| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-20页 |
| ·多不饱和脂肪酸和脂肪酸脱氢酶 | 第12-15页 |
| ·多不饱和脂肪酸 | 第12-14页 |
| ·多不饱和脂肪酸脱氢酶基因的研究 | 第14-15页 |
| ·逆转录病毒和慢病毒载体 | 第15-17页 |
| ·逆转录病毒的分类及特征 | 第15-16页 |
| ·慢病毒载体的应用与发展 | 第16-17页 |
| ·转基因动物的研究 | 第17-19页 |
| ·转基因动物的研究进展 | 第17页 |
| ·转基因牛的研究进展 | 第17-18页 |
| ·转基因动物产品和食品的安全性评价及其展望 | 第18-19页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第19-20页 |
| 第二章 线虫 sfat-1 的化学合成和慢病毒载体的构建 | 第20-29页 |
| ·材料与方法 | 第20-24页 |
| ·菌株与质粒 | 第20页 |
| ·主要试剂与药品 | 第20页 |
| ·主要仪器与设备 | 第20页 |
| ·线虫sfat-1 的化学合成和PCR 拼接 | 第20-23页 |
| ·慢病毒载体的构建和连接 | 第23-24页 |
| ·结果 | 第24-28页 |
| ·sfat-1 基因化学合成和的PCR 拼接 | 第24-25页 |
| ·合成sfat-1 基因克隆及验证 | 第25页 |
| ·慢病毒载体的构建 | 第25-27页 |
| ·慢病毒颗粒的生产 | 第27-28页 |
| ·讨论 | 第28-29页 |
| ·化学合成法PCR 拼接合成sfat-1 | 第28页 |
| ·慢病毒的包装与扩增 | 第28-29页 |
| 第三章 中国西门塔尔牛胎儿成纤维细胞的体外培养 | 第29-34页 |
| ·材料与方法 | 第29-30页 |
| ·实验动物 | 第29页 |
| ·主要试剂、药品和溶液的配置 | 第29页 |
| ·主要实验仪器和设备 | 第29页 |
| ·中国西门塔尔牛胎儿成纤维细胞原代培养及传代培养 | 第29-30页 |
| ·结果 | 第30-32页 |
| ·牛胎儿成纤维细胞原代培养 | 第30-31页 |
| ·牛胎儿成纤维细胞传代培养 | 第31-32页 |
| ·讨论 | 第32-34页 |
| ·牛胎儿成纤维细胞的原代培养 | 第32页 |
| ·牛胎儿成纤维细胞的传代培养及纯化培养 | 第32-33页 |
| ·牛胎儿成纤维细胞的冷冻和复苏 | 第33-34页 |
| 第四章 sfat-1 基因在牛胎儿成纤维细胞中的表达 | 第34-43页 |
| ·材料和方法 | 第34-36页 |
| ·主要试剂药品 | 第34页 |
| ·主要实验仪器和设备 | 第34页 |
| ·慢病毒MOI（Multiplication Of Infection）的确定 | 第34页 |
| ·慢病毒介导sfat-1 基因转化效率的检测 | 第34-35页 |
| ·细胞总RNA 提取和 RT-PCR 的鉴定 | 第35页 |
| ·免疫印迹分析 | 第35页 |
| ·牛胎儿成纤维细胞脂肪酸的提取与GC/MS 分析 | 第35-36页 |
| ·结果 | 第36-40页 |
| ·慢病毒最佳MOI 测定 | 第36-37页 |
| ·绿色荧光蛋白的观察 | 第37页 |
| ·细胞总RNA 提取和RT-PCR 鉴定 | 第37-38页 |
| ·Western Blotting 免疫印迹杂交分析 | 第38-39页 |
| ·牛胎儿成纤维细胞脂肪酸的提取及GC/MS 分析 | 第39-40页 |
| ·讨论 | 第40-43页 |
| ·慢病毒转染细胞后GFP 表达异常 | 第41页 |
| ·慢病毒最适MOI 测定的意义 | 第41页 |
| ·脂肪酸成分分析 | 第41-43页 |
| 结论 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-49页 |
| 附录 | 第49-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 作者简介 | 第57页 |
