摘要 | 第3-6页 |
ABSTRACT | 第6-9页 |
英文缩略词表 | 第13-15页 |
第1部分 HSP90β稳定FAK调控乳腺癌细胞侵袭转移 | 第15-58页 |
第1章 绪论 | 第15-23页 |
1.1 乳腺癌的研究现状 | 第15页 |
1.2 热休克蛋白90 | 第15-19页 |
1.2.1 热休克蛋白 | 第15-16页 |
1.2.2 HSP90的结构和功能 | 第16-17页 |
1.2.3 HSP90蛋白复合物的结构和功能 | 第17-18页 |
1.2.4 HSP90的抑制剂 | 第18-19页 |
1.2.5 HSP90顾客蛋白的泛素蛋白酶体降解途径 | 第19页 |
1.3 粘着斑激酶(FAK) | 第19-22页 |
1.3.1 FAK的结构与功能 | 第19-20页 |
1.3.2 FAK在肿瘤转移中的作用 | 第20-21页 |
1.3.3 FAK与乳腺癌 | 第21-22页 |
1.4 选题意义 | 第22-23页 |
第2章 HSP90β与FAK相互作用的研究 | 第23-44页 |
2.1 引言 | 第23页 |
2.2 材料 | 第23-27页 |
2.2.1 主要仪器 | 第23-24页 |
2.2.2 主要试剂与材料 | 第24-25页 |
2.2.3 试剂和溶液的配制 | 第25-27页 |
2.3 实验方法 | 第27-35页 |
2.3.1 细胞培养 | 第27-28页 |
2.3.2 Western Blot检测 | 第28-29页 |
2.3.3 磷酸钙转染 | 第29页 |
2.3.4 琼脂糖凝胶电泳 | 第29-30页 |
2.3.5 免疫共沉淀实验 | 第30页 |
2.3.6 HSP90β及突变体表达质粒的构建 | 第30-33页 |
2.3.7 GST-pull down实验 | 第33-34页 |
2.3.8 免疫荧光实验 | 第34页 |
2.3.9 统计学处理 | 第34-35页 |
2.4 结果 | 第35-41页 |
2.4.1 质粒的构建 | 第35-36页 |
2.4.2 肿瘤细胞中HSP90β与FAK相互作用 | 第36-38页 |
2.4.3 HSP90β与FAK相互作用的位点 | 第38-40页 |
2.4.4 HSP90β对FAK稳定性的影响 | 第40-41页 |
2.5 讨论 | 第41-44页 |
第3章 HSP90β影响FAK调控乳腺癌细胞侵袭转移 | 第44-58页 |
3.1 引言 | 第44页 |
3.2 材料 | 第44-46页 |
3.2.1 主要仪器 | 第44-45页 |
3.2.2 主要试剂与材料 | 第45-46页 |
3.2.3 试剂和溶液的配制 | 第46页 |
3.3 实验方法 | 第46-49页 |
3.3.1 siRNA瞬时转染 | 第46-47页 |
3.3.2 稳定细胞株的建立 | 第47页 |
3.3.3 Soft-agar实验 | 第47-48页 |
3.3.4 细胞划痕实验 | 第48页 |
3.3.5 Transwell实验 | 第48-49页 |
3.3.6 细胞骨架染色 | 第49页 |
3.3.7 统计学处理 | 第49页 |
3.4 结果 | 第49-56页 |
3.4.1 抑制FAK或HSP90β活性减少乳腺癌的生长、迁移和侵袭 | 第49-52页 |
3.4.2 稳定细胞株的建立 | 第52页 |
3.4.3 抑制FAK或HSP90β表达减少乳腺癌的生长和迁移 | 第52-54页 |
3.4.4 抑制HSP90β和FAK对细胞骨架的影响 | 第54-56页 |
3.5 讨论 | 第56-57页 |
3.6 本部分结论与展望 | 第57-58页 |
第2部分 Enterolactone对乳腺癌细胞生长和转移的抑制作用 | 第58-76页 |
第1章 绪论 | 第58-61页 |
1.1 乳腺癌与植物雌激素 | 第58页 |
1.2 木酚素的概况 | 第58-59页 |
1.3 木酚素与乳腺癌 | 第59-61页 |
第2章 Enterolactone对乳腺癌细胞生长和转移的影响 | 第61-76页 |
2.1 引言 | 第61页 |
2.2 材料 | 第61-62页 |
2.2.1 主要仪器 | 第61页 |
2.2.2 主要试剂 | 第61-62页 |
2.2.3 试剂和溶液的配制 | 第62页 |
2.3 实验方法 | 第62-66页 |
2.4 结果 | 第66-72页 |
2.4.1 ENL对MDA-MB-231的增殖的影响 | 第66-67页 |
2.4.2 ENL对细胞周期的影响 | 第67-68页 |
2.4.3 ENL对细胞增殖和细胞周期相关基因表达的影响 | 第68-69页 |
2.4.4 ENL对FAK磷酸化的影响 | 第69-70页 |
2.4.5 ENL抑制MDA MB-231细胞迁移和侵袭 | 第70-71页 |
2.4.6 ENL对乳腺癌细胞骨架的影响 | 第71-72页 |
2.5 讨论 | 第72-75页 |
2.6 本部分结论与展望 | 第75-76页 |
致谢 | 第76-77页 |
参考文献 | 第77-87页 |
攻读学位期间发表或录用的相关论文 | 第87页 |