| 论文创新点 | 第5-8页 |
| 摘要 | 第8-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 第一章 研究背景 | 第14-34页 |
| 1.1 乙型肝炎病毒概述 | 第14-19页 |
| 1.1.1 乙型肝炎病毒的流行病学 | 第14-15页 |
| 1.1.2 乙型肝炎病毒的分子生物学及其生命周期 | 第15-16页 |
| 1.1.3 乙型肝炎病毒的cccDNA及其持续性感染 | 第16-17页 |
| 1.1.4 乙型肝炎病毒慢性感染导致肝癌的研究概述 | 第17-19页 |
| 1.2 Sox家族及Sox4的研究概述 | 第19-21页 |
| 1.2.1 Sox家族 | 第19页 |
| 1.2.2 Sox4基因及其研究进展 | 第19-21页 |
| 1.3 Toll样受体介导的抗病毒先天性免疫 | 第21-34页 |
| 1.3.1 先天性免疫 | 第21页 |
| 1.3.2 模式识别受体及Toll样受体信号通路 | 第21-26页 |
| 1.3.3 干扰素及干扰素通路 | 第26-34页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第34-55页 |
| 2.1 实验材料与仪器 | 第34-38页 |
| 2.1.1 临床样本、细胞系、病毒株及质粒载体 | 第34-35页 |
| 2.1.2 抗体、siRNA和microRNA及实验所需试剂 | 第35-36页 |
| 2.1.3 实验中所用引物序列 | 第36-38页 |
| 2.1.4 实验相关仪器 | 第38页 |
| 2.2 实验方法 | 第38-55页 |
| 2.2.1 基因克隆及构建 | 第38-39页 |
| 2.2.2 PCR反应体系(50μl) | 第39页 |
| 2.2.3 DNA连接体系(30μl) | 第39页 |
| 2.2.4 PCR产物胶回收 | 第39-40页 |
| 2.2.5 YC法感受态的制备及转化 | 第40-41页 |
| 2.2.6 高纯质粒提取 | 第41页 |
| 2.2.7 细胞培养和转染 | 第41-42页 |
| 2.2.8 RNA提取和实时荧光定量PCR | 第42-43页 |
| 2.2.9 HBV Core-associated DNA的提取(以24孔板为例) | 第43-44页 |
| 2.2.10 蛋白质免疫印迹(Western blot) | 第44-46页 |
| 2.2.11 双荧光素酶报告系统活性检测 | 第46页 |
| 2.2.12 免疫共沉淀(Co-immunoprecipitation assay) | 第46-47页 |
| 2.2.13 染色质免疫共沉淀 | 第47-49页 |
| 2.2.14 细胞基金组DNA的提取 | 第49页 |
| 2.2.15 核质分离实验 | 第49-50页 |
| 2.2.16 凝胶迁移滞后实验 | 第50-52页 |
| 2.2.17 免疫荧光 | 第52页 |
| 2.2.18 蛋白质降解及其泛素化测定实验 | 第52-53页 |
| 2.2.19 外周血单核细胞分离方法 | 第53页 |
| 2.2.20 酶联免疫反应(以HBV e,s抗原检测试剂盒为例) | 第53-55页 |
| 第三章 乙肝病毒调控Sox4表达的机制研究 | 第55-69页 |
| 3.1 HBV可以明显上调Sox4的表达 | 第55-57页 |
| 3.2 HBV通过MAPK途径诱导YY1在转录水平上调控Sox4的表达 | 第57-61页 |
| 3.3 HBV通过甲基化修饰抑制miRNAs的表达在转录后水平上调控Sox4的表达 | 第61-65页 |
| 3.4 HBs与Sox4相互作用抑制Sox4蛋白泛素化降解 | 第65-69页 |
| 第四章 Sox4促进乙肝病毒复制的机制研究 | 第69-76页 |
| 4.1 Sox4在肝癌细胞系中促进HBV的复制 | 第69-71页 |
| 4.2 Sox4通过其HMG结构域直接结合HBV基因组来促进HBV的复制 | 第71-76页 |
| 第五章 Sox4抑制干扰素的表达以促进病毒复制 | 第76-85页 |
| 5.1 病毒感染促进Sox4表达 | 第76-77页 |
| 5.2 Sox4促进VSV,HCV,IAV和EV71的复制 | 第77-81页 |
| 5.3 Sox4抑制Ⅰ/Ⅲ型干扰素及干扰素诱导基因的表达 | 第81-85页 |
| 第六章 Sox4抑制干扰素表达的机制研究 | 第85-99页 |
| 6.1 Sox4与IKK复合体相互作用抑制NF-κB的激活 | 第85-88页 |
| 6.2 Sox4诱导NF-κB,IRF3和IRF7的泛素化降解 | 第88-91页 |
| 6.3 Sox4抑制MyD88依赖和非依赖型通路的激活以及MyD88的表达 | 第91-94页 |
| 6.4 Sox4抑制Toll样受体的表达 | 第94-95页 |
| 6.5 Sox4通过结合在Toll样受体的启动子上抑制其表达 | 第95-99页 |
| 第七章 研究总结与讨论 | 第99-105页 |
| 参考文献 | 第105-110页 |
| 博士期间发表及待发表论文 | 第110-111页 |
| 致谢 | 第111-112页 |
