| CONTENTS | 第5-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第11-21页 |
| 1.1 PoRV概述 | 第11-18页 |
| 1.1.1 PoRV的病毒形态 | 第11页 |
| 1.1.2 PoRV的群分类 | 第11-12页 |
| 1.1.3 PoRV的理化特性 | 第12页 |
| 1.1.4 PoRV的培养特性 | 第12页 |
| 1.1.5 PoRV的基因组结构 | 第12-13页 |
| 1.1.6 PoRV主要结构蛋白 | 第13-14页 |
| 1.1.7 PoRV主要非结构蛋白 | 第14-15页 |
| 1.1.8 RV复制机制 | 第15-16页 |
| 1.1.9 轮状病毒流行现状 | 第16页 |
| 1.1.10 PoRV的诊断 | 第16-17页 |
| 1.1.11 PoRV的预防及控制 | 第17-18页 |
| 1.2 抗原表位研究方法 | 第18-19页 |
| 1.2.1 B细胞抗原表位研究方法概况 | 第18-19页 |
| 1.2.2 T细胞抗原表位研究方法概况 | 第19页 |
| 1.3 RV抗原表位研究进展 | 第19页 |
| 1.4 研究意义 | 第19-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-35页 |
| 2.1 材料 | 第21-22页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第21页 |
| 2.1.2 主要仪器耗材 | 第21页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第21-22页 |
| 2.1.4 引物 | 第22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-35页 |
| 2.2.1 目的基因的克隆 | 第22-26页 |
| 2.2.2 目的蛋白的表达及鉴定 | 第26-28页 |
| 2.2.3 单克隆抗体的制备 | 第28-31页 |
| 2.2.4 单克隆抗抗的鉴定 | 第31-33页 |
| 2.2.5 蛋白的表位鉴定 | 第33-35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-49页 |
| 3.1 目的基因的克隆 | 第35-37页 |
| 3.1.1 VP7基因扩增 | 第35-36页 |
| 3.1.2 重组质粒的酶切鉴定 | 第36页 |
| 3.1.3 生物学软件分析结果 | 第36-37页 |
| 3.2 重组蛋白的表达及鉴定 | 第37-39页 |
| 3.2.1 重组蛋白的表达 | 第37-38页 |
| 3.2.2 重组蛋白的纯化 | 第38-39页 |
| 3.2.3 重组蛋白的Western blot鉴定 | 第39页 |
| 3.3 单克隆抗体的制备 | 第39-41页 |
| 3.3.1 间接ELISA检测方法的建立 | 第39-40页 |
| 3.3.2 杂交瘤细胞株的建立 | 第40-41页 |
| 3.3.3 抗体效价测定及MAb亚类鉴定 | 第41页 |
| 3.4 单克隆抗体的鉴定 | 第41-45页 |
| 3.4.1 Western blot鉴定 | 第41-42页 |
| 3.4.2 间接免疫劳光鉴定 | 第42-44页 |
| 3.4.3 MTT中和试验结果 | 第44-45页 |
| 3.5 抗原表位的鉴定 | 第45-49页 |
| 3.5.1 蛋白特性分析 | 第45页 |
| 3.5.2 分段蛋白的表达 | 第45-46页 |
| 3.5.3 Western-blot鉴定抗原表位 | 第46-47页 |
| 3.5.4 ELISA筛选抗原表位 | 第47-48页 |
| 3.5.5 抗原表位保守性分析 | 第48-49页 |
| 4 讨论 | 第49-53页 |
| 4.1 基因的克隆和蛋白的表达 | 第49-50页 |
| 4.2 单克隆抗体的制备及其鉴定 | 第50-51页 |
| 4.3 抗原表位的鉴定 | 第51-53页 |
| 5 结论 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-60页 |
| 附录 | 第60-61页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第61页 |