中文摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
符号说明 | 第8-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-27页 |
1. S. agalactiae生物学特性 | 第12-17页 |
1.1 S. agalactiae的生理、生化特性 | 第12-13页 |
1.2 S. agalactiae的荚膜多糖血清型 | 第13页 |
1.3 S. agalactiae的主要毒力因子 | 第13-17页 |
1.3.1 荚膜多糖 | 第13-14页 |
1.3.2 溶血素 | 第14-15页 |
1.3.3 环磷酸腺苷cAMP因子 | 第15页 |
1.3.4 超氧化物歧化酶 | 第15-16页 |
1.3.5 透明质酸酶 | 第16-17页 |
2. 多位点序列分型(MLST)及其在细菌分子分型中的应用 | 第17-22页 |
2.1 MLST的概念 | 第17页 |
2.2 MLST方法的创建及发展 | 第17-19页 |
2.3 MLST分析的步骤 | 第19-20页 |
2.4 MLST分析的策略以及结果的解释 | 第20-21页 |
2.5 MLST分型方法的应用及优缺点 | 第21-22页 |
3. 脉冲场凝胶电泳(PFGE)及其在细菌分子分型中的应用 | 第22-25页 |
3.1 PFGE技术概念及发展过程 | 第22-23页 |
3.2 PFGE的主要影响因素 | 第23页 |
3.3 PFGE结果的解释 | 第23-24页 |
3.4 PFGE与相关技术的比较与联用 | 第24-25页 |
4 目的及意义 | 第25-27页 |
第二章 不同动物源无乳链球菌的分离、鉴定及分子血清型 | 第27-39页 |
1. 材料 | 第27-29页 |
1.1 细菌来源 | 第27页 |
1.2 主要试剂 | 第27-28页 |
1.3 主要仪器设备 | 第28-29页 |
2. 方法 | 第29-33页 |
2.1 病原菌的复苏纯化 | 第29-31页 |
2.1.1 S. agalactiae的培养 | 第29页 |
2.1.2 革兰氏染色 | 第29-30页 |
2.1.3 生理生化特性 | 第30页 |
2.1.4 S. agalactiae的DNA提取 | 第30-31页 |
2.1.5 S. agalactiae的cfb基因鉴定 | 第31页 |
2.2 分子血清分型 | 第31-33页 |
2.2.1 PCR扩增程序及条件 | 第31-32页 |
2.2.2 琼脂糖电泳鉴定 | 第32-33页 |
3. 结果 | 第33-36页 |
3.1 分离株的表型特征 | 第33-34页 |
3.1.1 细菌形态特征 | 第33-34页 |
3.1.2 细菌生理生化特征 | 第34页 |
3.2 cfb基因特异性鉴定 | 第34-35页 |
3.3 鉴定荚膜多糖分子血清型 | 第35-36页 |
4. 讨论 | 第36-38页 |
5. 小结 | 第38-39页 |
第三章 不同动物源无乳链球菌的多位点序列分型 | 第39-46页 |
1. 材料 | 第39-40页 |
1.1 菌株 | 第39页 |
1.2 主要试剂 | 第39页 |
1.3 主要仪器设备 | 第39-40页 |
2. 方法 | 第40-42页 |
2.1 无乳链球菌基因组DNA提取 | 第40页 |
2.2 无乳链球菌管家基因扩增 | 第40-41页 |
2.2.1 管家基因的选取与引物合成 | 第40-41页 |
2.2.2 管家基因PCR扩增程序及条件 | 第41页 |
2.2.3 PCR扩增产物测序 | 第41页 |
2.3 MLST序列数据分析 | 第41-42页 |
3.结果 | 第42-43页 |
3.1 菌株序列型的确定 | 第42页 |
3.2 克隆群的划分 | 第42-43页 |
4. 讨论 | 第43-45页 |
5. 小结 | 第45-46页 |
第四章 无乳链球菌的脉冲场凝胶电泳 | 第46-56页 |
1. 材料 | 第46-47页 |
1.1 菌株 | 第46页 |
1.2 主要试剂 | 第46页 |
1.3 主要仪器设备 | 第46-47页 |
2. 方法 | 第47-50页 |
2.1 胶块制备 | 第47页 |
2.2 细胞裂解 | 第47-48页 |
2.3 洗胶块 | 第48页 |
2.4 胶块内DNA的酶切 | 第48-49页 |
2.5 加样 | 第49页 |
2.6 电泳 | 第49-50页 |
2.7 图像获取 | 第50页 |
2.8 电泳图像聚类分析 | 第50页 |
3.结果 | 第50-53页 |
3.1 人源无乳链球菌PFGE分型与聚类分析 | 第50-51页 |
3.2 鱼源无乳链球菌PFGE分型与聚类分析 | 第51页 |
3.3 牛源无乳链球菌PFGE分型与聚类分析 | 第51页 |
3.4 兔源无乳链球菌PFGE分型与聚类分析 | 第51页 |
3.5 不同动物源性无乳链球菌PFGE分型差异性比较 | 第51-53页 |
4. 讨论 | 第53-55页 |
5. 小结 | 第55-56页 |
结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-68页 |
致谢 | 第68-69页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第69页 |