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蒺藜皂苷单体B对心肌缺血再灌注损伤的保护作用及机制研究

前言第4-6页
中文摘要第6-10页
Abstract第10-13页
第1章 绪论第21-47页
    1.1 心肌缺血再灌注损伤的研究第22-32页
        1.1.1 心肌细胞损伤的病理生理变化第22-25页
            1.1.1.1 心肌代谢发生改变第22页
            1.1.1.2 心肌缺氧引起的细胞损伤第22-24页
            1.1.1.3 微血管受损和无复流现象第24页
            1.1.1.4 心肌舒缩功能障碍第24页
            1.1.1.5 缺血-再灌注心律失常第24-25页
        1.1.2 心肌缺血再灌注损伤机制第25-32页
            1.1.2.1 氧自由基与心肌缺血再灌注损伤第25-27页
            1.1.2.2 钙超载与心肌缺血再灌注损伤第27-31页
            1.1.2.3 白细胞浸润与心肌缺血再灌注损伤第31页
            1.1.2.4 再灌注的速度和条件第31-32页
    1.2 心肌细胞损伤的分子机制第32-40页
        1.2.1 Fas第33页
        1.2.2 Bcl-2 家族第33-35页
        1.2.3 Caspase 家族第35-36页
        1.2.4 PKC 家族第36-38页
        1.2.5 MAPK 信号第38-40页
    1.3 心肌缺血再灌注损伤的治疗第40-44页
        1.3.1 抗氧化剂的作用第40-41页
        1.3.2 抑制钙超载第41页
        1.3.3 抑制炎症及免疫的药物第41-42页
        1.3.4 增加心肌供血和供氧、改善心肌舒缩功能的药物第42-43页
        1.3.5 心肌预适应第43页
        1.3.6 心肌缺血的基因治疗第43-44页
    1.4 蒺藜皂苷的研究现状及单体的开发第44页
    1.5 本文的主要研究目的内容和意义第44-47页
第2章 蒺藜皂苷对阿霉素损伤心肌细胞的保护作用第47-58页
    2.1.1 实验材料第47-48页
        2.1.1.1 药物与试剂第47-48页
        2.1.1.2 动物第48页
        2.1.1.3 仪器第48页
    2.1.2 实验方法第48-52页
        2.1.2.1 乳鼠心肌细胞的培养第48-49页
        2.1.2.2 实验分组第49页
        2.1.2.3 MTT 检测细胞存活率第49页
        2.1.2.4 培养液中生化指标测定第49页
        2.1.2.5 流式细胞术检测细胞凋亡第49页
        2.1.2.6 Western blotting 检测心肌细胞内Caspase-3 表达第49-51页
        2.1.2.7 相关试剂的配制第51-52页
        2.1.2.8 统计学分析第52页
    2.1.3 实验结果第52-57页
        2.1.3.1 GSTT 对阿霉素损伤心肌细胞形态的影响第52-53页
        2.1.3.2 GSTT 对阿霉素损伤心肌细胞存活率的影响第53-54页
        2.1.3.3 GSTT 对阿霉素损伤心肌细胞培养液中心肌酶的影响第54页
        2.1.3.4 GSTT 对阿霉素损伤心肌细胞培养液中SOD、MDA、NO 的影响第54-55页
        2.1.3.5 GSTT 对阿霉素损伤心肌细胞凋亡率的影响第55-56页
        2.1.3.6 GSTT 对阿霉素损伤心肌细胞Caspase-3 的影响第56-57页
    2.1.4 小结第57-58页
第3章 蒺藜皂苷单体活性筛选第58-61页
    3.1.1 实验材料第59页
        3.1.1.1 药物与试剂第59页
        3.1.1.2 动物第59页
        3.1.1.3 仪器第59页
    3.1.2 实验方法第59-60页
        3.1.2.1 乳鼠心肌细胞的培养第59页
        3.1.2.2 实验分组第59页
        3.1.2.3 细胞存活率测定第59-60页
        3.1.2.4 统计分析第60页
    3.1.3 结果第60-61页
第4章 蒺藜皂苷单体B 对大鼠心肌缺血再灌注损伤保护作用研究第61-90页
    4.1 蒺藜皂苷单体B 对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的保护作用第61-73页
        4.1.1 实验材料第61-62页
            4.1.1.1 药品与试剂第61-62页
            4.1.1.2 动物第62页
            4.1.1.3 主要仪器第62页
        4.1.2 实验方法第62-65页
            4.1.2.1 大鼠离体心脏缺血再灌注损伤模型的建立第62页
            4.1.2.2 实验分组第62-63页
            4.1.2.3 冠脉流出液CK、AST、LDH 含量的检测第63页
            4.1.2.4 心肌组织SOD、MDA 含量的测定第63页
            4.1.2.5 心肌组织TTC 染色观察心肌梗死面积第63页
            4.1.2.6 病理形态学观察第63页
            4.1.2.7 TUNEL 法检测心肌细胞凋亡第63-64页
            4.1.2.8 免疫组织化学检测心肌组织PKCε表达第64-65页
            4.1.2.9 Western blotting 检测Bcl-2、Bax、Caspase-3、PKCε表达第65页
            4.1.2.10 统计学分析第65页
        4.1.3 结果第65-71页
            4.1.3.1 TTSMB 对冠脉流出液中心肌酶的影响第65-66页
            4.1.3.2 TTSMB 对SOD、MDA 含量的影响第66页
            4.1.3.3 TTSMB 对心肌梗死面积的影响第66-67页
            4.1.3.4 TTSMB 对缺血再灌注心肌组织病理形态的影响第67-68页
            4.1.3.5 TTSMB 对心肌细胞凋亡的影响第68-69页
            4.1.3.6 TTSMB 对心肌组织Bax、Bcl-2、Caspase-3 蛋白表达的影响第69-70页
            4.1.3.7 TTSMB 对心肌细胞PKCε表达的影响第70-71页
            4.1.3.8 TTSMB 对心肌组织磷酸化PKCε表达的影响第71页
        4.1.4 小结第71-73页
    4.2 蒺藜皂苷单体B 对心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用第73-80页
        4.2.1 实验材料第73页
            4.2.1.1 药品与试剂第73页
            4.2.1.2 动物第73页
            4.2.1.3 主要仪器第73页
        4.2.2 实验方法第73-75页
            4.2.2.1 乳鼠心肌细胞培养第73页
            4.2.2.2 实验分组第73-74页
            4.2.2.3 心肌细胞形态学变化第74页
            4.2.2.4 MTT 检测细胞存活率第74页
            4.2.2.5 培养液中生化指标测定第74页
            4.2.2.6 流式细胞术检测细胞凋亡第74页
            4.2.2.7 Western blotting 检测Caspase-3 表达第74页
            4.2.2.8 统计学分析第74-75页
        4.2.3 实验结果第75-79页
            4.2.3.1 TTSMB 对缺氧复氧损伤心肌细胞形态的影响第75页
            4.2.3.2 TTSMB 对缺氧复氧损伤心肌细胞存活率的影响第75-76页
            4.2.3.3 TTSMB 对缺氧复氧损伤心肌细胞培养液中心肌酶的影响第76-77页
            4.2.3.4 TTSMB 对缺氧复氧损伤心肌细胞培养液中SOD、MDA 的影响第77页
            4.2.3.5 TTSMB 对缺氧复氧损伤心肌细胞凋亡率的影响第77-78页
            4.2.3.6 TTSMB 对缺氧复氧损伤心肌细胞Caspase-3 的影响第78-79页
        4.2.4 小结第79-80页
    4.3 TTSMB 抗缺氧复氧损伤的机制研究第80-90页
        4.3.1 材料与方法第80-81页
            4.3.1.1 药物、试剂第80页
            4.3.1.2 动物第80-81页
            4.3.1.3 仪器第81页
        4.3.2 实验方法第81-83页
            4.3.2.1 乳鼠心肌细胞的培养第81页
            4.3.2.2 实验分组第81页
            4.3.2.3 MTT 法检测细胞存活率第81-82页
            4.3.2.4 培养液中生化指标测定第82页
            4.3.2.5 流式细胞术检测细胞凋亡第82页
            4.3.2.6 免疫组织化学检测ERK1/2 转位第82页
            4.3.2.7 激光共聚焦显微镜检测PKCε表达第82-83页
            4.3.2.8 Western blotting 检测细胞内PKCε、ERK1/2 表达第83页
            4.3.2.9 统计学分析第83页
        4.3.3 实验结果第83-88页
            4.3.3.1 TTSMB 对缺氧复氧损伤心肌细胞存活率的影响第83-84页
            4.3.3.2 TTSMB 对缺氧复氧损伤心肌细胞培养液中AST、MDA 的影响第84-85页
            4.3.3.3 TTSMB 对缺氧复氧损伤心肌细胞凋亡率的影响第85-86页
            4.3.3.4 TTSMB 对PKCε表达的影响第86-87页
            4.3.3.5 TTSMB 对ERK1/2 核转位的影响第87-88页
            4.3.3.6 Western blot 检测 PKCε和ERK1/2 表达第88页
        4.3.4 小结第88-90页
第5章 讨论第90-98页
第6章 结论第98-99页
参考文献第99-111页
作者简介及在学期间所取得的科研成果第111-112页
致谢第112页

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