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去甲金霉素高产菌株的选育及代谢过程的调控

摘要第5-6页
Abstract第6页
第1章 前言第11-25页
    1.1 去甲金霉素概况第11-13页
        1.1.1 去甲金霉素的分子结构第11-12页
        1.1.2 去甲金霉素的抑菌原理第12页
        1.1.3 去甲金霉素的应用第12-13页
    1.2 去甲金霉素的合成途径第13-14页
        1.2.1 丙二酰CoA的合成过程第13页
        1.2.2 丙二酸半酰胺CoA的合成过程第13-14页
        1.2.3 去甲金霉素的合成途径第14页
    1.3 去甲金霉素的代谢调控研究第14-18页
        1.3.1 去甲金霉素合成的初级代谢和次级代谢第14-15页
        1.3.2 三种代谢途径对去甲金霉素产量的影响第15页
        1.3.3 脂肪酸的合成对去甲金霉素产量的影响第15-16页
        1.3.4 碳源对去甲金霉素发酵的影响第16页
        1.3.5 氮源对去甲金霉素发酵的影响第16页
        1.3.6 无机磷酸盐对去甲金霉素发酵的影响第16-17页
        1.3.7 金属离子对去甲金霉素发酵的影响第17页
        1.3.8 氨基酸和生物素对去甲金霉素发酵的影响第17页
        1.3.9 前体对去甲金霉素发酵的影响第17-18页
        1.3.10 L-天冬酰胺对去甲金霉素发酵的影响第18页
        1.3.11 pH对去甲金霉素发酵的影响第18页
        1.3.12 其他因素对去甲金霉素发酵的影响第18页
    1.4 去甲金霉素合成过程中的关键酶系第18-20页
        1.4.1 葡萄糖-6-磷酸-脱氢酶(G-6-PDH)第18-19页
        1.4.2 果糖磷酸激酶(PFK)第19页
        1.4.3 PEP羧化酶第19页
        1.4.4 CoA羧基转移酶第19页
        1.4.5 脱水四环素氧化酶第19-20页
        1.4.6 脱氢四环素氧化酶第20页
    1.5 去甲金霉素高产菌株的筛选第20-23页
        1.5.1 自然诱变第20页
        1.5.2 诱变育种第20-22页
        1.5.3 诱变后的筛选第22-23页
    1.6 有关学科的国内外发展情况第23-24页
        1.6.1 国内研究状况第23页
        1.6.2 国外研究状况第23-24页
    1.7 本课题的研究意义、目的及主要内容第24-25页
第2章 实验材料和方法第25-37页
    2.1 实验材料第25-26页
        2.1.1 菌种第25页
        2.1.2 试剂第25页
        2.1.3 实验仪器第25-26页
        2.1.4 培养基配方第26页
    2.2 培养方法第26-27页
        2.2.1 分离和斜面培养第26-27页
        2.2.2 种子培养第27页
        2.2.3 发酵培养第27页
    2.3 实验方法第27-37页
        2.3.1 发酵液中去甲金霉素含量的测定第27-29页
        2.3.2 菌体生长量的测定方法第29-30页
        2.3.3 Bradford法测蛋白的浓度第30-31页
        2.3.4 发酵液中氨基氮的测定方法第31页
        2.3.5 发酵液中还原糖和总糖的测定方法第31-32页
        2.3.6 发酵液中氨基酸测定方法第32-33页
        2.3.7 发酵液中有机酸含量的测定方法第33-37页
第3章 诱变选育第37-54页
    3.1 引言第37页
    3.2 实验材料及分析方法第37-41页
        3.2.1 实验用菌种第37页
        3.2.2 实验用培养基第37-38页
        3.2.3 培养方法第38页
        3.2.4 粗蛋白测定方法第38页
        3.2.5 发酵液中干重、总糖、还原糖、氨氮测定第38页
        3.2.6 有机酸测定第38页
        3.2.7 二维电泳操作步骤第38-39页
        3.2.8 孢子悬浮液的制备第39-40页
        3.2.9 诱变育种方法和定向筛选第40-41页
    3.3 实验结果与分析第41-53页
        3.3.1 诱变条件的确定第41-43页
        3.3.2 紫外氯化锂复合诱变的筛选结果第43-44页
        3.3.3 EMS诱变筛选结果第44页
        3.3.4 ARTP诱变筛选结果第44页
        3.3.5 去甲金霉素抗性菌株的筛选第44-45页
        3.3.6 前体丙二酸钠抗性菌株的筛选第45页
        3.3.7 紫外氯化锂复合诱变并结合丙二酸钠筛选菌株第45-46页
        3.3.8 丙二酸钠对去甲金霉素合成的影响第46-47页
        3.3.9 菌株稳定性的考察第47-48页
        3.3.10 突变株(A6-6-9)高产的机理分析第48-53页
    3.4 小结第53-54页
第4章 添加二价金属离子对去甲金霉素产量的影响第54-70页
    4.1 引言第54页
    4.2 实验材料和分析方法第54-57页
        4.2.1 实验用菌种第54页
        4.2.2 实验用培养基第54页
        4.2.3 培养方法第54页
        4.2.4 粗蛋白测定方法第54页
        4.2.5 发酵液中干重、总糖的测定第54页
        4.2.6 有机酸测定第54页
        4.2.7 PEP羧化酶活力的测定第54-55页
        4.2.8 CoA羧基转移酶活力的测定第55-56页
        4.2.9 乙酰CoA羧化酶酶活力的测定第56-57页
        4.2.10 甲基丙二酰CoA羧基变位酶酶活力的测定第57页
    4.3 实验结果与分析第57-69页
        4.3.1 氯化镁对去甲金霉素合成的影响第57-59页
        4.3.2 氯化锌对去甲金霉素合成的影响第59-60页
        4.3.3 氯化钻对去甲金霉素合成的影响第60-61页
        4.3.4 氯化锰对去甲金霉素合成的影响第61-62页
        4.3.5 氯化锰促进去甲金霉素合成的机理研究第62-69页
    4.4 小结第69-70页
第5章 添加支链氨基酸对去甲金霉素产量的影响第70-79页
    5.1 前言第70-71页
    5.2 实验材料及分析方法第71页
        5.2.1 实验用菌种第71页
        5.2.2 实验用培养基第71页
        5.2.3 培养方法第71页
        5.2.4 生长量测定第71页
        5.2.5 氨基氮、还原糖和总糖测定第71页
        5.2.6 氨基酸测定第71页
        5.2.7 酶活测定第71页
    5.3 实验结果与分析第71-78页
        5.3.1 缬氨酸对去甲金霉素合成的影响第71-72页
        5.3.2 异亮氨酸对去甲金霉素合成的影响第72-73页
        5.3.3 亮氨酸对去甲金霉素合成的影响第73-74页
        5.3.4 发酵培养基中的支链氨基酸在发酵过程中的变化第74-75页
        5.3.5 亮氨酸促进去甲金霉素产量提高的机理研究第75-78页
    5.4 小结第78-79页
第6章 结论与展望第79-80页
    6.1 结论第79页
    6.2 展望第79-80页
参考文献第80-83页
致谢第83页

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