| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-7页 |
| 第一章 前言 | 第7-19页 |
| ·合成生物学研究进展 | 第7-12页 |
| ·限制修饰系统概述 | 第12-17页 |
| ·PET 表达系统 | 第17页 |
| ·本课题的研究目的及研究内容 | 第17-19页 |
| 第二章 材料与方法 | 第19-33页 |
| ·实验材料 | 第19-24页 |
| ·菌种和质粒 | 第19-20页 |
| ·分子生物学常用的工具酶 | 第20页 |
| ·常用试剂盒 | 第20页 |
| ·常用生化试剂 | 第20-22页 |
| ·常用的分子量标准 | 第22页 |
| ·聚合酶链式反应（PCR）试剂 | 第22-23页 |
| ·实验所用仪器 | 第23-24页 |
| ·实验方法 | 第24-33页 |
| ·菌种保存方法 | 第24页 |
| ·常用培养基的配制 | 第24页 |
| ·分子生物学常用溶液及缓冲液的配制 | 第24-25页 |
| ·分子生物学常规操作 | 第25页 |
| ·PCR 方法 | 第25-26页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第26-27页 |
| ·诱导表达 | 第27页 |
| ·SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE） | 第27-30页 |
| ·细菌总蛋白裂解液的制备 | 第30页 |
| ·纯化目的蛋白 | 第30-31页 |
| ·蛋白质含量的测定 | 第31页 |
| ·活菌计数方法 | 第31-32页 |
| ·显微镜观察 | 第32-33页 |
| 第三章 结果与分析 | 第33-43页 |
| ·pET28a-pstI 质粒的构建 | 第33-35页 |
| ·pstI 基因的获得 | 第34页 |
| ·pET28a 质粒经HindIII/BamHI 双酶切获得载体片段 | 第34-35页 |
| ·验证重组子的正确性 | 第35页 |
| ·pET28a-pstI 质粒在RosettaTM 菌中的表达 | 第35-43页 |
| ·利用His-标签纯化PstI 蛋白 | 第36-37页 |
| ·在体外验证纯化得到的PstI 蛋白的活性 | 第37页 |
| ·pET28a-pstI 质粒表达后对RosettaTM 宿主生长的影响 | 第37-40页 |
| ·pET28a-pstI 质粒表达后对宿主基因组的影响 | 第40-43页 |
| 第四章 讨论 | 第43-46页 |
| 第五章 结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-56页 |
| 个人简历及发表的学术论文 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57页 |
