| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7页 |
| 英文缩略表 | 第15-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-32页 |
| 1.1 细菌中的碳代谢抑制及其调控机制 | 第16-23页 |
| 1.1.1 肠杆菌中的碳代谢抑制及其调控机制 | 第16-17页 |
| 1.1.2 厚壁菌中的碳代谢抑制及其调控机制 | 第17-18页 |
| 1.1.3 假单胞菌中的调控系统响应碳代谢抑制 | 第18-23页 |
| 1.2 假单胞菌中sRNA的功能研究 | 第23-30页 |
| 1.2.1 PrrF sRNAs间接影响群体效应 | 第24-25页 |
| 1.2.2 PhrS sRNA正调控PQS的合成 | 第25-26页 |
| 1.2.3 RsmZ sRNA家族涉及GacS/GacA双组份的激活 | 第26-29页 |
| 1.2.4 CrcZ及CrcY sRNA调控碳代谢抑制 | 第29-30页 |
| 1.3 题依据与技术路线 | 第30-32页 |
| 1.3.1 立题依据 | 第30-31页 |
| 1.3.2 技术路线 | 第31-32页 |
| 第二章 crcY的鉴定及表达分析 | 第32-51页 |
| 2.1 实验材料 | 第32-34页 |
| 2.1.1 菌株与质粒 | 第32页 |
| 2.1.2 培养基 | 第32-33页 |
| 2.1.3 本章实验涉及的试剂盒 | 第33页 |
| 2.1.4 实验主要仪器设备 | 第33-34页 |
| 2.1.5 引物设计 | 第34页 |
| 2.2 实验方法 | 第34-37页 |
| 2.2.1 Northern Blotting | 第34-36页 |
| 2.2.2 5’RACE实验 | 第36页 |
| 2.2.3 RNA的提取 | 第36页 |
| 2.2.4 cDNA的合成 | 第36页 |
| 2.2.5 荧光定量PCR | 第36-37页 |
| 2.3 结果与分析 | 第37-49页 |
| 2.3.1 crcY的分析与鉴定 | 第37-43页 |
| 2.3.2 crcY的表达水平分析 | 第43-49页 |
| 2.4 本章讨论 | 第49-51页 |
| 第三章 crcY缺失或过表达对碳源利用的影响 | 第51-69页 |
| 3.1 实验材料 | 第51-52页 |
| 3.1.1 菌株与质粒 | 第51页 |
| 3.1.2 培养基 | 第51页 |
| 3.1.3 抗生素、酶类及生化试剂 | 第51-52页 |
| 3.1.4 本章实验涉及的试剂盒 | 第52页 |
| 3.1.5 实验主要仪器设备 | 第52页 |
| 3.2 实验方法 | 第52-58页 |
| 3.2.1 细菌基因组DNA的提取 | 第52-53页 |
| 3.2.2 细菌质粒的提取 | 第53页 |
| 3.2.3 基因的PCR扩增 | 第53-55页 |
| 3.2.4 PCR产物的纯化 | 第55页 |
| 3.2.5 目的片段酶切及纯化 | 第55页 |
| 3.2.6 高保真酶扩增产物末端加A | 第55-56页 |
| 3.2.7 目的片段的连接及热激转化 | 第56-57页 |
| 3.2.8 三亲本结合实验 | 第57页 |
| 3.2.9 生长曲线测定 | 第57页 |
| 3.2.10 Biolog实验 | 第57-58页 |
| 3.3 结果与分析 | 第58-68页 |
| 3.3.1 crcY缺失突变株及过表达株的构建 | 第58-62页 |
| 3.3.2 crcY的缺失及过表达对碳源利用的影响 | 第62-68页 |
| 3.4 本章讨论 | 第68-69页 |
| 第四章 crcY缺失或过表达的其它生物学效应分析 | 第69-93页 |
| 4.1 实验材料 | 第69-70页 |
| 4.1.1 菌株与质粒 | 第69页 |
| 4.1.2 培养基 | 第69页 |
| 4.1.3 抗生素、酶类及生化试剂 | 第69-70页 |
| 4.1.4 实验主要仪器设备 | 第70页 |
| 4.1.5 引物设计 | 第70页 |
| 4.2 实验方法 | 第70-73页 |
| 4.2.1 趋化实验 | 第70-71页 |
| 4.2.2 固氮酶活测定 | 第71页 |
| 4.2.3 反硝化实验 | 第71-72页 |
| 4.2.4 冲击实验 | 第72-73页 |
| 4.3 结果与分析 | 第73-91页 |
| 4.3.1 不同生长条件下crcY的缺失对菌体的影响 | 第73-83页 |
| 4.3.2 crcY的缺失对菌体运动性的影响 | 第83-85页 |
| 4.3.3 crcY的缺失对逆境条件下菌体生存的影响 | 第85-87页 |
| 4.3.4 crcY的缺失及过表达对菌体固氮酶活的影响 | 第87-90页 |
| 4.3.5 crcY的缺失对反硝化的影响 | 第90-91页 |
| 4.4 本章讨论 | 第91-93页 |
| 第五章 全文结论 | 第93-94页 |
| 参考文献 | 第94-104页 |
| 致谢 | 第104-105页 |
| 作者简历 | 第105页 |
