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蝗绿僵菌同源异型盒基因MaH1的克隆及功能研究

中文摘要第3-4页
英文摘要第4-5页
1 绪论第8-16页
    1.1 引言第8-9页
    1.2 研究背景及进展第9-13页
        1.2.1 昆虫病原真菌侵染过程及致病机制第9页
        1.2.2 丝状真菌产孢方式的研究进展第9-12页
        1.2.3 同源异型盒(homeobox)基因研究进展第12-13页
    1.3 研究目的与研究意义第13-14页
        1.3.1 研究目的第13页
        1.3.2 研究意义第13-14页
    1.4 研究内容和技术路线第14-15页
        1.4.1 研究内容第14-15页
        1.4.2 技术路线第15页
    1.5 课题创新之处第15-16页
2 蝗绿僵菌MaH1的功能研究第16-64页
    2.1 主要实验材料第16-21页
        2.1.1 供试菌株及实验昆虫第16页
        2.1.2 质粒载体第16页
        2.1.3 主要培养基第16-17页
        2.1.4 主要试剂第17-18页
        2.1.5 主要设备第18-19页
        2.1.6 主要实验配制溶液第19-21页
    2.2 主要方法第21-38页
        2.2.1 MaH1生物信息学分析第21页
        2.2.2 MaH1敲除和回复载体的构建第21-24页
        2.2.3 MaH1的cDNA全长克隆第24-26页
        2.2.4 转化大肠杆菌第26页
        2.2.5 农杆菌感受态的制备、转化第26-27页
        2.2.6 农杆菌介导的蝗绿僵菌的转化第27-28页
        2.2.7 微量真菌基因组进行初步验证转化子第28页
        2.2.8 大量真菌基因组提取第28-29页
        2.2.9 Southern杂交实验再次验证MaH1敲除和回复转化子第29-31页
        2.2.10 真菌RNA提取第31页
        2.2.11 Quantitative Real-time PCR(qRT- PCR)实验第31-34页
        2.2.12 菌落大小及菌落边缘测定第34页
        2.2.13 生长能力测定第34页
        2.2.14 抗逆分析第34-35页
        2.2.15 菌丝隔荧光染色观察第35页
        2.2.16 毒力测定第35页
        2.2.17 数据统计及显著性分析第35页
        2.2.18 差异表达基因分析第35-38页
    2.3 实验结果与分析第38-60页
        2.3.1 MaH1在蝗绿僵菌中是一个同源盒基因第38-41页
        2.3.2 MaH1敲除和回复载体的构建第41-42页
        2.3.3 MaH1对蝗绿僵菌生长的影响第42-45页
        2.3.4 MaH1不影响蝗绿僵菌逆境耐受性第45-46页
        2.3.5 MaH1不影响蝗绿僵菌的毒力第46-47页
        2.3.6 MaH1参与调控蝗绿僵菌产孢方式转换及孢子形态第47-52页
        2.3.7 MaH1调控蝗绿僵菌产孢模式转换的机制分析第52-60页
    2.4 讨论第60-64页
3 本研究的主要结论与后续工作建议第64-66页
    3.1 本研究的主要结论第64页
    3.2 后续实验安排第64-66页
致谢第66-68页
参考文献第68-80页
附录第80-86页
    A. 作者在攻读硕士学位期间发表论文的目录第80-81页
    B. 附表1 RT-PCR检验DGE结果的引物第81-82页
    C. 附表2 共同差异表达的85个基因的基本信息第82-86页
    D. 序列第86页

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