中文摘要 | 第3-4页 |
英文摘要 | 第4-5页 |
1 绪论 | 第8-16页 |
1.1 引言 | 第8-9页 |
1.2 研究背景及进展 | 第9-13页 |
1.2.1 昆虫病原真菌侵染过程及致病机制 | 第9页 |
1.2.2 丝状真菌产孢方式的研究进展 | 第9-12页 |
1.2.3 同源异型盒(homeobox)基因研究进展 | 第12-13页 |
1.3 研究目的与研究意义 | 第13-14页 |
1.3.1 研究目的 | 第13页 |
1.3.2 研究意义 | 第13-14页 |
1.4 研究内容和技术路线 | 第14-15页 |
1.4.1 研究内容 | 第14-15页 |
1.4.2 技术路线 | 第15页 |
1.5 课题创新之处 | 第15-16页 |
2 蝗绿僵菌MaH1的功能研究 | 第16-64页 |
2.1 主要实验材料 | 第16-21页 |
2.1.1 供试菌株及实验昆虫 | 第16页 |
2.1.2 质粒载体 | 第16页 |
2.1.3 主要培养基 | 第16-17页 |
2.1.4 主要试剂 | 第17-18页 |
2.1.5 主要设备 | 第18-19页 |
2.1.6 主要实验配制溶液 | 第19-21页 |
2.2 主要方法 | 第21-38页 |
2.2.1 MaH1生物信息学分析 | 第21页 |
2.2.2 MaH1敲除和回复载体的构建 | 第21-24页 |
2.2.3 MaH1的cDNA全长克隆 | 第24-26页 |
2.2.4 转化大肠杆菌 | 第26页 |
2.2.5 农杆菌感受态的制备、转化 | 第26-27页 |
2.2.6 农杆菌介导的蝗绿僵菌的转化 | 第27-28页 |
2.2.7 微量真菌基因组进行初步验证转化子 | 第28页 |
2.2.8 大量真菌基因组提取 | 第28-29页 |
2.2.9 Southern杂交实验再次验证MaH1敲除和回复转化子 | 第29-31页 |
2.2.10 真菌RNA提取 | 第31页 |
2.2.11 Quantitative Real-time PCR(qRT- PCR)实验 | 第31-34页 |
2.2.12 菌落大小及菌落边缘测定 | 第34页 |
2.2.13 生长能力测定 | 第34页 |
2.2.14 抗逆分析 | 第34-35页 |
2.2.15 菌丝隔荧光染色观察 | 第35页 |
2.2.16 毒力测定 | 第35页 |
2.2.17 数据统计及显著性分析 | 第35页 |
2.2.18 差异表达基因分析 | 第35-38页 |
2.3 实验结果与分析 | 第38-60页 |
2.3.1 MaH1在蝗绿僵菌中是一个同源盒基因 | 第38-41页 |
2.3.2 MaH1敲除和回复载体的构建 | 第41-42页 |
2.3.3 MaH1对蝗绿僵菌生长的影响 | 第42-45页 |
2.3.4 MaH1不影响蝗绿僵菌逆境耐受性 | 第45-46页 |
2.3.5 MaH1不影响蝗绿僵菌的毒力 | 第46-47页 |
2.3.6 MaH1参与调控蝗绿僵菌产孢方式转换及孢子形态 | 第47-52页 |
2.3.7 MaH1调控蝗绿僵菌产孢模式转换的机制分析 | 第52-60页 |
2.4 讨论 | 第60-64页 |
3 本研究的主要结论与后续工作建议 | 第64-66页 |
3.1 本研究的主要结论 | 第64页 |
3.2 后续实验安排 | 第64-66页 |
致谢 | 第66-68页 |
参考文献 | 第68-80页 |
附录 | 第80-86页 |
A. 作者在攻读硕士学位期间发表论文的目录 | 第80-81页 |
B. 附表1 RT-PCR检验DGE结果的引物 | 第81-82页 |
C. 附表2 共同差异表达的85个基因的基本信息 | 第82-86页 |
D. 序列 | 第86页 |