摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
第一章 文献综述 | 第12-20页 |
1.1 黄麻概述 | 第12-14页 |
1.1.1 黄麻形态学与细胞学研究 | 第12页 |
1.1.2 黄麻种质资源的研究与利用 | 第12-13页 |
1.1.3 黄麻纤维脱胶的研究现状 | 第13页 |
1.1.4 黄麻的综合利用 | 第13-14页 |
1.2 cDNA文库概述 | 第14-16页 |
1.2.1 全长cDNA文库 | 第14页 |
1.2.2 全长cDNA文库的构建方法 | 第14-15页 |
1.2.3 cDNA文库构建的主要步骤 | 第15页 |
1.2.4 全长cDNA文库的应用 | 第15-16页 |
1.3 EST概述 | 第16-20页 |
1.3.1 EST的定义及发展 | 第16-17页 |
1.3.2 ESTs序列的获得与比较分析 | 第17页 |
1.3.3 EST的应用 | 第17-18页 |
1.3.4 EST引物的发展应用 | 第18-20页 |
第二章 黄麻叶片总RNA的提取 | 第20-31页 |
2.1 植物材料 | 第20页 |
2.2 主要仪器、试剂 | 第20页 |
2.3 RNA提取方法 | 第20-23页 |
2.3.1 SDS法参照罗绍银方法并加以改良 | 第20-21页 |
2.3.2 CTAB-LiCl法参照宋蓓方法并加以改良 | 第21页 |
2.3.3 热硼酸-蛋白酶K法参照姚玉新方法并加以改良 | 第21-22页 |
2.3.4 Trizol法参照孙德权方法并加以改良 | 第22-23页 |
2.3.5 通用植物试剂盒法 | 第23页 |
2.3.6 多糖多酚试剂盒法 | 第23页 |
2.4 RNA检测 | 第23-24页 |
2.4.1 琼脂糖凝胶电泳检测 | 第23-24页 |
2.4.2 紫外分光光度计法 | 第24页 |
2.5 结果与分析 | 第24-28页 |
2.6 讨论 | 第28-30页 |
2.7 本章小结 | 第30-31页 |
第三章 黄麻叶片全长cDNA文库的构建 | 第31-44页 |
3.1 实验准备与方法 | 第31-33页 |
3.1.1 实验材料、试剂 | 第31页 |
3.1.2 实验仪器 | 第31页 |
3.1.3 实验方法 | 第31-33页 |
3.2 实验步骤 | 第33-37页 |
3.2.1 黄麻叶片总RNA提取 | 第33页 |
3.2.2 cDNA第一链(sscDNA)合成 | 第33页 |
3.2.3 LD-PCR合成第二链cDNA(dscDNA) | 第33-34页 |
3.2.4 蛋白酶K(Proteinase K)消化 | 第34页 |
3.2.5 cDNA大小片段的分级分离 | 第34-35页 |
3.2.6 载体连接与转化 | 第35页 |
3.2.7 初始文库滴度测定与文库的扩增 | 第35-36页 |
3.2.8 文库的扩增 | 第36页 |
3.2.9 菌液PCR | 第36-37页 |
3.3 结果与分析 | 第37-41页 |
3.3.1 黄麻叶片总RNA提取的结果 | 第37-38页 |
3.3.2 黄麻dscDNA合成的结果 | 第38页 |
3.3.3 黄麻cDNA分级分离的结果 | 第38-39页 |
3.3.4 黄麻cDNA文库质量检测结果 | 第39-41页 |
3.3.4.1 平板结果 | 第39-40页 |
3.3.4.2 菌液PCR结果 | 第40-41页 |
3.4 讨论 | 第41-43页 |
3.5 本章小结 | 第43-44页 |
第四章 黄麻EST测序与分析 | 第44-55页 |
4.1 材料与方法 | 第44页 |
4.2 生物信息学分析测序结果 | 第44页 |
4.3 结果与分析 | 第44-53页 |
4.3.1 黄麻叶片EST序列基本特征统计分析 | 第44-46页 |
4.3.2 黄麻叶片EST序列的同源序列比较与功能注释分析 | 第46-50页 |
4.3.3 黄麻叶片EST同源序列的物种来源 | 第50-51页 |
4.3.4 黄麻叶片EST序列的基因GO分类结果 | 第51-53页 |
4.4 讨论 | 第53-54页 |
4.5 本章小结 | 第54-55页 |
第五章 结论与展望 | 第55-56页 |
5.1 结论 | 第55页 |
5.2 展望 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-64页 |
附录 | 第64-70页 |
致谢 | 第70页 |