| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 前言 | 第7-10页 |
| 第一部分 携带Adipsin基因的重组腺病毒构建及鉴定 | 第10-29页 |
| 一、实验材料与方法 | 第10-23页 |
| (一) 实验材料 | 第10-13页 |
| 1、动物及细胞来源 | 第10页 |
| 2、主要试剂及耗材 | 第10-12页 |
| 3、主要仪器 | 第12-13页 |
| (二) 试验方法 | 第13-23页 |
| 1、目的基因adipsin克隆引物合成 | 第13页 |
| 2、目的基因Adipsin的PCR扩增 | 第13-14页 |
| 3、穿梭质粒pShuttle-CMV-adipsin的构建 | 第14-15页 |
| 4、pAdEasy-CMV-adipsin腺病毒载体的构建 | 第15-18页 |
| 5、重组腺病毒质粒pAdEasy-CMV-adipsin筛选 | 第18-19页 |
| 6、重组腺病毒Ad-adipsin包装 | 第19-20页 |
| 7、重组腺病毒Ad-adipsin扩增与形态观察 | 第20页 |
| 8、重组腺病毒Ad-adipsin滴度测定 | 第20-22页 |
| 9、RT-PCR检测基因adipsin在重组重组腺病毒中的转录情况 | 第22页 |
| 10、免疫印迹(Western Blot)检测重组腺病毒中adipsin蛋白表达 | 第22-23页 |
| 二、实验结果与分析 | 第23-27页 |
| 1、PCR获取Adipsin目的基因 | 第23-24页 |
| 2、Ad-adipsin构建相关质粒酶切鉴定 | 第24-25页 |
| 3、Ad-adipsin病毒形态观察和滴度测定 | 第25-26页 |
| 4、Ad-adipsin重组腺病毒中adipsin基因鉴定和Westernblot鉴定 | 第26-27页 |
| 三、讨论 | 第27-29页 |
| 第二部分 2型糖尿病大鼠模型建立与重组腺病毒Ad-adipsin对其治疗作用的评价 | 第29-44页 |
| 一、实验材料及方法 | 第29-32页 |
| (一) 实验材料 | 第29-30页 |
| 1、实验动物 | 第29-30页 |
| 2、主要试剂及耗材 | 第30页 |
| 3、主要仪器 | 第30页 |
| (二) 实验方法 | 第30-32页 |
| 1、高脂高糖结合STZ诱导2型糖尿病SD大鼠模型建立 | 第30-31页 |
| 2、重组腺病毒Ad-adipsin对2型糖尿病大鼠模型ZDF大鼠治疗作用及评价 | 第31-32页 |
| 3、重组腺病毒Ad-adipsin对高脂高糖诱导联合STZ 2型糖尿病大鼠治疗作用及评价 | 第32页 |
| 4、统计学方法 | 第32页 |
| 二、实验结果与分析 | 第32-42页 |
| 1、高脂高糖喂养联合STZ建立2型糖尿病大鼠模型评价 | 第32-36页 |
| 2、重组腺病毒Ad-adipsin治疗ZDF大鼠及评价结果 | 第36-39页 |
| 3、重组腺病毒Ad-adipsin治疗高脂高糖联合STZ诱导2型糖尿病大鼠及评价结果 | 第39-42页 |
| 三、讨论 | 第42-44页 |
| 小结 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-49页 |
| 附录 | 第49-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 研究生简历 | 第57-59页 |
