摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
第一章 绪论 | 第10-14页 |
第二章 试剂、材料和仪器 | 第14-20页 |
2.1 主要试剂及材料 | 第14-15页 |
2.2 细胞株与菌株 | 第15页 |
2.3 质粒、小干扰RNA与引物 | 第15-16页 |
2.4 试剂及主要溶液的配制 | 第16-18页 |
2.4.1 细胞及细菌培养溶液配制 | 第16页 |
2.4.2 HPLC所用试剂的配制 | 第16-17页 |
2.4.3 蛋白印迹实验所用试剂的配制 | 第17-18页 |
2.5 主要仪器 | 第18-20页 |
第三章 实验方法 | 第20-30页 |
3.1 细胞株的培养 | 第20页 |
3.2 质粒DNA的转化及提取 | 第20页 |
3.3 细胞转染实验 | 第20-21页 |
3.4 单克隆筛选 | 第21页 |
3.5 细胞迁移实验 | 第21-22页 |
3.6 细胞侵袭实验 | 第22页 |
3.7 伤口愈合实验 | 第22-23页 |
3.8 细胞生长曲线的测定 | 第23页 |
3.9 细胞克隆形成分析 | 第23-24页 |
3.10 HPLC法检测细胞内多胺含量 | 第24-26页 |
3.11 蛋白提取及浓度测定 | 第26页 |
3.12 蛋白印迹法检测细胞内蛋白水平方法 | 第26-27页 |
3.13 统计学分析 | 第27-30页 |
第四章 实验结果 | 第30-42页 |
4.1 SSAT高表达和低表达细胞株的构建 | 第30-32页 |
4.2 SSAT对结直肠癌细胞增殖能力的影响 | 第32-33页 |
4.3 SSAT对结直肠癌细胞的迁移的影响 | 第33-35页 |
4.4 SSAT对结直肠癌细胞侵袭的影响 | 第35-36页 |
4.5 SSAT对AKT/GSK-3β通路的影响 | 第36-37页 |
4.6 SSAT通过改变多胺含量来调节AKT/GSK-3β活性 | 第37-38页 |
4.7 SSAT对WNT信号通路的影响 | 第38-39页 |
4.8 GSK-3β抑制剂逆转SSAT引起的细胞侵袭抑制作用 | 第39-42页 |
结论 | 第42-44页 |
讨论 | 第44-50页 |
参考文献 | 第50-54页 |
附录 | 第54-56页 |
致谢 | 第56-57页 |