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细粒棘球绦虫粪抗原的筛选及ELISA检测方法的初步建立

摘要第5-6页
abstract第6-7页
英文缩略表第11-12页
第一章 引言第12-17页
    1.1 细粒棘球蚴病的流行史和危害第12-13页
        1.1.1 细粒棘球蚴病的流行史第12页
        1.1.2 细粒棘球蚴病的危害第12-13页
    1.2 蛋白组学的发展及蛋白质组学在细粒棘球绦虫研究领域中的应用第13-14页
        1.2.1 蛋白组学的发展第13页
        1.2.2 蛋白质组学在细粒棘球绦虫研究领域中的应用第13-14页
    1.3 细粒棘球绦虫粪抗原在研究领域中的应用第14-16页
        1.3.1 以成虫为诊断抗原的研究第15页
        1.3.2 以成虫表膜抗原为诊断抗原的研究第15-16页
        1.3.3 以虫体分泌抗原为诊断抗原的研究第16页
        1.3.4 以人工获得重组抗原为诊断抗原的研究第16页
    1.4 结合蛋白质组学展望细粒棘球绦虫粪抗原的应用第16-17页
第二章 细粒棘球绦虫候选诊断抗原的筛选鉴定第17-23页
    2.1 材料与方法第17-18页
        2.1.1 实验动物与实验材料第17页
        2.1.2 主要试剂及仪器设备第17页
        2.1.3 动物感染与粪便处理第17-18页
        2.1.4 蛋白与肽段提取第18页
        2.1.5 基于QE的液质联用分析第18页
        2.1.6 蛋白的生物信息学分析第18页
    2.2 结果第18-21页
        2.2.1 未感染细粒棘球虫的犬粪样品蛋白鉴定结果第18-19页
        2.2.2 感染细粒棘球虫不同时间点犬粪蛋白的鉴定第19页
        2.2.3 犬粪中细粒棘球虫蛋白的功能富集第19-21页
    2.3 讨论第21-23页
第三章 细粒棘球绦虫候选诊断抗原基因的克隆第23-31页
    3.1 材料与方法第23-26页
        3.1.1 细粒棘球绦虫、菌种第23页
        3.1.2 主要仪器与试剂第23页
        3.1.3 引物的设计与合成第23-24页
        3.1.4 细粒棘球绦虫总RNA的提取与反转录第24页
        3.1.5 虫体EMR、GAPDH、TMEM41B蛋白编码基因的PCR扩增第24-25页
        3.1.6 虫体EMR、GAPDH、TMEM41B蛋白编码基因的克隆第25页
        3.1.7 虫体EMR、GAPDH、TMEM41B蛋白(酶)的生物信息学分析第25-26页
    3.2 实验结果第26-30页
        3.2.1 虫体EMR、GAPDH、TMEM41B基因的克隆第26页
        3.2.2 虫体EMR、GAPDH、TMEM41B蛋白(酶)的生物信息学分析第26-30页
    3.3 讨论第30-31页
第四章 细粒棘球绦虫候选诊断抗原基因的原核表达及ELISA方法的建立第31-40页
    4.1 材料与方法第31-33页
        4.1.1 实验动物、菌种及载体第31页
        4.1.2 主要仪器和试剂第31页
        4.1.3 重组蛋白表达载体的构建第31-32页
        4.1.4 EMR、GAPDH、TMEM41B重组蛋白的原核表达及其表达形式的鉴定第32页
        4.1.5 EMR、GAPDH、TMEM41B重组蛋白的纯化第32页
        4.1.6 多克隆抗体的制备第32-33页
        4.1.7 抗体效价的测定第33页
        4.1.8 ELISA方法的初步建立第33页
    4.2 结果第33-38页
        4.2.1 重组表达载体的鉴定第33-34页
        4.2.2 重组蛋白的诱导表达第34-35页
        4.2.3 重组蛋白的纯化第35-36页
        4.2.4 抗体效价检测结果第36-37页
        4.2.5 粪抗原ELISA方法的检测结果第37-38页
    4.3 讨论第38-40页
第五章 全文结论第40-41页
参考文献第41-45页
致谢第45-46页
作者简历第46页

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