| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 1 绪论 | 第10-16页 |
| 1.1 引言与研究背景 | 第10-13页 |
| 1.1.1 昆虫病原真菌侵染致病机理的研究 | 第10-11页 |
| 1.1.2 昆虫免疫反应机制 | 第11页 |
| 1.1.3 几丁质合酶家族的研究进展 | 第11-12页 |
| 1.1.4 几丁质合成影响毒力机制的研究 | 第12页 |
| 1.1.5 几丁质合成酶家族在蝗绿僵菌中的研究进展（夏玉先课题组） | 第12-13页 |
| 1.2 立题依据 | 第13页 |
| 1.3 研究目的 | 第13-14页 |
| 1.4 本课题研究内容 | 第14页 |
| 1.5 技术路线 | 第14页 |
| 1.6 本项目的特色与创新之处 | 第14-16页 |
| 2 几丁质合成影响蝗绿僵菌毒力机制的研究 | 第16-54页 |
| 2.1 实验材料 | 第16-20页 |
| 2.1.1 实验菌株和昆虫 | 第16页 |
| 2.1.2 质粒载体 | 第16页 |
| 2.1.3 主要实验试剂与试剂盒 | 第16-17页 |
| 2.1.4 主要培养基 | 第17-18页 |
| 2.1.5 实验溶液的配置 | 第18-19页 |
| 2.1.6 实验仪器 | 第19-20页 |
| 2.2 实验方法 | 第20-32页 |
| 2.2.1 MaChs回复载体的构建 | 第20-21页 |
| 2.2.2 根癌农杆菌感受态的电转化 | 第21-22页 |
| 2.2.3 蝗绿僵菌与根癌农杆菌的共培养 | 第22页 |
| 2.2.4 回复阳性转化子的筛选 | 第22-23页 |
| 2.2.5 大量提取真菌基因组 | 第23页 |
| 2.2.6 Southern blot验证MaChs回复菌株 | 第23-26页 |
| 2.2.7 毒力测定实验 | 第26页 |
| 2.2.8 孢子疏水性测定 | 第26页 |
| 2.2.9 孢子在东亚飞蝗后翅上的萌发以及附着胞的形成 | 第26-27页 |
| 2.2.10 虫菌体的体外培养 | 第27页 |
| 2.2.11 虫菌体基因组的提取 | 第27页 |
| 2.2.12 血清PO(酚氧化酶)活性的测定 | 第27-28页 |
| 2.2.13 细胞壁表面成分的凝集素染色 | 第28页 |
| 2.2.14 细胞壁表面成分的荧光抗体染色 | 第28页 |
| 2.2.15 Toll信号通路相关免疫基因在脂肪体中的表达情况 | 第28-29页 |
| 2.2.16 RNA的提取 | 第29页 |
| 2.2.17 RNA中DNA的消化 | 第29页 |
| 2.2.18 RNA的反转 | 第29-30页 |
| 2.2.19 蝗绿僵菌孢子细胞壁完整性与韧性测定 | 第30页 |
| 2.2.20 甘露糖蛋白含量的测定 | 第30-31页 |
| 2.2.21 β-1,3-葡聚糖含量测定 | 第31页 |
| 2.2.22 几丁质含量测定 | 第31-32页 |
| 2.3 实验结果与分析 | 第32-51页 |
| 2.3.1 MaChsⅠ回复载体的构建以及回复转化子的筛选 | 第32-33页 |
| 2.3.2 MaChsⅡ回复载体的构建以及回复转化子的筛选 | 第33-34页 |
| 2.3.3 MaChsⅢ回复载体的构建以及回复转化子的筛选 | 第34-35页 |
| 2.3.4 MaChsⅣ回复载体的构建以及回复转化子的筛选 | 第35-36页 |
| 2.3.5 MaChsⅤ回复载体的构建以及回复转化子的筛选 | 第36页 |
| 2.3.6 MaChsⅥ回复载体的构建以及回复转化子的筛选 | 第36-37页 |
| 2.3.7 MaChsⅦ回复载体的构建以及回复转化子的筛选 | 第37-38页 |
| 2.3.8 MaChs家族各成员对蝗绿僵菌毒力的影响 | 第38-42页 |
| 2.3.9 ΔMaChsⅢ、ΔMaChsⅤ、ΔMaChsⅦ疏水性测定以及在东亚飞蝗后翅上的萌发 | 第42-43页 |
| 2.3.10 ΔMaChsⅢ、ΔMaChsⅤ、ΔMaChsⅦ附着胞的形成 | 第43-44页 |
| 2.3.11 东亚飞蝗免疫基因的表达情况 | 第44-45页 |
| 2.3.12 细胞壁表面结构分析 | 第45-47页 |
| 2.3.13 ΔMaChsV、ΔMaChsVII在东亚飞蝗血液中的生长速率 | 第47-48页 |
| 2.3.14 MaChs家族各成员对蝗绿僵菌细胞壁的影响 | 第48-51页 |
| 2.4 讨论 | 第51-54页 |
| 2.4.1 细胞壁完整性与结构成分 | 第51-52页 |
| 2.4.2 毒力 | 第52-54页 |
| 3 主要实验结论与后续工作建议 | 第54-55页 |
| 3.1 主要实验结论 | 第54页 |
| 3.2 后续工作建议 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-60页 |
| 附录 | 第60页 |
