| 摘要 | 第12-13页 |
| Abstract | 第13页 |
| 缩略词 | 第14-16页 |
| 前言 | 第16-44页 |
| 1. 轮状病毒概况 | 第16-17页 |
| 2. 轮状病毒基因组、蛋白与结构 | 第17-23页 |
| 2.1. 轮状病毒基因组 | 第17页 |
| 2.2. 轮状病毒蛋白与结构 | 第17-23页 |
| 3. 轮状病毒分类与流行病学 | 第23-28页 |
| 3.1. 轮状病毒分类 | 第23-24页 |
| 3.2. 轮状病毒流行病学 | 第24-28页 |
| 3.2.1. 轮状病毒的季节性流行 | 第25-26页 |
| 3.2.2. 轮状病毒的地域性流行 | 第26-27页 |
| 3.2.3. 轮状病毒的流行趋势 | 第27-28页 |
| 4. 轮状病毒感染与致病机制 | 第28-32页 |
| 4.1. 轮状病毒的传染源与传播途径 | 第28-29页 |
| 4.2. 轮状病毒的生活史 | 第29-31页 |
| 4.3. 轮状病毒的致病机制 | 第31-32页 |
| 5. 轮状病毒的免疫保护机制 | 第32-34页 |
| 5.1. 天然免疫 | 第33页 |
| 5.2. 细胞免疫 | 第33页 |
| 5.3. 体液免疫 | 第33-34页 |
| 6. 轮状病毒的检测、治疗与预防 | 第34-40页 |
| 6.1. 轮状病毒的检测 | 第34-36页 |
| 6.1.1. 经典检测技术 | 第34页 |
| 6.1.2. 免疫学检测技术 | 第34-35页 |
| 6.1.3. 基因检测技术 | 第35-36页 |
| 6.2. 轮状病毒的预防与治疗 | 第36-37页 |
| 6.3. 轮状病毒疫苗研究进展 | 第37-40页 |
| 7. 轮状病毒动物模型 | 第40-43页 |
| 7.1. 轮状病毒动物模型对轮状病毒感染发病及其机理的研究 | 第41页 |
| 7.2. 轮状病毒动物模型对轮状病毒毒力和种属特异性的研究 | 第41-42页 |
| 7.3. 轮状病毒动物模型对免疫及相关保护性的研究 | 第42-43页 |
| 8. 本研究的目的与意义 | 第43-44页 |
| 材料与方法 | 第44-65页 |
| 1. 材料 | 第44-48页 |
| 1.1. 主要仪器 | 第44-45页 |
| 1.2. 病毒、细胞及实验动物 | 第45页 |
| 1.2.1. 病毒 | 第45页 |
| 1.2.2. 细胞 | 第45页 |
| 1.2.3. 实验动物 | 第45页 |
| 1.3. 引物与探针 | 第45-46页 |
| 1.4. 酶和单抗 | 第46页 |
| 1.5. 试剂与耗材 | 第46页 |
| 1.6. 培养基及常用溶液配制 | 第46-48页 |
| 1.6.1. 细胞培养基的配置 | 第46页 |
| 1.6.2. 细胞生物学实验常用液的配置 | 第46-47页 |
| 1.6.3. 免疫组化实验和苏木素·伊红染色用液的配置 | 第47页 |
| 1.6.4. ELISPOT实验用液的配置 | 第47-48页 |
| 1.6.5. EIA检测试验试剂 | 第48页 |
| 2. 方法 | 第48-65页 |
| 2.1. 常规细胞生物学实验 | 第48-50页 |
| 2.1.1. 细胞复苏 | 第48页 |
| 2.1.2. 细胞换液 | 第48-49页 |
| 2.1.3. 细胞传代 | 第49页 |
| 2.1.4. 细胞冻存 | 第49页 |
| 2.1.5. 细胞计数 | 第49-50页 |
| 2.2. 病毒的培养和浓缩 | 第50-55页 |
| 2.2.1. 轮状病毒的培养 | 第50页 |
| 2.2.2. 轮状病毒的鉴定(RT-PCR法) | 第50-53页 |
| 2.2.3. 轮状病毒感染滴度的检测(酶联免疫斑点法) | 第53-54页 |
| 2.2.4. 轮状病毒的浓缩 | 第54页 |
| 2.2.5. 轮状病毒攻毒用病毒库的建立 | 第54-55页 |
| 2.3. 动物实验方法 | 第55-57页 |
| 2.3.1. 小鼠的皮下免疫 | 第55页 |
| 2.3.2. 乳鼠的腹腔注射被动免疫 | 第55页 |
| 2.3.3. 动物的分组与统计方法 | 第55-56页 |
| 2.3.4. 乳鼠的灌胃攻毒 | 第56页 |
| 2.3.5. 乳鼠攻毒后的监测 | 第56-57页 |
| 2.3.6. 乳鼠攻毒后的标本采集 | 第57页 |
| 2.4. 动物标本的处理和检测 | 第57-65页 |
| 2.4.1. 标本中病毒的核酸定量检测(Real-Time PCR) | 第57-58页 |
| 2.4.2. 组织病理制片方法 | 第58-60页 |
| 2.4.3. 组化染色 | 第60-61页 |
| 2.4.4. 免疫组织化学检测 | 第61-62页 |
| 2.4.5. 血清中和抗体水平的检测 | 第62-63页 |
| 2.4.6. ELISA检测抗体水平 | 第63-64页 |
| 2.4.7. ELISA检测抗原含量 | 第64-65页 |
| 结果与分析 | 第65-85页 |
| 1. 轮状病毒培养与滴度检测 | 第65-67页 |
| 1.1. 病毒培养与鉴定 | 第65-66页 |
| 1.2. 攻毒用病毒库的建立 | 第66-67页 |
| 1.3. 小结 | 第67页 |
| 2. 轮状病毒乳鼠动物模型的建立 | 第67-77页 |
| 2.1. 攻毒后乳鼠体征变化与体重变化 | 第67-68页 |
| 2.2. 腹泻情况与相关指标 | 第68-71页 |
| 2.2.1. 乳鼠攻毒后的腹泻情况 | 第68-69页 |
| 2.2.2. LLR毒株毒力的评价 | 第69-70页 |
| 2.2.3. 最大腹泻日龄探索 | 第70-71页 |
| 2.3. 排毒检测与最大可感日龄 | 第71-72页 |
| 2.4. 肠组织病变 | 第72-75页 |
| 2.4.1. 肠组织形态变化 | 第72-74页 |
| 2.4.2. 肠免疫组化观察 | 第74-75页 |
| 2.5. 肠道外感染探究 | 第75-77页 |
| 2.5.1. 病毒血症 | 第75页 |
| 2.5.2. 其他脏器感染探究 | 第75-77页 |
| 2.6. 小结 | 第77页 |
| 3. 模型的初步应用 | 第77-85页 |
| 3.1. 母传抗体模型 | 第77-81页 |
| 3.1.1. 抗体的传递 | 第78页 |
| 3.1.2. 攻毒后的各评价指标分析 | 第78-81页 |
| 3.2. 后天被动免疫模型 | 第81-84页 |
| 3.2.1. 抗体的传递 | 第81-82页 |
| 3.2.2. 攻毒及腹泻监测 | 第82-83页 |
| 3.2.3. 模型的优化 | 第83-84页 |
| 3.3. 小结 | 第84-85页 |
| 讨论 | 第85-90页 |
| 1. 粪便排毒检测指标的局限性与应用 | 第85-86页 |
| 2. 母传抗体模型中评价指标的应用与影响因素 | 第86-87页 |
| 2.1. 体征与体重变化指标 | 第86页 |
| 2.2. 腹泻评分指标 | 第86-87页 |
| 2.3. H.E.染色及IHC评价指标 | 第87页 |
| 2.4. 病毒血症评价指标 | 第87页 |
| 3. 母传抗体模型的局限性与后天被动免疫模型的潜在优势 | 第87-89页 |
| 4. 病毒的毒力与种属特异性 | 第89-90页 |
| 总结与展望 | 第90-91页 |
| 参考文献 | 第91-102页 |
| 致谢 | 第102页 |
