| 中文提要 | 第4-10页 |
| Abstract | 第10-16页 |
| 前言 | 第21-26页 |
| 第一部分 在非小细胞肺癌中mi R2965p通过靶向调控PLK1抑制细胞增殖 | 第26-50页 |
| 1. 材料 | 第26-31页 |
| 1.1 细胞株及组织样本 | 第26-27页 |
| 1.2 仪器及试剂 | 第27-29页 |
| 1.3 试剂配制方法 | 第29-31页 |
| 2. 研究方法及步骤 | 第31-39页 |
| 2.1 生物信息学方法 | 第31-32页 |
| 2.2 细胞培养 | 第32-33页 |
| 2.3 细胞总RNA的提取和逆转录c DNA的合成 | 第33-34页 |
| 2.4 实时定量PCR（q PCR） | 第34-35页 |
| 2.5 统计分析 Real-Time PCR 结果 | 第35-36页 |
| 2.6 瞬时转染细胞 | 第36页 |
| 2.7 双荧光素酶报告基因活性检测 | 第36-37页 |
| 2.8 重组质粒的构建 | 第37页 |
| 2.9 生物信息学软件和数据库 | 第37-38页 |
| 2.10 CCK-8 法检测细胞增殖 | 第38页 |
| 2.11 Ed U法检测细胞增殖 | 第38-39页 |
| 3. 结果 | 第39-47页 |
| 3.1 初次筛选 | 第39页 |
| 3.2 对初次筛选的mi RNAs进行验证 | 第39-40页 |
| 3.3 mi RNAs与目的基因 3’UTR区域的种子序列直接结合 | 第40-42页 |
| 3.4 在NSCLC组织中mi R2965p通过靶向调控PLK1影响NSCLC细胞的生物学功能 | 第42-47页 |
| 4．讨论 | 第47-50页 |
| 第二部分 在非小细胞肺癌中mi R-203通过靶向调控BMI1抑制细胞增殖和侵袭 | 第50-67页 |
| 1. 材料 | 第51-52页 |
| 1.1 细胞株及组织样本 | 第51页 |
| 1.2 仪器及试剂 | 第51-52页 |
| 1.3 试剂配制方法 | 第52页 |
| 2. 研究方法及步骤 | 第52-55页 |
| 2.1 生物信息学方法 | 第52页 |
| 2.2 逆转录c DNA的合成和实时定量PCR（q PCR） | 第52-53页 |
| 2.3 统计分析Real-Time PCR结果 | 第53页 |
| 2.4 双荧光素酶报告质粒构建 | 第53页 |
| 2.5 双荧光素酶报告基因活性检测 | 第53-54页 |
| 2.6 Transwell试验检测细胞的侵袭能力 | 第54-55页 |
| 2.7 流式细胞仪技术检测细胞凋亡 | 第55页 |
| 3. 结果 | 第55-65页 |
| 3.1 初次筛选 | 第55-56页 |
| 3.2 对初次筛选的mi RNAs进行验证 | 第56-57页 |
| 3.3 mi R-203通过和基因 3’UTR区域的种子序列直接结合来抑制BMI1基因的表达。 | 第57-59页 |
| 3.4 在NSCLC组织中，mi R-203通过靶向调控BMI1影响NSCLC细胞的生物学功能。 | 第59-65页 |
| 4. 讨论 | 第65-67页 |
| 第三部分 在食管鳞癌中mi R-93通过靶向调控DAB2抑制细胞增殖和迁移 | 第67-86页 |
| 1. 材料 | 第68-69页 |
| 1.1 细胞株及组织样本 | 第68页 |
| 1.2 仪器及试剂 | 第68页 |
| 1.3 试剂配制方法 | 第68-69页 |
| 2. 研究方法及步骤 | 第69-73页 |
| 2.1 生物信息学方法 | 第69页 |
| 2.2 逆转录c DNA的合成和实时定量PCR（q PCR） | 第69-70页 |
| 2.3 统计分析Real-Time PCR结果 | 第70页 |
| 2.4 双荧光素酶报告质粒的构建 | 第70-72页 |
| 2.5 细胞周期检测 | 第72-73页 |
| 3. 结果 | 第73-83页 |
| 3.1 初次筛选 | 第73页 |
| 3.2 对初次筛选的mi RNAs进行验证 | 第73-74页 |
| 3.3 mi R-93通过和基因 3’UTR区域的种子序列直接结合来抑制BMI1基因的表达。 | 第74-77页 |
| 3.4 在ESCC组织中，mi R-93通过靶向调控DAB2影响ESCC细胞的生物学功能。 | 第77-83页 |
| 4. 讨论 | 第83-86页 |
| 第四部分 在食管鳞癌中mi R-218通过靶向调控BMI1抑制细胞增殖和迁移 | 第86-109页 |
| 1. 材料 | 第87-88页 |
| 1.1 细胞株及组织样本 | 第87页 |
| 1.2 仪器及试剂 | 第87页 |
| 1.3 试剂配制方法 | 第87-88页 |
| 2. 研究方法及步骤 | 第88-93页 |
| 2.1 生物信息学方法 | 第88页 |
| 2.2 逆转录c DNA的合成和实时定量PCR(q PCR) | 第88-89页 |
| 2.3 统计分析Real-Time PCR结果 | 第89页 |
| 2.4 双荧光素酶报告质粒的构建 | 第89-90页 |
| 2.5 过表达BMI载体的构建 | 第90-91页 |
| 2.6 双荧光素酶报告基因活性检测 | 第91-92页 |
| 2.7 细胞划痕实验 | 第92-93页 |
| 3. 结果 | 第93-108页 |
| 3.1 初次筛选 | 第93页 |
| 3.2 对初次筛选的mi RNAs进行验证 | 第93-94页 |
| 3.3 mi R-218通过和基因 3’UTR区域的种子序列直接结合来抑制BMI1基因的表达。 | 第94-97页 |
| 3.4 在ESCC组织中，mi R-218通过靶向调控BMI1影响ESCC细胞的生物学功能。 | 第97-108页 |
| 4. 讨论 | 第108-109页 |
| 小结 | 第109-110页 |
| 参考文献 | 第110-121页 |
| 综述 micro RNA在NSCLC中的研究进展 | 第121-133页 |
| 参考文献 | 第128-133页 |
| 英文缩略词表 | 第133-134页 |
| 攻读学位期间本人出版或公开发表的论著、论文 | 第134-135页 |
| 致谢 | 第135-137页 |
