符号说明 | 第4-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
1 前言 | 第13-24页 |
1.1 ALV-J 病原学 | 第13-16页 |
1.1.1 ALV 亚群分类 | 第13页 |
1.1.2 ALV-J 的病毒及基因组结构 | 第13-16页 |
1.2 ALV-J 的流行病学 | 第16-17页 |
1.2.1 ALV-J 的危害 | 第16页 |
1.2.2 ALV-J 的感染方式 | 第16-17页 |
1.3 ALV-J 的临床表现 | 第17-18页 |
1.4 ALV-J 的诊断与净化 | 第18-20页 |
1.4.1 ALV-J 的诊断 | 第18-19页 |
1.4.2 ALV-J 的净化 | 第19-20页 |
1.5 ALV-J env 基因研究现状 | 第20-21页 |
1.5.1 ALV-J env 基因多态性 | 第20-21页 |
1.5.2 功能区对 ALV-J env 基因的影响 | 第21页 |
1.6 病毒的跨种传播 | 第21-23页 |
1.7 选择压研究现状 | 第23-24页 |
1.8 本研究的目的和意义 | 第24页 |
2 材料与方法 | 第24-35页 |
2.1 材料 | 第24-26页 |
2.1.1 实验细胞 | 第24页 |
2.1.2 实验动物 | 第24-25页 |
2.1.3 试验用菌种、病毒 | 第25页 |
2.1.4 主要试剂 | 第25-26页 |
2.1.5 主要仪器 | 第26页 |
2.2 研究方法 | 第26-35页 |
2.2.1 试验方案 | 第26-27页 |
2.2.2 试验方法 | 第27-35页 |
2.2.2.1 ALV-J TCID50的测定 | 第27页 |
2.2.2.2 荧光定量 PCR 测定 AZT 最佳作用浓度与时间 | 第27-29页 |
2.2.2.3 AZT 作用下 P1-SPF 株的连续传代 | 第29页 |
2.2.2.4 AZT 分离株 env 基因 PCR 扩增 | 第29-30页 |
2.2.2.5 AZT 分离株 env 基因克隆测序 | 第30-31页 |
2.2.2.6 AZT 分离株 env 基因序列分析 | 第31页 |
2.2.2.7 鸡胚成纤维细胞(CEF)的制备 | 第31页 |
2.2.2.8 P1-SPF 分离株依次感染不同宿主成纤维细胞 | 第31页 |
2.2.2.9 P0-NX0101 株依次体内感染不同品种宿主禽 | 第31-32页 |
2.2.2.10 体内感染不同宿主品种禽后病毒血症监测 | 第32-33页 |
2.2.2.11 间接免疫荧光(IFA)检测不同品种宿主禽感染情况 | 第33-34页 |
2.2.2.12 不同品种宿主禽病毒分离 | 第34页 |
2.2.2.13 不同宿主细胞与宿主禽分离株的 env 基因扩增、克隆测序、序列分析 | 第34页 |
2.2.1.14 不同品种宿主禽病理学及血液学观察 | 第34-35页 |
3 结果与分析 | 第35-59页 |
3.1 ALV-J TCID50的测定 | 第35页 |
3.2 荧光定量 PCR 测定 AZT 最佳作用浓度与时间 | 第35-39页 |
3.1.1 标准曲线的建立 | 第35-37页 |
3.1.1.1 目的基因的获取 | 第35-36页 |
3.1.1.2 目的基因的酶切鉴定 | 第36页 |
3.1.1.3 标准曲线建立 | 第36-37页 |
3.1.2 病毒生长曲线测定:2-△△CT法 | 第37-38页 |
3.1.3 AZT 最佳作用浓度与时间的确定 | 第38-39页 |
3.2 AZT 作用下 P1-SPF 株的连续传代 | 第39页 |
3.3 AZT 毒 env 基因的扩增,克隆测序,序列分析 | 第39-41页 |
3.4 P1-SPF 株依次感染不同品种禽 CEF | 第41页 |
3.5 体内感染不同宿主品种禽后病毒血症监测 | 第41-42页 |
3.6 不同宿主禽泄殖腔排毒监测—ALV p27 抗原检测 | 第42-47页 |
3.7 不同宿主禽血清中 ALV-J 抗体监测 | 第47-48页 |
3.8 间接免疫荧光检测不同品种宿主禽感染情况 | 第48-49页 |
3.9 不同宿主细胞与宿主禽分离株的 env 基因扩增、克隆测序、序列分析 | 第49-56页 |
3.9.1 宿主禽分离株 RNA 提取及 PCR 扩增 | 第49-50页 |
3.9.2 宿主禽分离株 env 基因序列分析 | 第50-56页 |
3.10 不同品种宿主禽病理学及血液学观察 | 第56-59页 |
3.10.1 病理组织学观察 | 第56-58页 |
3.10.2 血液学观察 | 第58-59页 |
4 讨论 | 第59-63页 |
5 结论 | 第63-65页 |
参考文献 | 第65-73页 |
致谢 | 第73-74页 |
作者简介及攻读硕士学位发表论文 | 第74页 |