摘要 | 第3-5页 |
abstract | 第5-6页 |
第一章 文献综述 | 第9-19页 |
1.1 单增李斯特菌简介 | 第9-10页 |
1.2 单增李斯特菌的检测方法 | 第10-18页 |
1.2.1 培养检测 | 第10-11页 |
1.2.2 免疫学检测 | 第11-12页 |
1.2.3 聚合酶链式反应 | 第12-14页 |
1.2.4 等温核酸扩增反应 | 第14-17页 |
1.2.4.1 单增李斯特菌DNA检测方法 | 第14-16页 |
1.2.4.2 单增李斯特菌RNA检测方法 | 第16-17页 |
1.2.5 其它检测单增李斯特菌的方法 | 第17-18页 |
1.2.5.1 光谱技术 | 第17页 |
1.2.5.2 生物传感器 | 第17页 |
1.2.5.3 单链构象多态性分析法 | 第17-18页 |
1.3 本论文的研究意义与主要内容 | 第18-19页 |
第二章 环介导等温扩增反应对单增李斯特菌的检测 | 第19-37页 |
2.1 前言 | 第19-20页 |
2.2 材料和方法 | 第20-24页 |
2.2.1 仪器和试剂 | 第20-21页 |
2.2.1.1 实验仪器 | 第20-21页 |
2.2.1.2 实验试剂 | 第21页 |
2.2.2 特异性靶标DNA序列的查找 | 第21-22页 |
2.2.2.1 序列查找软件的功能介绍 | 第21-22页 |
2.2.2.2 序列查找 | 第22页 |
2.2.3 实验方案的引物设计 | 第22-23页 |
2.2.4 单增李斯特菌基因组DNA提取 | 第23-24页 |
2.3 结果与讨论 | 第24-34页 |
2.3.1 单增李斯特菌LAMP检测方案 | 第24-25页 |
2.3.2 实验方案的优化 | 第25-30页 |
2.3.2.1 不同温度的优化 | 第25-26页 |
2.3.2.2 引物序列的优化 | 第26-27页 |
2.3.2.3 引物数量的优化 | 第27-28页 |
2.3.2.4 内引物浓度的优化 | 第28-29页 |
2.3.2.5 牛血清白蛋白的优化 | 第29-30页 |
2.3.3 实验方案的可行性验证 | 第30-31页 |
2.3.4 实验方案的灵敏性检测 | 第31-32页 |
2.3.5 实验方案的特异性验证 | 第32-33页 |
2.3.6 实验方案抗干扰能力验证 | 第33-34页 |
2.4 本章小结 | 第34-37页 |
第三章 变性泡介导的链交换扩增反应对单增李斯特菌的检测 | 第37-55页 |
3.1 前言 | 第37-38页 |
3.2 材料和方法 | 第38-42页 |
3.2.1 仪器和试剂 | 第38-39页 |
3.2.1.1 实验仪器 | 第38-39页 |
3.2.1.2 实验试剂 | 第39页 |
3.2.2 特异性靶标序列的查找 | 第39-40页 |
3.2.3 实验方案的引物设计 | 第40-41页 |
3.2.4 单增李斯特菌基因组DNA提取和总RNA提取 | 第41-42页 |
3.3 结果与讨论 | 第42-51页 |
3.3.1 单增李斯特菌SEA检测方案 | 第42-43页 |
3.3.2 实验方案的优化 | 第43-46页 |
3.3.2.1 不同温度的优化 | 第43-44页 |
3.3.2.2 不同种酶的优化 | 第44-45页 |
3.3.2.3 十六烷基三甲基溴化铵和二甲基亚砜的优化 | 第45-46页 |
3.3.3 实验方案的可行性验证 | 第46-47页 |
3.3.4 实验方案的灵敏性检测 | 第47-48页 |
3.3.5 一步法检测单增李斯特菌RNA | 第48-50页 |
3.3.6 实验方案的特异性和抗干扰能力 | 第50-51页 |
3.4 常见RNA检测法比较 | 第51-52页 |
3.5 本章小结 | 第52-53页 |
3.6 两种实验方案的比较 | 第53-55页 |
结论 | 第55-57页 |
参考文献 | 第57-63页 |
附录:论文中使用的缩略词 | 第63-64页 |
致谢 | 第64-65页 |
攻读硕士学位期间发表的论文目录 | 第65-66页 |