| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-26页 |
| ·羊奶及西农萨能奶羊的特点与价值 | 第12页 |
| ·乳腺的结构与功能 | 第12-13页 |
| ·乳腺上皮细胞的培养 | 第13-15页 |
| ·乳腺上皮细胞的培养历史 | 第13页 |
| ·影响乳腺上皮细胞体外培养的环境因素 | 第13-14页 |
| ·细胞黏附分子 | 第14-15页 |
| ·乳腺上皮细胞脂肪酸代谢 | 第15-17页 |
| ·乳脂的成分、脂肪酸来源及脂肪酸对细胞代谢及功能的调控作用 | 第15页 |
| ·乳腺上皮细胞内脂肪酸代谢的分子机制 | 第15-17页 |
| ·FABPs 研究进展 | 第17-20页 |
| ·H-FABP 研究进展 | 第20-22页 |
| ·H-FABP 的结构 | 第20页 |
| ·H-FABP 的组织表达 | 第20页 |
| ·H-FABP 与细胞脂肪酸的摄取 | 第20-21页 |
| ·H-FABP 与乳腺上皮细胞内脂肪酸运输 | 第21页 |
| ·H-FABP 与乳腺上皮细胞分化及乳腺癌 | 第21页 |
| ·H-FABP 在心脏病中的价值 | 第21页 |
| ·H-FABP 的同源性及多态性 | 第21-22页 |
| ·H-FABP 基因的5’调控区与3’PolyA 的功能 | 第22页 |
| ·cDNA 3’末端快速扩增技术（3’RACE） | 第22-23页 |
| ·脂质体转染的原理及影响因素 | 第23-24页 |
| ·电穿孔(electropotation) 转染原理及影响因素 | 第24-25页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第25-26页 |
| 第二章 奶山羊乳腺上皮细胞的分离、培养、鉴定及最佳转染方法筛选 | 第26-38页 |
| ·材料 | 第26-27页 |
| ·乳腺组织 | 第26页 |
| ·主要试剂 | 第26页 |
| ·主要仪器 | 第26-27页 |
| ·方法 | 第27-31页 |
| ·奶山羊乳腺上皮细胞的分离、培养 | 第27-28页 |
| ·奶山羊乳腺上皮细胞的鉴定 | 第28-29页 |
| ·pEGFP-N1 转染奶山羊乳腺上皮细胞的最佳方法筛选 | 第29-31页 |
| ·结果与分析 | 第31-36页 |
| ·乳腺上皮细胞的原代培养和纯化 | 第31-32页 |
| ·细胞生长曲线 | 第32页 |
| ·染色体核型分析 | 第32页 |
| ·免疫荧光染色 | 第32-33页 |
| ·酪蛋白检测 | 第33页 |
| ·油红染色 | 第33-34页 |
| ·二次转染和一次转染效果的比较 | 第34-35页 |
| ·电穿孔法转染pEGFP-N1 最佳条件的确定 | 第35-36页 |
| ·讨论 | 第36-37页 |
| ·乳腺上皮细胞的高密度培养 | 第36页 |
| ·乳球体的形成机制 | 第36页 |
| ·乳腺上皮细胞的抗原标记 | 第36-37页 |
| ·小结 | 第37-38页 |
| 第三章H-FABP 基因CDs 区及3’UTR 的克隆与生物信息学分析 | 第38-51页 |
| ·材料与方法 | 第38-44页 |
| ·材料 | 第38-39页 |
| ·方法 | 第39-44页 |
| ·结果 | 第44-49页 |
| ·山羊乳腺上皮细胞总RNA 的提取 | 第44页 |
| ·山羊心型脂肪酸结合蛋白（H-FABP）CDs 区的克隆 | 第44页 |
| ·山羊心型脂肪酸结合蛋白（H-FABP）3’UTR 的克隆 | 第44-45页 |
| ·奶山羊H-FABP 基因开放读码框（ORF）的确定 | 第45-46页 |
| ·奶山羊H-FABP 基因CDs 区同源性分析 | 第46-47页 |
| ·奶山羊H-FABP 基因3’UTR 同源性分析 | 第47页 |
| ·山羊H-FABP 的跨膜结构及疏水性分析 | 第47-48页 |
| ·山羊H-FABP 蛋白的三级结构分析 | 第48-49页 |
| ·讨论 | 第49页 |
| ·关于H-FABP 基因3’UTR、CDs 区的克隆及同源性分析 | 第49页 |
| ·关于H-FABP 跨膜结构、三级结构的分析 | 第49页 |
| ·小结 | 第49-51页 |
| 第四章 H-FABP 基因在奶山羊乳腺上皮细胞中的过表达 | 第51-62页 |
| ·材料与方法 | 第51-56页 |
| ·材料 | 第51-52页 |
| ·方法 | 第52-56页 |
| ·结果与分析 | 第56-59页 |
| ·pEGFP-N1 质粒提取与双酶切鉴定 | 第56页 |
| ·pEGFP-N1-HFABP 和pEGFP-N1 质粒提取与双酶切鉴定 | 第56页 |
| ·转染用质粒提取、浓缩结果 | 第56-57页 |
| ·pEGFP-N1-HFABP 和pEGFP-N1 转染乳腺上皮细胞后的荧光观察 | 第57页 |
| ·转染后乳腺上皮细胞总RNA 提取结果 | 第57页 |
| ·实时定量引物普通PCR 扩增电泳 | 第57-58页 |
| ·H-FABP 基因过表达后对相关其他脂肪酸代谢基因的影响 | 第58-59页 |
| ·讨论 | 第59-60页 |
| ·H-FABP 基因过表达对脂肪酸代谢其他相关基因的影响 | 第59-60页 |
| ·关于电转染 | 第60页 |
| 小结 | 第60-62页 |
| 结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 作者简介 | 第70页 |
