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下调ubc9对人肝星状细胞增殖的影响及其机制研究

摘要第3-5页
ABSTRACT第5-6页
第1章 引言第10-13页
第2章 材料与方法第13-26页
    2.1 实验材料第13-15页
        2.1.1 实验细胞第13页
        2.1.2 主要试剂第13-14页
        2.1.3 主要仪器第14-15页
    2.2 实验方法第15-17页
        2.2.1 器材灭菌和去 RNA 酶第15页
        2.2.2 体外细胞培养第15-16页
        2.2.3 实验相关液体的配制第16-17页
    2.3 ubc9 在 LX-2 细胞内的表达水平第17-21页
        2.3.1 实验分组第17页
        2.3.2 RT-PCR 检测各组细胞内 ubc9 mRNA 的表达第17-19页
        2.3.3 Western blot 检测各组细胞内 ubc9 蛋白的表达第19-21页
    2.4 下调 ubc9 对 LX-2 细胞增殖的影响及其机制第21-25页
        2.4.1 干扰质粒的构建与筛选第21-23页
        2.4.2 质粒转染 LX-2 细胞第23-24页
        2.4.3 应用 RT-PCR 检测转染沉默 ubc9 的质粒以及各对照组细胞内 ubc9基因 mRNA 的表达水平第24页
        2.4.4 应用 Western blot 方法检测各组细胞内 ubc9 和α-SMA 蛋白的表达水平第24页
        2.4.5 应用流式方法检测各组细胞的周期与凋亡第24-25页
        2.4.6 应用酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测各组细胞分泌 TNF-α和IL-6 的量第25页
    2.5 统计学处理第25-26页
第3章 实验结果第26-33页
    3.1 RT-PCR 检测分析 LX-2 细胞内 ubc9 的表达水平第26页
    3.2 Western blot 检测分析 LX-2 细胞内 ubc9 的表达水平第26-27页
    3.3 RT-PCR 检测分析 mir ubc9 沉默 ubc9 的效果第27-28页
    3.4 Western blot 检测分析转染 mir ubc9 后,LX2 细胞内 ubc9 与α-SMA 的表达水平第28页
    3.5 流式检测结果分析第28-30页
        3.5.1 细胞周期结果分析第28-29页
        3.5.2 细胞凋亡结果分析第29-30页
    3.6 酶联免疫吸附试验(ELISA)检测结果分析第30-31页
    3.7 小结第31-32页
    3.8 在下调 ubc9 基因后,IKBα、p65 与 Bcl-2 蛋白在 LX-2 细胞内表达水平的变化第32-33页
第4章 讨论第33-37页
第5章 结论第37-38页
致谢第38-39页
参考文献第39-43页
攻读学位期间的研究成果第43-44页
综述第44-52页
    参考文献第51-52页

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