页
        2.2 蛋白浓度测定第83页
        2.3 卵黄蛋白原的抑菌活性第83-85页
    3 讨论第85-87页
第五章 虾夷扇贝C型凝集素母源传递与抑菌作用的初步研究第87-96页
    引言第87-88页
    1 材料与方法第88-91页
        1.1 虾夷扇贝来源与暂养:第88页
        1.2 鳗弧菌刺激实验第88页
        1.3 虾夷扇贝卵巢中 C 型凝集素基因对细菌感染的响应第88-89页
        1.4 母源 C 型凝集素在虾夷扇贝卵和胚胎发育早期过程中表达量的变化第89-90页
        1.5 母源 C 型凝集素的抑菌作用第90-91页
    2 结果第91-93页
        2.1 虾夷扇贝卵巢中 C 型凝集素基因对鳗弧菌注射感染的响应第91页
        2.2 C 型凝集素在虾夷扇贝卵子和早期胚胎的相对表达量第91-92页
        2.3 虾夷扇贝母源 C 型凝集素的抑菌作用第92-93页
    3 讨论第93-96页
参考文献第96-112页
致谢第112-113页
附录第113-114页

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