摘要 | 第3-4页 |
ABSTRACT | 第4-5页 |
缩写符号列表 | 第6-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-23页 |
1 钙离子 | 第10-12页 |
2 CBL及其互作蛋白的研究进展 | 第12-19页 |
2.1 CBL蛋白 | 第12-16页 |
2.1.1 CBL蛋白的结构 | 第13-14页 |
2.1.2 CBL蛋白的定位 | 第14-15页 |
2.1.3 CBL互作蛋白对其结构的影响 | 第15-16页 |
2.2 CBL-CIPK网络系统下的Ca~(2+)感知和应答 | 第16-19页 |
2.3 CBL的另一互作蛋白 | 第19页 |
3 植物的耐盐机理 | 第19-23页 |
3.1 脯氨酸合成相关基因 | 第20页 |
3.2 甜菜碱合成相关基因 | 第20-21页 |
3.3 糖醇合成相关基因 | 第21页 |
3.4 保护酶及相关基因 | 第21页 |
3.5 LEA基因 | 第21页 |
3.6 转录因子 | 第21-23页 |
第二章 水稻OsCBL5基因功能初探 | 第23-39页 |
1 材料和方法 | 第23-28页 |
1.1 植物材料 | 第23页 |
1.2 转基因水稻RT-PCR分析 | 第23页 |
1.3 质粒和菌株 | 第23页 |
1.4 植物材料的处理 | 第23-24页 |
1.4.1 对水稻芽期的幼苗进行非生物逆境胁迫处理 | 第23-24页 |
1.4.2 对水稻5叶期植株进行非生物逆境胁迫处理 | 第24页 |
1.5 总RNA的提取和cDNA第一链的合成 | 第24-25页 |
1.6 实时荧光定量PCR分析 | 第25页 |
1.7 酵母双杂交实验 | 第25-27页 |
1.7.1 载体构建 | 第25-26页 |
1.7.2 酵母AH109感受态细胞的制备 | 第26页 |
1.7.3 重组质粒转化酵母 | 第26-27页 |
1.8 OsCBL5蛋白的亚细胞定位研究 | 第27-28页 |
1.8.1 载体构建 | 第27页 |
1.8.2 农杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第27-28页 |
1.8.3 农杆菌浸染接种 | 第28页 |
1.8.4 激光共聚焦显微镜观察亚细胞定位结果 | 第28页 |
2 结果与分析 | 第28-36页 |
2.1 转基因植株表达分析 | 第28-29页 |
2.2 OsCBL5过表达转基因水稻株系在盐胁迫下的表型分析 | 第29-30页 |
2.3 OsCBL6过表达转基因水稻株系在盐胁迫下的表型分析 | 第30-31页 |
2.4 OsCBL5过表达转基因水稻株系在渗透胁迫下的表型分析 | 第31-33页 |
2.5 OsCBL5过表达转基因水稻株系在逆境胁迫下的生理指标分析 | 第33-34页 |
2.6 转基因植株中脯氨酸合成相关基因的表达分析 | 第34-35页 |
2.7 OsCBL4、OsCBL5、OsCBL10与OsCIPK24的酵母双杂交分析 | 第35页 |
2.8 OsCBL5的亚细胞定位 | 第35-36页 |
3 讨论 | 第36-39页 |
第三章 水稻OsCBL3基因的遗传转化 | 第39-44页 |
1 材料与方法 | 第39-40页 |
1.1 植物材料 | 第39页 |
1.2 载体构建 | 第39页 |
1.3 水稻遗传转化 | 第39-40页 |
1.3.1 愈伤组织的诱导及培养 | 第39页 |
1.3.2 农杆菌的培养 | 第39-40页 |
1.3.3 愈伤组织和农杆菌的共培养 | 第40页 |
1.3.4 抗性愈伤的获得 | 第40页 |
1.3.5 抗性植株的再生 | 第40页 |
1.3.6 生根培养 | 第40页 |
1.3.7 转基因水稻RT-PCR分析 | 第40页 |
2 结果与分析 | 第40-42页 |
2.1 OsCBL3过量表达载体的构建和转基因研究 | 第40-41页 |
2.2 转基因植株阳性检测 | 第41-42页 |
2.3 转基因水稻植株的RT-PCR检测 | 第42页 |
3 讨论 | 第42-44页 |
参考文献 | 第44-51页 |
附录 | 第51-52页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第52-53页 |
致谢 | 第53-54页 |