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嘌呤生物碱Theacrine通过Sirt3调控线粒体蛋白去乙酰化发挥多巴胺能神经元保护作用和机制研究

中文摘要第3-6页
Abstract第6-8页
缩略词表第9-13页
第一章 前言第13-21页
    1 帕金森疾病与线粒体氧化应激损伤第13-14页
    2 Sirt3对线粒体氧化应激的影响第14-18页
        2.1 去乙酰化酶Sirt3第14-15页
        2.2 Sirt3促进线粒体内ROS的清除第15-16页
        2.3 Sirt3对线粒体能量代谢过程的影响第16页
        2.4 Sirt3对线粒体物质代谢及生物合成过程的影响第16-18页
    3 Sirt3在帕金森疾病中的研究进展第18页
    4 Theacrine与神经疾病的研究进展第18-20页
    5 立题依据和研究内容第20-21页
第二章 Theacrine对 6-OHDA诱导的大鼠PD模型以及MPTP诱导的斑马鱼PD模型中多巴胺神经元的保护作用第21-42页
    1 实验材料第21-22页
        1.1 实验动物第21页
        1.2 主要实验仪器第21页
        1.3 主要实验试剂第21-22页
    2 实验方法第22-27页
        2.1 6-OHDA诱导的大鼠帕金森模型第22-24页
        2.2 阿朴吗啡诱导的旋转行为第24页
        2.3 转棒式疲劳仪行为第24页
        2.4 Cat Walk步态行为第24-25页
        2.5 石蜡切片方法第25页
        2.6 免疫组化方法第25-26页
        2.7 电化学液相系统检测脑组织DA、DOPAC、HVA神经递质含量第26页
        2.8 Western Blot方法检测蛋白表达第26-27页
        2.9 原位杂交技术第27页
        2.10 斑马鱼行为学第27页
        2.11 统计学处理第27页
    3 实验结果第27-40页
        3.1 Theacrine对 6-OHDA诱导的PD模型大鼠旋转行为的影响第27-28页
        3.2 Theacrine对 6-OHDA诱导的PD模型大鼠转棒行为的影响第28-29页
        3.3 Theacrine对 6-OHDA诱导的PD模型大鼠落脚直观图的影响第29-30页
        3.4 Theacrine对 6-OHDA诱导的PD模型大鼠落脚模式的影响第30-31页
        3.5 Theacrine对 6-OHDA诱导的PD模型大鼠悬空速度、站立时间及行走循环的影响第31-33页
        3.6 Theacrine对 6-OHDA诱导的PD模型大鼠多巴胺能神经元的影响第33-35页
        3.7 Theacrine对 6-OHDA诱导的PD模型大鼠多巴胺神经递质及其代谢产物的影响第35-36页
        3.8 Theacrine对 6-OHDA大鼠PD模型中p-AKT及下游蛋白的影响第36-37页
        3.9 Theacrine对MPTP诱导的斑马鱼PD模型触尾实验的影响第37-38页
        3.10 原位杂交技术检测Theacrine对MPTP诱导的斑马鱼PD模型的保护作用第38-39页
        3.11 Theacrine对MPTP诱导的斑马鱼PD模型神经元表达的影响第39-40页
    4 本章小结及讨论第40-42页
第三章 Theacrine对MPP+诱导的SH-SY5Y细胞PD模型的保护作用第42-56页
    1 实验材料第42-43页
    2 实验方法第43-45页
        2.1 细胞培养第43页
        2.2 CCK-8 试剂盒检测Theacrine对细胞生长抑制率的影响第43页
        2.3 LDH试剂盒检测Theacrine对细胞活力的影响第43-44页
        2.4 SOD试剂盒检测Theacrine对细胞抗氧化酶活性的影响第44页
        2.5 Theacrine对线粒体ROS生成速率的影响第44页
        2.6 Theacrine对线粒体膜电位的影响第44-45页
        2.7 流式细胞仪检测Theacrine对细胞凋亡的影响第45页
        2.8 统计学处理第45页
    3 实验结果第45-54页
        3.1 Theacrine对MPP+诱导的SH-SY5Y细胞增殖抑制的影响第45-47页
        3.2 Theacrine对SH-SY5Y细胞酪氨酸羟化酶(TH)的影响第47页
        3.3 Theacrine对SH-SY5Y细胞LDH的影响第47-48页
        3.4 Theacrine对SH-SY5Y细胞T-SOD活性的影响第48-49页
        3.5 Theacrine对SH-SY5Y细胞内ROS生成速率的影响第49页
        3.6 Theacrine对SH-SY5Y细胞线粒体膜电位的影响第49-50页
        3.7 Theacrine对SH-SY5Y细胞凋亡水平的影响第50-51页
        3.8 Theacrine对MPP+细胞损伤模型中p-AKT及下游蛋白的影响第51-54页
    4 本章小结及讨论第54-56页
第四章 Sirt3介导的去乙酰化活性在Theacrine保护多巴胺能神经元中的作用第56-70页
    1 实验材料第56页
    2 实验方法第56-60页
        2.1 Theacrine对Sirt3体外去乙酰化活性的检测第56-57页
        2.2 线粒体分离第57-58页
        2.3 免疫沉淀法测定SOD2乙酰化水平第58页
        2.4 线粒体复合物II及复合酶V活性测定第58-59页
        2.5 RNAi干扰方法第59-60页
        2.6 Sirt3过表达方法第60页
        2.7 统计学处理第60页
    3 实验结果第60-68页
        3.1 Theacrine对Sirt3体外去乙酰化活性及蛋白表达的影响第60-62页
        3.2 Theacrine对 6-OHDA大鼠PD模型及MPP+细胞损伤模型中Sirt3的影响第62-63页
        3.3 Theacrine对线粒体SOD2去乙酰化水平的影响第63-64页
        3.4 Theacrine对线粒体复合酶II及复合酶V的影响第64-65页
        3.5 过表达Sirt3后探讨Theacrine对MPP+细胞损伤的保护作用第65-67页
        3.6 RNAi干扰Sirt3后探讨Theacrine对MPP+细胞损伤的保护作用第67-68页
    4 本章小结及讨论第68-70页
第五章 总结与展望第70-73页
    1 实验结论第70-71页
    2 创新之处第71页
    3 课题展望第71-73页
参考文献第73-85页
致谢第85页

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