摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
第1章 引言 | 第10-13页 |
第2章 材料与方法 | 第13-26页 |
2.1 实验材料 | 第13-15页 |
2.1.1 实验细胞 | 第13页 |
2.1.2 主要试剂 | 第13-14页 |
2.1.3 主要仪器 | 第14-15页 |
2.2 实验方法 | 第15-17页 |
2.2.1 器材灭菌和去 RNA 酶 | 第15页 |
2.2.2 体外细胞培养 | 第15-16页 |
2.2.3 实验相关液体的配制 | 第16-17页 |
2.3 ubc9 在 LX-2 细胞内的表达水平 | 第17-21页 |
2.3.1 实验分组 | 第17页 |
2.3.2 RT-PCR 检测各组细胞内 ubc9 mRNA 的表达 | 第17-19页 |
2.3.3 Western blot 检测各组细胞内 ubc9 蛋白的表达 | 第19-21页 |
2.4 下调 ubc9 对 LX-2 细胞增殖的影响及其机制 | 第21-25页 |
2.4.1 干扰质粒的构建与筛选 | 第21-23页 |
2.4.2 质粒转染 LX-2 细胞 | 第23-24页 |
2.4.3 应用 RT-PCR 检测转染沉默 ubc9 的质粒以及各对照组细胞内 ubc9基因 mRNA 的表达水平 | 第24页 |
2.4.4 应用 Western blot 方法检测各组细胞内 ubc9 和α-SMA 蛋白的表达水平 | 第24页 |
2.4.5 应用流式方法检测各组细胞的周期与凋亡 | 第24-25页 |
2.4.6 应用酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测各组细胞分泌 TNF-α和IL-6 的量 | 第25页 |
2.5 统计学处理 | 第25-26页 |
第3章 实验结果 | 第26-33页 |
3.1 RT-PCR 检测分析 LX-2 细胞内 ubc9 的表达水平 | 第26页 |
3.2 Western blot 检测分析 LX-2 细胞内 ubc9 的表达水平 | 第26-27页 |
3.3 RT-PCR 检测分析 mir ubc9 沉默 ubc9 的效果 | 第27-28页 |
3.4 Western blot 检测分析转染 mir ubc9 后,LX2 细胞内 ubc9 与α-SMA 的表达水平 | 第28页 |
3.5 流式检测结果分析 | 第28-30页 |
3.5.1 细胞周期结果分析 | 第28-29页 |
3.5.2 细胞凋亡结果分析 | 第29-30页 |
3.6 酶联免疫吸附试验(ELISA)检测结果分析 | 第30-31页 |
3.7 小结 | 第31-32页 |
3.8 在下调 ubc9 基因后,IKBα、p65 与 Bcl-2 蛋白在 LX-2 细胞内表达水平的变化 | 第32-33页 |
第4章 讨论 | 第33-37页 |
第5章 结论 | 第37-38页 |
致谢 | 第38-39页 |
参考文献 | 第39-43页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第43-44页 |
综述 | 第44-52页 |
参考文献 | 第51-52页 |