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Drosophila serrata求偶中振翅行为的研究

摘要第3-6页
Abstract第6-8页
论文缩写词中英文对照第9-13页
1 前言第13-20页
    1.1 果蝇求偶行为第13-14页
    1.2 山果蝇物种亚群(montium species-subgroup)物种求偶行为第14-15页
    1.3 山果蝇物种亚群物种的攀爬前振翅行为第15页
    1.4 果蝇性信息素第15-16页
    1.5 果蝇的嗅觉和味觉系统第16-18页
    1.6 学习和记忆行为第18页
    1.7 抑制消减杂交技术第18页
    1.8 研究的目的和意义第18-20页
2 材料与方法第20-33页
    2.1 材料第20页
        2.1.1 果蝇第20页
        2.1.2 主要试剂与耗材第20页
    2.2 实验方法第20-33页
        2.2.1 处女果蝇第20-21页
        2.2.2 求偶行为的视频录制及分析第21页
        2.2.3 第一次交配后果蝇对分离-相遇实验第21页
        2.2.4 品系筛选第21-22页
        2.2.5 第一次求偶攀爬前振翅的生物学意义第22-23页
        2.2.6 抑制消减杂交c DNA文库的构建第23-32页
            2.2.6.1 RNA的提取第23页
            2.2.6.2 第一链c DNA的合成第23-24页
            2.2.6.3 双链c DNA的合成与纯化第24-27页
            2.2.6.4 ds c DNA的限制性内切酶Rsa I消化与纯化第27-28页
            2.2.6.5 tester c DNA连接合适的接头第28页
            2.2.6.6 第一次杂交第28-29页
            2.2.6.7 第二次杂交第29-30页
            2.2.6.8 PCR扩增第30-31页
            2.2.6.9 PCR产物的纯化第31页
            2.2.6.10 消减效率的PCR检测第31页
            2.2.6.11 克隆与测序第31-32页
        2.2.7 荧光定量PCR第32-33页
            2.2.7.1 总RNA提取第32页
            2.2.7.2 反转录合成c DNA第32页
            2.2.7.3 标准曲线和扩增效率的确定第32-33页
            2.2.7.4 目的样品荧光定量PCR第33页
        2.2.8 实验数据统计分析第33页
3 结果与分析第33-69页
    3.1 求偶行为第33-44页
        3.1.1 雌雄互动第33-37页
            3.1.1.1 雄蝇行为第34-36页
            3.1.1.2 雌蝇行为第36页
            3.1.1.3 D. serrata特别的求偶特征第36-37页
        3.1.2 雄蝇振翅(vibrating)行为特征第37-38页
        3.1.3 影响振翅的潜在因素分析第38页
        3.1.4 第一次求偶攀爬前振翅的生物学意义第38-40页
            3.1.4.1 对交配时长(copulation duration)的影响第38页
            3.1.4.2 第一次求偶攀爬前振翅对后代数量的影响第38-40页
        3.1.5 学习与记忆行为第40-44页
    3.2 品系筛选第44-47页
    3.3 消减杂交文库(SSH c DNA)构建第47-53页
        3.3.1 总RNA的提取第47-48页
        3.3.2 双链c DNA的合成与循环优化第48页
        3.3.3 ds c DNA酶切反应及接头连接第48-49页
        3.3.4 消减杂交产物第二次PCR第49页
        3.3.5 消减杂交文库质量鉴定和序列分析第49-53页
    3.4 振翅与不振翅求偶差异表达基因第53-61页
        3.4.1 肌肉相关基因第53页
        3.4.2 肌肉运动相关基因第53-54页
        3.4.3 性信息素合成基因第54-56页
        3.4.4 气味识别相关基因第56-57页
        3.4.5 学习和记忆相关基因第57-60页
        3.4.6 激酶相关基因第60-61页
        3.4.7 细胞色素基因第61页
    3.5 荧光定量PCR第61-69页
        3.5.1 引物设计和检测第61-64页
        3.5.2 各基因在不同样品中的表达量第64-69页
4 讨论和结论第69-75页
    4.1 振翅行为影响因素第69-72页
        4.1.1 雌性拒绝因素第69-70页
        4.1.2 学习和记忆第70-71页
        4.1.3 气味和嗅觉因素第71-72页
    4.2 第一次求偶攀爬前振翅的遗传机制及其生物学意义第72-73页
    4.3 荧光定量PCR第73页
    4.4 结论第73-75页
致谢第75-76页
参考文献第76-83页
附录:PY SSH c DNA文库基因测序结果第83-94页

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