| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 缩写词及英汉对照 | 第7-12页 |
| 1 前言 | 第12-23页 |
| 1.1 根结线虫病的发生与防治概况 | 第12-14页 |
| 1.2 RNAi及其在基因功能研究中的应用 | 第14-16页 |
| 1.2.1 RNAi的机制 | 第15页 |
| 1.2.2 RNAi技术在防治植物寄生线虫上的应用 | 第15-16页 |
| 1.3 VIGS技术及其在基因功能研究中的应用 | 第16-18页 |
| 1.3.1 VIGS的定义及原理 | 第16-17页 |
| 1.3.2 VIGS技术在基因功能研究中的应用 | 第17-18页 |
| 1.4 PDCD6基因功能研究进展 | 第18-19页 |
| 1.5 MYB基因功能研究进展 | 第19-21页 |
| 1.6 研究目的和意义 | 第21-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-44页 |
| 2.1 材料 | 第23-26页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第23页 |
| 2.1.2 供试植物 | 第23页 |
| 2.1.3 菌株及质粒载体 | 第23页 |
| 2.1.4 供试试剂及配制 | 第23-24页 |
| 2.1.5 培养基 | 第24-25页 |
| 2.1.6 电泳 | 第25页 |
| 2.1.7 提取RNA的实验用品及试剂 | 第25页 |
| 2.1.8 常用仪器设备 | 第25-26页 |
| 2.2 方法 | 第26-44页 |
| 2.2.1 植物材料培养 | 第26页 |
| 2.2.2 线虫接种 | 第26页 |
| 2.2.3 侵染前二龄幼虫的收集 | 第26页 |
| 2.2.4 MiPDCD6基因的体外RNAi | 第26-31页 |
| 2.2.5 半定量RT-PCR检测干涉效果 | 第31-34页 |
| 2.2.6 南方根结线虫MiPDCD6基因和番茄LeMYB330基因的VIGS效应 | 第34-44页 |
| 3 结果与分析 | 第44-58页 |
| 3.1 MiPDCD6基因的体外RNAi效应 | 第44-49页 |
| 3.1.1 MiPDCD6基因和外源基因GFP体外转录模板的制备 | 第44页 |
| 3.1.2 MiPDCD6基因和外源基因GFP的dsRNA合成 | 第44-45页 |
| 3.1.3 MiPDCD6和GFP体外RNAi对线虫活力的影响 | 第45-46页 |
| 3.1.4 MiPDCD6和GFP体外RNAi对南方根结线虫侵染力的影响 | 第46-47页 |
| 3.1.5 半定量RT-RCR检测dsRNA浸泡对MiPDCD6表达量的影响 | 第47-49页 |
| 3.2 南方根结线虫MiPDCD6基因和番茄LeMYB330基因的VIGS效应 | 第49-58页 |
| 3.2.1 目的基因片段的克隆与鉴定 | 第49-52页 |
| 3.2.2 VIGS载体的构建与鉴定 | 第52-54页 |
| 3.2.3 VIGS结果与检测 | 第54-58页 |
| 4 结论与讨论 | 第58-64页 |
| 4.1 结论 | 第58页 |
| 4.2 讨论 | 第58-64页 |
| 4.2.1 南方根结线虫MiPDCD6基因体外RNAi | 第58-60页 |
| 4.2.2 南方根结线虫MiPDCD6基因VIGS效应分析 | 第60页 |
| 4.2.3 番茄LeMYB330基因的VIGS效应分析 | 第60-61页 |
| 4.2.4 影响VIGS的因素 | 第61-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-71页 |
| 附录 | 第71-72页 |
