| 前言 | 第4-5页 |
| 中文摘要 | 第5-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 英文缩写词表 | 第17-18页 |
| 第一章 绪论 | 第18-68页 |
| 1.1 活性氧 | 第18-22页 |
| 1.1.1 活性氧概述 | 第18页 |
| 1.1.2 ROS 的产生 | 第18-20页 |
| 1.1.3 ROS 对生物大分子的作用 | 第20页 |
| 1.1.4 ROS 与疾病 | 第20-21页 |
| 1.1.5 ROS 的清除 | 第21-22页 |
| 1.2 硒 | 第22-31页 |
| 1.2.1 硒的概述 | 第22-23页 |
| 1.2.2 硒代谢 | 第23-24页 |
| 1.2.3 硒蛋白 | 第24-29页 |
| 1.2.4 Se 与人类健康 | 第29-31页 |
| 1.3 GPx | 第31-44页 |
| 1.3.1 GPx 概述 | 第31页 |
| 1.3.2 GPx 的分类及作用 | 第31-35页 |
| 1.3.3 GPx 的结构 | 第35-38页 |
| 1.3.4 GPx 催化机制 | 第38-40页 |
| 1.3.5 Sec 的插入 | 第40-41页 |
| 1.3.6 GPx 模拟物 | 第41-44页 |
| 1.4 蛋白质结构的研究 | 第44-48页 |
| 1.4.1 蛋白质序列与结构 | 第44-46页 |
| 1.4.2 蛋白质的结构层次 | 第46页 |
| 1.4.3 蛋白质结构与功能 | 第46页 |
| 1.4.4 蛋白质结构预测 | 第46-48页 |
| 1.5 立题依据 | 第48-51页 |
| 参考文献 | 第51-68页 |
| 第二章 重组含硒 hGPx1 突变体的表达与表征 | 第68-94页 |
| 2.1 序言 | 第68-70页 |
| 2.2 实验部分 | 第70-79页 |
| 2.2.1 实验试剂 | 第70-71页 |
| 2.2.2 实验仪器 | 第71页 |
| 2.2.3 菌株与质粒 | 第71-72页 |
| 2.2.4 主要试剂配制 | 第72-73页 |
| 2.2.5 实验方法 | 第73-79页 |
| 2.3 实验结果 | 第79-86页 |
| 2.3.1 hGPx1 基因的调取 | 第79页 |
| 2.3.2 表达质粒的构建 | 第79-80页 |
| 2.3.3 hGPx1Sec的表达及纯化 | 第80-81页 |
| 2.3.4 Seleno-hGPx1Sec和 seleno-hGPx1Ser的表达及纯化 | 第81-83页 |
| 2.3.5 GPx 活力测定 | 第83页 |
| 2.3.6 Seleno-hGPx1Ser硒含量的测定 | 第83页 |
| 2.3.7 Seleno-hGPx1Ser最适温度及 pH 值的测定 | 第83-84页 |
| 2.3.8 Seleno-hGPx1Ser稳态动力学测定 | 第84-86页 |
| 2.4 讨论 | 第86-88页 |
| 2.5 本章小结 | 第88页 |
| 参考文献 | 第88-94页 |
| 第三章 高活力含硒 hGPx1 突变体的制备及其结构与性质的研究 | 第94-112页 |
| 3.1 序言 | 第94-96页 |
| 3.2 实验部分 | 第96-98页 |
| 3.2.1 实验试剂 | 第96页 |
| 3.2.2 实验仪器 | 第96页 |
| 3.2.3 菌株与质粒 | 第96-97页 |
| 3.2.4 实验方法 | 第97-98页 |
| 3.3 实验结果 | 第98-107页 |
| 3.3.1 突变质粒的确认 | 第98-99页 |
| 3.3.2 目的蛋白的 PAGE 及 Western Blot 鉴定 | 第99-101页 |
| 3.3.3 Seleno-hGPx1-C2/78/115/156/202S 硒含量测定 | 第101页 |
| 3.3.4 GPx 活力测定 | 第101页 |
| 3.3.5 Seleno-hGPx1-C2/78/115/156/202S 性质表征 | 第101-103页 |
| 3.3.6 Seleno-hGPx1-C2/78/115/156/202S 稳态动力学测定 | 第103-104页 |
| 3.3.7 结构模拟分析 | 第104-107页 |
| 3.4 讨论 | 第107-109页 |
| 3.5 本章小结 | 第109-110页 |
| 参考文献 | 第110-112页 |
| 第四章 含硒 hGPx2 突变体的制备及其结构与性质的研究 | 第112-128页 |
| 4.1 序言 | 第112-113页 |
| 4.2 实验部分 | 第113-116页 |
| 4.2.1 实验试剂 | 第113页 |
| 4.2.2 实验仪器 | 第113页 |
| 4.2.3 菌株与质粒 | 第113-114页 |
| 4.2.4 实验方法 | 第114-116页 |
| 4.3 实验结果 | 第116-123页 |
| 4.3.1 hGPx2 合成序列分析 | 第116页 |
| 4.3.2 表达质粒的构建 | 第116-117页 |
| 4.3.3 Seleno-hGPx2-C/S 的表达及纯化 | 第117-118页 |
| 4.3.4 Seleno-hGPx2-C/S 硒含量测定 | 第118页 |
| 4.3.5 Seleno-hGPx2-C/S 的活力测定 | 第118-119页 |
| 4.3.6 Seleno-hGPx2-C/S 酶学性质测定 | 第119-120页 |
| 4.3.7 Seleno-hGPx2-C/S 稳态动力学研究 | 第120-121页 |
| 4.3.8 Seleno-hGPx2-C/S 结构分析 | 第121-123页 |
| 4.4 讨论 | 第123-125页 |
| 4.5 本章小结 | 第125页 |
| 参考文献 | 第125-128页 |
| 第五章 基于定点突变研究 seleno-hGSTZ1c-1c 的催化活性 | 第128-144页 |
| 5.1 序言 | 第128-130页 |
| 5.2 实验部分 | 第130-133页 |
| 5.2.1 实验试剂 | 第130页 |
| 5.2.2 实验仪器 | 第130页 |
| 5.2.3 菌株与质粒 | 第130页 |
| 5.2.4 实验方法 | 第130-133页 |
| 5.3 实验结果 | 第133-137页 |
| 5.3.1 hGSTZ1c-1c 突变体的设计与构建 | 第133-135页 |
| 5.3.2 hGSTZ1c-1c 突变体的表达及鉴定 | 第135页 |
| 5.3.3 蛋白的硒含量测定 | 第135-136页 |
| 5.3.4 GPx 活力测定 | 第136页 |
| 5.3.5 GST 活力测定 | 第136-137页 |
| 5.4 讨论 | 第137-140页 |
| 5.5 本章小结 | 第140页 |
| 参考文献 | 第140-144页 |
| 创新点 | 第144-146页 |
| 作者简介 | 第146页 |
| 攻读学位期间取得的成绩 | 第146-149页 |
| 致谢 | 第149页 |
