摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-13页 |
文献综述 | 第13-28页 |
第一章 miRNA的研究进展 | 第13-23页 |
·miRNA的发现及命名 | 第13-14页 |
·miRNA的发现 | 第13页 |
·miRNA的命名及Rfam数据库 | 第13-14页 |
·miRNA的生物合成和沉默机制 | 第14-15页 |
·miRNA的生物学特征 | 第15-17页 |
·miRNA的生物学功能 | 第17-23页 |
·发育时序 | 第17页 |
·胚胎发生 | 第17-18页 |
·细胞分化和器官发生 | 第18-19页 |
·生长调控和程序性细胞死亡 | 第19-20页 |
·干细胞和生殖细胞 | 第20-21页 |
·人类疾病 | 第21页 |
·进化 | 第21-23页 |
第二章 脂肪细胞分化调控因子的研究进展 | 第23-28页 |
·PPAR家族 | 第24页 |
·C/EBP家族 | 第24-25页 |
·SREBP家族 | 第25-26页 |
·其他脂肪细胞分化相关的基因 | 第26页 |
·miRNA和脂肪细胞分化 | 第26-28页 |
试验研究 | 第28-59页 |
第三章 猪miR-196a的组织表达谱 | 第28-35页 |
·材料与方法 | 第28-31页 |
·实验动物 | 第28页 |
·主要试剂及配方 | 第28-30页 |
·主要仪器 | 第30页 |
·组织和细胞总RNA的提取(TRIzol法) | 第30-31页 |
·总RNA的反转录 | 第31页 |
·real-time PCR | 第31页 |
·结果 | 第31-33页 |
·3日龄仔猪各组织中miR-196a表达水平的检测 | 第31-32页 |
·6月龄猪各组织中miR-196a表达水平的检测 | 第32-33页 |
·讨论 | 第33-34页 |
·小结 | 第34-35页 |
第四章 miR-196a调节猪前体脂肪细胞增殖和分化 | 第35-53页 |
·材料 | 第35-39页 |
·实验动物和细胞 | 第35页 |
·主要仪器 | 第35-36页 |
·主要试剂和配方 | 第36-39页 |
·方法 | 第39-44页 |
·猪原代前体脂肪细胞的制备 | 第39-40页 |
·小鼠3T3-L1细胞系的培养的诱导分化 | 第40页 |
·miR-196a表达载体的构建、鉴定和转染 | 第40-42页 |
·总RNA提取(TRIzol法) | 第42-43页 |
·反转录 | 第43页 |
·real-time PCR | 第43页 |
·MTT检测 | 第43-44页 |
·Oil Red O染色 | 第44页 |
·引物设计 | 第44页 |
·结果 | 第44-51页 |
·miR-196a表达载体的构建和鉴定 | 第44-46页 |
·猪原代脂肪细胞的培养和形态学观察 | 第46-47页 |
·miR-196a在脂肪细胞分化过程中的表达情况 | 第47-48页 |
·MTT检测猪前体脂肪细胞增殖的情况 | 第48-49页 |
·real-time PCR检测脂肪细胞分化关键基因的表达情况 | 第49-50页 |
·Oil Red O检测猪前体脂肪细胞中脂滴的累积情况 | 第50-51页 |
·讨论 | 第51-52页 |
·小结 | 第52-53页 |
第五章 miR-196a靶基因的生物信息学分析 | 第53-59页 |
·材料 | 第54页 |
·miRNA靶基因预测软件 | 第54页 |
·方法 | 第54-55页 |
·miRNA靶基因预测软件的参数设置 | 第54-55页 |
·猪miR-196a序列和候选靶基因的序列 | 第55页 |
·结果 | 第55-56页 |
·讨论 | 第56-57页 |
·小结 | 第57-59页 |
结论 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-72页 |
创新点 | 第72-73页 |
进一步研究的内容 | 第73-74页 |
致谢 | 第74-75页 |
作者简介 | 第75页 |