| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 引言 | 第17-32页 |
| 1.1 植物诱导免疫研究背景 | 第17-21页 |
| 1.1.1 PTI | 第17-19页 |
| 1.1.2 ETS | 第19-20页 |
| 1.1.3 ETI | 第20-21页 |
| 1.2 激发子研究背景 | 第21-30页 |
| 1.2.1 激发子的分类 | 第21-24页 |
| 1.2.2 激发子的生物学功能 | 第24-26页 |
| 1.2.3 激发子的信号传导和调控网络 | 第26-30页 |
| 1.3 本研究的目的和意义 | 第30-31页 |
| 1.4 研究技术路线 | 第31-32页 |
| 第二章 MoHrip2表达纯化与结构解析 | 第32-50页 |
| 2.1 材料与方法 | 第32-41页 |
| 2.1.1 原核表达载体构建 | 第32-35页 |
| 2.1.2 mohrip2基因定点突变 | 第35-37页 |
| 2.1.3 MoHrip2和MoHrip2-L78M的诱导表达 | 第37-38页 |
| 2.1.4 蛋白质纯化 | 第38-40页 |
| 2.1.5 蛋白质结晶 | 第40页 |
| 2.1.6 晶体衍射数据收集 | 第40页 |
| 2.1.7 蛋白质结构解析 | 第40页 |
| 2.1.8 MoHrip2氨基酸序列及三维结构同源性比对分析 | 第40-41页 |
| 2.2 结果与分析 | 第41-48页 |
| 2.2.1 原核表达载体成功构建 | 第41-42页 |
| 2.2.2 纯化获得高纯度的目的蛋白 | 第42页 |
| 2.2.3 晶体生长的最优条件 | 第42-44页 |
| 2.2.4 衍射数据收集及处理 | 第44页 |
| 2.2.5 MoHrip2结构解析 | 第44-46页 |
| 2.2.6 MoHrip2同源性分析 | 第46-48页 |
| 2.3 小结与讨论 | 第48-50页 |
| 第三章 MoHrip2作为激发子的功能域分析 | 第50-62页 |
| 3.1 材料与方法 | 第50-55页 |
| 3.1.1 MoHrip2截短突变体设计 | 第50页 |
| 3.1.2 截短突变体原核表达载体的构建 | 第50-52页 |
| 3.1.3 截短突变蛋白的表达与纯化 | 第52-53页 |
| 3.1.4 截短突变体诱导HR实验 | 第53页 |
| 3.1.5 截短突变体诱导烟草抗病性实验 | 第53-54页 |
| 3.1.6 截短突变体诱导烟草基因表达检测 | 第54-55页 |
| 3.2 结果与分析 | 第55-60页 |
| 3.2.1 MoHrip2截短突变体 | 第55-57页 |
| 3.2.2 截短突变体蛋白获得 | 第57-58页 |
| 3.2.3 截短突变体诱导HR能力不同 | 第58-60页 |
| 3.2.4 截短突变体诱导抗病性能力不同 | 第60页 |
| 3.3 小结与讨论 | 第60-62页 |
| 第四章 MoHrip2在拟南芥中互作蛋白的筛选与验证 | 第62-83页 |
| 4.1 材料与方法 | 第62-73页 |
| 4.1.1 诱饵蛋白载体的构建 | 第62-63页 |
| 4.1.2 诱饵蛋白载体转化酵母 | 第63-65页 |
| 4.1.3 诱饵蛋白在酵母中的表达、毒性及自激活检测 | 第65-67页 |
| 4.1.4 拟南芥cDNA文库的筛选 | 第67-69页 |
| 4.1.5 酵母双杂交阳性克隆的验证 | 第69页 |
| 4.1.6 MoHrip2与候选互作蛋白的BiFC验证 | 第69-71页 |
| 4.1.7 MoHrip2与候选互作蛋白的pull-down验证 | 第71-73页 |
| 4.2 结果与分析 | 第73-81页 |
| 4.2.1 MoHrip2在酵母体内融合表达 | 第73页 |
| 4.2.2 MoHrip2对酵母的毒性作用和自激活活性 | 第73-74页 |
| 4.2.3 MoHrip2在拟南芥中候选互作蛋白的筛选 | 第74-77页 |
| 4.2.4 MoHrip2与候选互作蛋白在活细胞中互作 | 第77-78页 |
| 4.2.5 互作蛋白Mo2BP1密码子适应大肠杆菌表达系统优化 | 第78-79页 |
| 4.2.6 互作蛋白Mo2BP1原核表达与纯化 | 第79-80页 |
| 4.2.7 MoHrip2与互作蛋白在体外互作 | 第80-81页 |
| 4.3 小结与讨论 | 第81-83页 |
| 第五章 MoHrip2互作蛋白Mo2BP1的生物学功能初探 | 第83-93页 |
| 5.1 材料与方法 | 第83-87页 |
| 5.1.1 Mo2BP1生物信息学分析 | 第83页 |
| 5.1.2 Mo2BP1在烟草细胞中的定位 | 第83-85页 |
| 5.1.3 拟南芥突变体的获得 | 第85页 |
| 5.1.4 拟南芥的培养 | 第85页 |
| 5.1.5 拟南芥突变体纯合体鉴定与获得 | 第85-87页 |
| 5.1.6 MoHrip2诱导拟南芥突变体HR反应 | 第87页 |
| 5.1.7 MoHrip2诱导拟南芥突变体抗病性分析 | 第87页 |
| 5.2 结果与分析 | 第87-91页 |
| 5.2.1 互作蛋白Mo2BP1生物信息学分析 | 第87-89页 |
| 5.2.2 Mo2BP1定位于烟草细胞质膜上 | 第89页 |
| 5.2.3 Mo2BP1突变体拟南芥纯合体获得 | 第89-90页 |
| 5.2.4 Mo2BP1在MoHrip2诱导拟南芥HR中发挥功能 | 第90-91页 |
| 5.2.5 Mo2BP1在MoHrip2诱导拟南芥抗病性中发挥功能 | 第91页 |
| 5.3 小结与讨论 | 第91-93页 |
| 第六章 MoHrip2在拟南芥中过表达及生物学功能初探 | 第93-103页 |
| 6.1 材料与方法 | 第93-98页 |
| 6.1.1 植物转化载体构建 | 第93-94页 |
| 6.1.2 MoHrip2在烟草细胞中的定位 | 第94页 |
| 6.1.3 拟南芥转化 | 第94-95页 |
| 6.1.4 转基因植株的筛选与鉴定 | 第95-96页 |
| 6.1.5 转基因植株的分子生物学水平检测 | 第96-98页 |
| 6.1.6 转基因植株的抗病分析 | 第98页 |
| 6.2 结果与分析 | 第98-101页 |
| 6.2.1 确定MoHrip2在烟草细胞中的定位 | 第98-99页 |
| 6.2.2 MoHrip2在拟南芥中过表达 | 第99-100页 |
| 6.2.3 转基因植株抗病性增强 | 第100-101页 |
| 6.3 小结与讨论 | 第101-103页 |
| 第七章 全文结论 | 第103-104页 |
| 参考文献 | 第104-116页 |
| 致谢 | 第116-117页 |
| 作者简历 | 第117页 |
