| 摘要 | 第6-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 英文缩略表 | 第12-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-18页 |
| 1.1 血吸虫病的危害 | 第13页 |
| 1.2 血吸虫病的治疗 | 第13-15页 |
| 1.2.1 化学治疗 | 第13-14页 |
| 1.2.2 血吸虫病疫苗研究 | 第14-15页 |
| 1.3 日本血吸虫免疫逃避与补体系统 | 第15-16页 |
| 1.4 RNA干扰技术在血吸虫功能研究中的应用 | 第16-17页 |
| 1.5 本文的总体研究思路 | 第17-18页 |
| 第二章 日本血吸虫TOR基因真核表达载体的构建及在 293T细胞中的表达 | 第18-27页 |
| 2.1 引言 | 第18页 |
| 2.2 实验材料 | 第18-20页 |
| 2.2.1 生物材料 | 第18页 |
| 2.2.2 主要仪器 | 第18-19页 |
| 2.2.3 工具酶、试剂盒与常规试剂 | 第19页 |
| 2.2.4 主要试剂的配制 | 第19-20页 |
| 2.3 实验方法 | 第20-22页 |
| 2.3.1 利用在线软件预测SjTOR磷酸化和糖基化位点 | 第20页 |
| 2.3.2 真核表达质粒pXJ40-FLAG-TOR的构建与鉴定 | 第20-21页 |
| 2.3.3 免疫荧光试验 | 第21-22页 |
| 2.4 结果 | 第22-26页 |
| 2.4.1 在线软件预测氨基酸磷酸化和糖基化修饰位点 | 第22-23页 |
| 2.4.2 成功构建pXJ40-FLAG-TOR | 第23-24页 |
| 2.4.3 293T细胞转染后的SjTOR基因转录水平 | 第24-25页 |
| 2.4.4 IFA检测 293T细胞的表达 | 第25页 |
| 2.4.5 Western blot检测TOR蛋白在 293T细胞中的表达 | 第25-26页 |
| 2.5 讨论 | 第26-27页 |
| 第三章 日本血吸虫SjTOR DNA疫苗初步研究 | 第27-38页 |
| 3.1 引言 | 第27页 |
| 3.2 实验材料 | 第27-28页 |
| 3.2.1 生物材料 | 第27页 |
| 3.2.2 主要仪器 | 第27页 |
| 3.2.3 工具酶、试剂盒与常规试剂 | 第27页 |
| 3.2.4 主要试剂配制 | 第27-28页 |
| 3.3 实验方法 | 第28-30页 |
| 3.3.1 重组质粒DNA疫苗的制备 | 第28页 |
| 3.3.2 免疫程序 | 第28-29页 |
| 3.3.3 酶联免疫吸附试验(ELISA)检测免疫前后血清中抗体水平 | 第29页 |
| 3.3.4 Luminex多功能液相芯片检测细胞因子 | 第29-30页 |
| 3.3.5 数据统计分析 | 第30页 |
| 3.4 结果 | 第30-36页 |
| 3.4.1 动物免疫保护实验结果 | 第30-31页 |
| 3.4.2 各组小鼠免疫前后血清中抗体IgG、IgG1和IgG2a的动态变化分析193.4.3 Luminex液相芯片技术检测三免血清中细胞因子水平 | 第31-36页 |
| 3.5 讨论 | 第36-38页 |
| 第四章 RNA干扰日本血吸虫SjTOR基因的研究 | 第38-48页 |
| 4.1 引言 | 第38页 |
| 4.2 实验材料 | 第38-39页 |
| 4.2.1 生物材料 | 第38页 |
| 4.2.2 主要仪器 | 第38页 |
| 4.2.3 主要试剂 | 第38-39页 |
| 4.3 实验方法 | 第39-42页 |
| 4.3.1 日本血吸虫虫体的收集 | 第39页 |
| 4.3.2 日本血吸虫虫体cDNA模板制备 | 第39-40页 |
| 4.3.3 日本血吸虫TOR特异siRNA分子的筛选 | 第40-41页 |
| 4.3.4 siRNAs体内干扰试验 | 第41-42页 |
| 4.3.5 数据统计分析 | 第42页 |
| 4.4 实验结果 | 第42-46页 |
| 4.4.1 实时荧光定量PCR分析SjTOR在各时期虫体中的转录水平 | 第42-43页 |
| 4.4.2 体外筛选日本血吸虫TOR特异siRNA分子 | 第43-44页 |
| 4.4.3 siRNAs体内干扰结果 | 第44-45页 |
| 4.4.4 小鼠体内干扰后的减虫和减卵效果 | 第45-46页 |
| 4.5 讨论 | 第46-48页 |
| 第五章 全文结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 作者简历 | 第55-56页 |
