| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-18页 |
| 1 沙门氏菌研究概况 | 第11-13页 |
| 1.1 沙门氏菌耐药机制及耐药现状 | 第11-13页 |
| 2 原生质体融合研究进展 | 第13-17页 |
| 2.1 原生质体制备与再生影响因素 | 第13-15页 |
| 2.2 原生质体融合的方法 | 第15-16页 |
| 2.3 融合子的筛选方法 | 第16页 |
| 2.4 原生质体融合技术的应用前景与展望 | 第16-17页 |
| 3 本研究的目的及意义 | 第17-18页 |
| 第二章 鸭源沙门氏菌亲本菌株的筛选 | 第18-29页 |
| 1 材料 | 第18-19页 |
| 1.1 供试菌株 | 第18页 |
| 1.2 培养基 | 第18页 |
| 1.3 试剂 | 第18页 |
| 1.4 诊断血清 | 第18页 |
| 1.5 试验仪器 | 第18-19页 |
| 2 方法 | 第19-20页 |
| 2.1 鸭源沙门氏菌亲本菌株筛选 | 第19-20页 |
| 2.1.1 鸭源沙门氏菌的复苏与纯化 | 第19页 |
| 2.1.2 鸭源沙门氏菌血清型鉴定 | 第19-20页 |
| 2.1.3 鸭源沙门氏菌的药敏试验 | 第20页 |
| 2.1.4 亲本鸭源沙门氏菌最低抑菌浓度(MIC)测定 | 第20页 |
| 2.1.5 亲本鸭源沙门氏菌生长曲线测定 | 第20页 |
| 3 结果 | 第20-27页 |
| 3.1 鸭源沙门氏菌筛选结果 | 第21-27页 |
| 3.1.1 鸭源沙门氏菌的血清型鉴定结果 | 第21-22页 |
| 3.1.2 鸭源沙门氏菌的药敏试验结果 | 第22-24页 |
| 3.1.3 亲本鸭源沙门氏菌MIC测定结果 | 第24-25页 |
| 3.1.4 亲本菌株生长曲线测定结果 | 第25-27页 |
| 3.2 亲本菌株在含抗生素培养基上的培养试验 | 第27页 |
| 4 讨论 | 第27-29页 |
| 第三章 鸭源沙门氏菌原生质体制备、融合及融合菌株的筛选 | 第29-40页 |
| 1 材料 | 第29-30页 |
| 1.1 供试菌株 | 第29页 |
| 1.2 主要仪器 | 第29页 |
| 1.3 主要试剂 | 第29-30页 |
| 1.4 培养基 | 第30页 |
| 1.5 主要溶液配制 | 第30页 |
| 2 方法 | 第30-33页 |
| 2.1 原生质体制备、融合及融合菌株的筛选 | 第31-32页 |
| 2.1.1 鸭源沙门氏菌原生质体制备与再生 | 第31页 |
| 2.1.2 原生质体制备率与再生率计算公式 | 第31-32页 |
| 2.1.3 原生质体融合及融合菌株筛选 | 第32页 |
| 2.1.4 融合菌株稳定性试验及鉴定 | 第32页 |
| 2.1.5 融合菌株及亲本菌株生化试验 | 第32页 |
| 2.1.6 融合菌株的血清型鉴定 | 第32页 |
| 2.2 融合菌株的双重PCR检测 | 第32-33页 |
| 2.2.1 基因组DNA的提取 | 第32-33页 |
| 2.2.2 双重PCR检测 | 第33页 |
| 3 结果 | 第33-38页 |
| 3.1 原生质体制备、融合及融合菌株的筛选 | 第33-37页 |
| 3.1.1 亲本菌株原生质体的制备率与再生率 | 第33-34页 |
| 3.1.2 菌落及菌体形态观察 | 第34-36页 |
| 3.1.3 融合菌株及亲本菌株生化试验结果 | 第36-37页 |
| 3.1.4 融合菌株血清型鉴定结果 | 第37页 |
| 3.2 双重PCR检测结果 | 第37-38页 |
| 4 讨论 | 第38-40页 |
| 第四章 鸭源沙门氏菌融合菌株免疫原性初步研究 | 第40-58页 |
| 1 材料 | 第40页 |
| 1.1 供试菌株 | 第40页 |
| 1.2 试验动物 | 第40页 |
| 1.3 主要试剂 | 第40页 |
| 1.4 主要器材 | 第40页 |
| 2 方法 | 第40-44页 |
| 2.1 菌液制备 | 第40页 |
| 2.2 菌株毒力测定 | 第40-41页 |
| 2.3 疫苗制备及动物保护试验 | 第41-42页 |
| 2.3.1 抗原制备 | 第41页 |
| 2.3.2 蜂胶佐剂制备 | 第41页 |
| 2.3.3 疫苗制备 | 第41页 |
| 2.3.4 蜂胶安全性检测 | 第41页 |
| 2.3.5 攻毒保护试验 | 第41-42页 |
| 2.4 免疫程序 | 第42页 |
| 2.5 血清抗体水平检测 | 第42-44页 |
| 2.5.1 主要试剂的配制 | 第42页 |
| 2.5.2 菌体裂解抗原制备 | 第42-43页 |
| 2.5.3 阳性血清及阴性血清的制备 | 第43页 |
| 2.5.4 间接ELISA操作步骤 | 第43页 |
| 2.5.5 间接ELISA参数选择 | 第43页 |
| 2.5.6 临界值判定标准 | 第43-44页 |
| 2.5.7 特异性试验 | 第44页 |
| 2.5.8. 重复性试验 | 第44页 |
| 2.5.9 血清抗体效价测定 | 第44页 |
| 3 结果 | 第44-56页 |
| 3.1 菌株毒力测定结果 | 第44-45页 |
| 3.2 疫苗安全性结果 | 第45页 |
| 3.3 动物保护试验结果 | 第45-46页 |
| 3.4 血清抗体水平检测结果 | 第46-56页 |
| 3.4.1 间接ELISA参数选择结果 | 第46-48页 |
| 3.4.2 临界值的确定 | 第48页 |
| 3.4.3 特异性试验结果 | 第48-49页 |
| 3.4.4 重复性试验结果 | 第49-50页 |
| 3.4.5 血清抗体效价测定结果 | 第50-56页 |
| 4 讨论 | 第56-57页 |
| 5 结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-64页 |
| 致谢 | 第64页 |