摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6页 |
第1章 前言 | 第11-25页 |
1.1 去甲金霉素概况 | 第11-13页 |
1.1.1 去甲金霉素的分子结构 | 第11-12页 |
1.1.2 去甲金霉素的抑菌原理 | 第12页 |
1.1.3 去甲金霉素的应用 | 第12-13页 |
1.2 去甲金霉素的合成途径 | 第13-14页 |
1.2.1 丙二酰CoA的合成过程 | 第13页 |
1.2.2 丙二酸半酰胺CoA的合成过程 | 第13-14页 |
1.2.3 去甲金霉素的合成途径 | 第14页 |
1.3 去甲金霉素的代谢调控研究 | 第14-18页 |
1.3.1 去甲金霉素合成的初级代谢和次级代谢 | 第14-15页 |
1.3.2 三种代谢途径对去甲金霉素产量的影响 | 第15页 |
1.3.3 脂肪酸的合成对去甲金霉素产量的影响 | 第15-16页 |
1.3.4 碳源对去甲金霉素发酵的影响 | 第16页 |
1.3.5 氮源对去甲金霉素发酵的影响 | 第16页 |
1.3.6 无机磷酸盐对去甲金霉素发酵的影响 | 第16-17页 |
1.3.7 金属离子对去甲金霉素发酵的影响 | 第17页 |
1.3.8 氨基酸和生物素对去甲金霉素发酵的影响 | 第17页 |
1.3.9 前体对去甲金霉素发酵的影响 | 第17-18页 |
1.3.10 L-天冬酰胺对去甲金霉素发酵的影响 | 第18页 |
1.3.11 pH对去甲金霉素发酵的影响 | 第18页 |
1.3.12 其他因素对去甲金霉素发酵的影响 | 第18页 |
1.4 去甲金霉素合成过程中的关键酶系 | 第18-20页 |
1.4.1 葡萄糖-6-磷酸-脱氢酶(G-6-PDH) | 第18-19页 |
1.4.2 果糖磷酸激酶(PFK) | 第19页 |
1.4.3 PEP羧化酶 | 第19页 |
1.4.4 CoA羧基转移酶 | 第19页 |
1.4.5 脱水四环素氧化酶 | 第19-20页 |
1.4.6 脱氢四环素氧化酶 | 第20页 |
1.5 去甲金霉素高产菌株的筛选 | 第20-23页 |
1.5.1 自然诱变 | 第20页 |
1.5.2 诱变育种 | 第20-22页 |
1.5.3 诱变后的筛选 | 第22-23页 |
1.6 有关学科的国内外发展情况 | 第23-24页 |
1.6.1 国内研究状况 | 第23页 |
1.6.2 国外研究状况 | 第23-24页 |
1.7 本课题的研究意义、目的及主要内容 | 第24-25页 |
第2章 实验材料和方法 | 第25-37页 |
2.1 实验材料 | 第25-26页 |
2.1.1 菌种 | 第25页 |
2.1.2 试剂 | 第25页 |
2.1.3 实验仪器 | 第25-26页 |
2.1.4 培养基配方 | 第26页 |
2.2 培养方法 | 第26-27页 |
2.2.1 分离和斜面培养 | 第26-27页 |
2.2.2 种子培养 | 第27页 |
2.2.3 发酵培养 | 第27页 |
2.3 实验方法 | 第27-37页 |
2.3.1 发酵液中去甲金霉素含量的测定 | 第27-29页 |
2.3.2 菌体生长量的测定方法 | 第29-30页 |
2.3.3 Bradford法测蛋白的浓度 | 第30-31页 |
2.3.4 发酵液中氨基氮的测定方法 | 第31页 |
2.3.5 发酵液中还原糖和总糖的测定方法 | 第31-32页 |
2.3.6 发酵液中氨基酸测定方法 | 第32-33页 |
2.3.7 发酵液中有机酸含量的测定方法 | 第33-37页 |
第3章 诱变选育 | 第37-54页 |
3.1 引言 | 第37页 |
3.2 实验材料及分析方法 | 第37-41页 |
3.2.1 实验用菌种 | 第37页 |
3.2.2 实验用培养基 | 第37-38页 |
3.2.3 培养方法 | 第38页 |
3.2.4 粗蛋白测定方法 | 第38页 |
3.2.5 发酵液中干重、总糖、还原糖、氨氮测定 | 第38页 |
3.2.6 有机酸测定 | 第38页 |
3.2.7 二维电泳操作步骤 | 第38-39页 |
3.2.8 孢子悬浮液的制备 | 第39-40页 |
3.2.9 诱变育种方法和定向筛选 | 第40-41页 |
3.3 实验结果与分析 | 第41-53页 |
3.3.1 诱变条件的确定 | 第41-43页 |
3.3.2 紫外氯化锂复合诱变的筛选结果 | 第43-44页 |
3.3.3 EMS诱变筛选结果 | 第44页 |
3.3.4 ARTP诱变筛选结果 | 第44页 |
3.3.5 去甲金霉素抗性菌株的筛选 | 第44-45页 |
3.3.6 前体丙二酸钠抗性菌株的筛选 | 第45页 |
3.3.7 紫外氯化锂复合诱变并结合丙二酸钠筛选菌株 | 第45-46页 |
3.3.8 丙二酸钠对去甲金霉素合成的影响 | 第46-47页 |
3.3.9 菌株稳定性的考察 | 第47-48页 |
3.3.10 突变株(A6-6-9)高产的机理分析 | 第48-53页 |
3.4 小结 | 第53-54页 |
第4章 添加二价金属离子对去甲金霉素产量的影响 | 第54-70页 |
4.1 引言 | 第54页 |
4.2 实验材料和分析方法 | 第54-57页 |
4.2.1 实验用菌种 | 第54页 |
4.2.2 实验用培养基 | 第54页 |
4.2.3 培养方法 | 第54页 |
4.2.4 粗蛋白测定方法 | 第54页 |
4.2.5 发酵液中干重、总糖的测定 | 第54页 |
4.2.6 有机酸测定 | 第54页 |
4.2.7 PEP羧化酶活力的测定 | 第54-55页 |
4.2.8 CoA羧基转移酶活力的测定 | 第55-56页 |
4.2.9 乙酰CoA羧化酶酶活力的测定 | 第56-57页 |
4.2.10 甲基丙二酰CoA羧基变位酶酶活力的测定 | 第57页 |
4.3 实验结果与分析 | 第57-69页 |
4.3.1 氯化镁对去甲金霉素合成的影响 | 第57-59页 |
4.3.2 氯化锌对去甲金霉素合成的影响 | 第59-60页 |
4.3.3 氯化钻对去甲金霉素合成的影响 | 第60-61页 |
4.3.4 氯化锰对去甲金霉素合成的影响 | 第61-62页 |
4.3.5 氯化锰促进去甲金霉素合成的机理研究 | 第62-69页 |
4.4 小结 | 第69-70页 |
第5章 添加支链氨基酸对去甲金霉素产量的影响 | 第70-79页 |
5.1 前言 | 第70-71页 |
5.2 实验材料及分析方法 | 第71页 |
5.2.1 实验用菌种 | 第71页 |
5.2.2 实验用培养基 | 第71页 |
5.2.3 培养方法 | 第71页 |
5.2.4 生长量测定 | 第71页 |
5.2.5 氨基氮、还原糖和总糖测定 | 第71页 |
5.2.6 氨基酸测定 | 第71页 |
5.2.7 酶活测定 | 第71页 |
5.3 实验结果与分析 | 第71-78页 |
5.3.1 缬氨酸对去甲金霉素合成的影响 | 第71-72页 |
5.3.2 异亮氨酸对去甲金霉素合成的影响 | 第72-73页 |
5.3.3 亮氨酸对去甲金霉素合成的影响 | 第73-74页 |
5.3.4 发酵培养基中的支链氨基酸在发酵过程中的变化 | 第74-75页 |
5.3.5 亮氨酸促进去甲金霉素产量提高的机理研究 | 第75-78页 |
5.4 小结 | 第78-79页 |
第6章 结论与展望 | 第79-80页 |
6.1 结论 | 第79页 |
6.2 展望 | 第79-80页 |
参考文献 | 第80-83页 |
致谢 | 第83页 |