| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 附录：英文缩略表 | 第8-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-18页 |
| 1.1 引言 | 第12-13页 |
| 1.2 Wnt /β-catenin通路概述 | 第13-15页 |
| 1.3 DKK概述 | 第15页 |
| 1.4 DKK1的作用机制 | 第15-16页 |
| 1.5 DKK1与肿瘤 | 第16-18页 |
| 第二章 材料和试剂、仪器 | 第18-28页 |
| 2.1 菌株 | 第18页 |
| 2.2 质粒 | 第18页 |
| 2.3 引物 | 第18-19页 |
| 2.4 细胞株 | 第19页 |
| 2.5 样本收集 | 第19页 |
| 2.6 主要试剂及材料 | 第19-21页 |
| 2.6.1 细菌培养试剂 | 第19页 |
| 2.6.2 细胞培养试剂 | 第19-20页 |
| 2.6.3 RT-PCR主要试剂 | 第20页 |
| 2.6.4 免疫印迹实验主要试剂 | 第20-21页 |
| 2.6.5 免疫组化主要试剂 | 第21页 |
| 2.6.6 其他主要试剂及材料 | 第21页 |
| 2.7 试剂及主要溶液的配制 | 第21-25页 |
| 2.7.1 细菌培养试剂 | 第21-22页 |
| 2.7.2 细胞培养试剂 | 第22页 |
| 2.7.3 琼脂糖凝胶电泳试剂 | 第22-23页 |
| 2.7.4 免疫印迹所用试剂的配制 | 第23-25页 |
| 2.7.5 免疫组化所用试剂的配制 | 第25页 |
| 2.8 主要仪器 | 第25-28页 |
| 第三章 实验方法 | 第28-42页 |
| 3.1 载体的构建 | 第28页 |
| 3.2 制备感受态大肠杆菌 | 第28页 |
| 3.3 质粒DNA的转化和提取 | 第28-29页 |
| 3.4 乳腺癌细胞株的培养 | 第29-30页 |
| 3.4.1 细胞复苏 | 第29页 |
| 3.4.2 细胞珠传代培养 | 第29-30页 |
| 3.4.3 细胞冻存 | 第30页 |
| 3.5 转染乳腺癌细胞 | 第30-31页 |
| 3.6 MTT比色法测乳腺癌细胞生长曲线 | 第31页 |
| 3.7 划痕实验 | 第31-32页 |
| 3.8 乳腺癌细胞Transwell实验 | 第32页 |
| 3.9 乳腺癌细胞侵袭实验 | 第32-33页 |
| 3.10 RT-PCR | 第33-35页 |
| 3.11 蛋白提取及浓度测定 | 第35-37页 |
| 3.12 免疫印迹实验 | 第37-38页 |
| 3.13 免疫组化实验 | 第38-40页 |
| 3.14 统计学分析 | 第40-42页 |
| 第四章 实验结果 | 第42-60页 |
| 4.1 DKK1在乳腺癌组织中的表达情况 | 第42-43页 |
| 4.2 DKK1在乳腺癌细胞中的表达情况 | 第43-44页 |
| 4.3 DKK1调控乳腺癌细胞的增殖 | 第44-47页 |
| 4.4 DKK1调控乳腺癌细胞的迁移 | 第47-51页 |
| 4.4.1 划痕实验 | 第47-49页 |
| 4.4.2 Transwell实验 | 第49-51页 |
| 4.5 DKK1调控乳腺癌细胞的侵袭 | 第51-53页 |
| 4.6 体外和体内DKK1对Wnt信号通路相关蛋白表达的影响 | 第53-60页 |
| 4.6.1 Western blot检测体外DKK1对Wnt信号通路相关蛋白表达的影响 | 第53-57页 |
| 4.6.2 DKK1在乳腺癌癌旁组织中和癌组织中的表达情况 | 第57页 |
| 4.6.3 免疫组化检测体内DKK1对Wnt信号通路相关蛋白表达的影响 | 第57-60页 |
| 讨论 | 第60-64页 |
| 结论 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
