摘要 | 第3-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
论文缩写词中英文对照 | 第9-13页 |
1 前言 | 第13-20页 |
1.1 果蝇求偶行为 | 第13-14页 |
1.2 山果蝇物种亚群(montium species-subgroup)物种求偶行为 | 第14-15页 |
1.3 山果蝇物种亚群物种的攀爬前振翅行为 | 第15页 |
1.4 果蝇性信息素 | 第15-16页 |
1.5 果蝇的嗅觉和味觉系统 | 第16-18页 |
1.6 学习和记忆行为 | 第18页 |
1.7 抑制消减杂交技术 | 第18页 |
1.8 研究的目的和意义 | 第18-20页 |
2 材料与方法 | 第20-33页 |
2.1 材料 | 第20页 |
2.1.1 果蝇 | 第20页 |
2.1.2 主要试剂与耗材 | 第20页 |
2.2 实验方法 | 第20-33页 |
2.2.1 处女果蝇 | 第20-21页 |
2.2.2 求偶行为的视频录制及分析 | 第21页 |
2.2.3 第一次交配后果蝇对分离-相遇实验 | 第21页 |
2.2.4 品系筛选 | 第21-22页 |
2.2.5 第一次求偶攀爬前振翅的生物学意义 | 第22-23页 |
2.2.6 抑制消减杂交c DNA文库的构建 | 第23-32页 |
2.2.6.1 RNA的提取 | 第23页 |
2.2.6.2 第一链c DNA的合成 | 第23-24页 |
2.2.6.3 双链c DNA的合成与纯化 | 第24-27页 |
2.2.6.4 ds c DNA的限制性内切酶Rsa I消化与纯化 | 第27-28页 |
2.2.6.5 tester c DNA连接合适的接头 | 第28页 |
2.2.6.6 第一次杂交 | 第28-29页 |
2.2.6.7 第二次杂交 | 第29-30页 |
2.2.6.8 PCR扩增 | 第30-31页 |
2.2.6.9 PCR产物的纯化 | 第31页 |
2.2.6.10 消减效率的PCR检测 | 第31页 |
2.2.6.11 克隆与测序 | 第31-32页 |
2.2.7 荧光定量PCR | 第32-33页 |
2.2.7.1 总RNA提取 | 第32页 |
2.2.7.2 反转录合成c DNA | 第32页 |
2.2.7.3 标准曲线和扩增效率的确定 | 第32-33页 |
2.2.7.4 目的样品荧光定量PCR | 第33页 |
2.2.8 实验数据统计分析 | 第33页 |
3 结果与分析 | 第33-69页 |
3.1 求偶行为 | 第33-44页 |
3.1.1 雌雄互动 | 第33-37页 |
3.1.1.1 雄蝇行为 | 第34-36页 |
3.1.1.2 雌蝇行为 | 第36页 |
3.1.1.3 D. serrata特别的求偶特征 | 第36-37页 |
3.1.2 雄蝇振翅(vibrating)行为特征 | 第37-38页 |
3.1.3 影响振翅的潜在因素分析 | 第38页 |
3.1.4 第一次求偶攀爬前振翅的生物学意义 | 第38-40页 |
3.1.4.1 对交配时长(copulation duration)的影响 | 第38页 |
3.1.4.2 第一次求偶攀爬前振翅对后代数量的影响 | 第38-40页 |
3.1.5 学习与记忆行为 | 第40-44页 |
3.2 品系筛选 | 第44-47页 |
3.3 消减杂交文库(SSH c DNA)构建 | 第47-53页 |
3.3.1 总RNA的提取 | 第47-48页 |
3.3.2 双链c DNA的合成与循环优化 | 第48页 |
3.3.3 ds c DNA酶切反应及接头连接 | 第48-49页 |
3.3.4 消减杂交产物第二次PCR | 第49页 |
3.3.5 消减杂交文库质量鉴定和序列分析 | 第49-53页 |
3.4 振翅与不振翅求偶差异表达基因 | 第53-61页 |
3.4.1 肌肉相关基因 | 第53页 |
3.4.2 肌肉运动相关基因 | 第53-54页 |
3.4.3 性信息素合成基因 | 第54-56页 |
3.4.4 气味识别相关基因 | 第56-57页 |
3.4.5 学习和记忆相关基因 | 第57-60页 |
3.4.6 激酶相关基因 | 第60-61页 |
3.4.7 细胞色素基因 | 第61页 |
3.5 荧光定量PCR | 第61-69页 |
3.5.1 引物设计和检测 | 第61-64页 |
3.5.2 各基因在不同样品中的表达量 | 第64-69页 |
4 讨论和结论 | 第69-75页 |
4.1 振翅行为影响因素 | 第69-72页 |
4.1.1 雌性拒绝因素 | 第69-70页 |
4.1.2 学习和记忆 | 第70-71页 |
4.1.3 气味和嗅觉因素 | 第71-72页 |
4.2 第一次求偶攀爬前振翅的遗传机制及其生物学意义 | 第72-73页 |
4.3 荧光定量PCR | 第73页 |
4.4 结论 | 第73-75页 |
致谢 | 第75-76页 |
参考文献 | 第76-83页 |
附录:PY SSH c DNA文库基因测序结果 | 第83-94页 |