| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 缩略符号说明 | 第12-14页 |
| 第一章 前言 | 第14-29页 |
| 1.1 基因治疗概述 | 第14-16页 |
| 1.2 基因输送系统 | 第16-19页 |
| 1.2.1 物理导入载体 | 第16-17页 |
| 1.2.2 重组病毒载体 | 第17-18页 |
| 1.2.3 合成非病毒载体 | 第18-19页 |
| 1.2.3.1 阳离子脂质体载体 | 第19页 |
| 1.2.3.2 聚阳离子核酸载体 | 第19页 |
| 1.3 基因输送屏障 | 第19-24页 |
| 1.3.1 体细胞外输送屏障 | 第19-21页 |
| 1.3.1.1 核酸凝聚 | 第20页 |
| 1.3.1.2 血浆稳定 | 第20页 |
| 1.3.1.3 细胞靶向 | 第20-21页 |
| 1.3.2 体细胞内输送屏障 | 第21-24页 |
| 1.3.2.1 内吞逃逸 | 第22-23页 |
| 1.3.2.2 细胞中传输及核内定位 | 第23页 |
| 1.3.2.3 核酸释放 | 第23-24页 |
| 1.4 聚乙烯亚胺构建的聚阳离子的研究进展 | 第24-27页 |
| 1.4.1 接枝可降解PEI | 第25-26页 |
| 1.4.2 交联可降解PEI | 第26-27页 |
| 1.5 本课题的选题思路、研究方案 | 第27-29页 |
| 1.5.1 选题思路 | 第27页 |
| 1.5.2 研究方案 | 第27-29页 |
| 第二章 聚阳离子基因载体的合成、表征及其生物响应性降解的研究 | 第29-40页 |
| 2.1 仪器与材料 | 第29-30页 |
| 2.1.1 仪器 | 第29-30页 |
| 2.1.2 材料 | 第30页 |
| 2.2 聚阳离子基因载体的合成与表征 | 第30-32页 |
| 2.2.1 反应原料咪唑-4,5-二甲醛的合成 | 第30-31页 |
| 2.2.2 聚阳离子PPI的合成 | 第31页 |
| 2.2.3 PPI的表征 | 第31-32页 |
| 2.2.3.1 核磁共振氢谱（1H-NMR） | 第31页 |
| 2.2.3.2 红外光谱（FT-IR） | 第31-32页 |
| 2.2.3.3 体积排阻色谱（SEC） | 第32页 |
| 2.3 结果和讨论 | 第32-39页 |
| 2.3.1 咪唑-4,5-二甲醛的合成及表征 | 第32-34页 |
| 2.3.2 PPI的合成与表征 | 第34-39页 |
| 2.4 本章小结 | 第39-40页 |
| 第三章 聚阳离子基因载体与PDNA复合物的制备与表征 | 第40-50页 |
| 3.1 仪器与材料 | 第40-41页 |
| 3.1.1 仪器 | 第40页 |
| 3.1.2 材料 | 第40-41页 |
| 3.2 PDNA的制备 | 第41-42页 |
| 3.2.1 pDNA的抽提 | 第41页 |
| 3.2.2 pDNA的纯度和浓度测定 | 第41-42页 |
| 3.3 聚阳离子基因载体与PDNA复合物的制备、表征 | 第42-44页 |
| 3.3.1 复合物的制备 | 第42页 |
| 3.3.2 复合物的琼脂糖凝胶电泳 | 第42-43页 |
| 3.3.3 复合物的粒径分析 | 第43页 |
| 3.3.4 复合物的Zeta电位分析 | 第43页 |
| 3.3.5 复合物的原子力显微镜观察 | 第43页 |
| 3.3.6 复合物的透射电镜观察 | 第43-44页 |
| 3.4 结果和讨论 | 第44-49页 |
| 3.4.1 质粒DNA的浓度和纯度 | 第44页 |
| 3.4.2 PPI-p DNA复合物的琼脂糖凝胶电泳 | 第44-45页 |
| 3.4.3 PPI-p DNA复合物的粒径分布 | 第45-46页 |
| 3.4.4 PPI-p DNA复合物的Zeta电位 | 第46-47页 |
| 3.4.5 PPI-p DNA复合物的电镜形态分析 | 第47-49页 |
| 3.5 本章小结 | 第49-50页 |
| 第四章 聚阳离子基因载体与PDNA复合物体外转染活性和细胞毒性 | 第50-62页 |
| 4.1 仪器与材料 | 第50-51页 |
| 4.1.1 仪器 | 第50页 |
| 4.1.2 材料 | 第50-51页 |
| 4.2 聚阳离子基因载体与PDNA复合物的体外转染活性和细胞毒性 | 第51-55页 |
| 4.2.1 细胞培养 | 第51-52页 |
| 4.2.2 细胞转板 | 第52-53页 |
| 4.2.3 体外细胞转染 | 第53-54页 |
| 4.2.4 细胞摄取 | 第54页 |
| 4.2.5 细胞毒性 | 第54-55页 |
| 4.3 结果和讨论 | 第55-61页 |
| 4.3.1 PPI-pDNA复合物的体外转染活性和检测 | 第55-59页 |
| 4.3.2 细胞摄取 | 第59页 |
| 4.3.3 PPI的细胞毒性 | 第59-61页 |
| 4.4 本章小结 | 第61-62页 |
| 第五章 聚阳离子基因载体与SIRNA复合物的制备和初步表征、活性测试 | 第62-69页 |
| 5.1 仪器和材料 | 第62-63页 |
| 5.1.1 仪器 | 第62页 |
| 5.1.2 材料 | 第62-63页 |
| 5.2 聚阳离子基因载体与SIRNA复合物的制备 | 第63页 |
| 5.3 聚阳离子基因载体与SIRNA复合物的表征 | 第63-64页 |
| 5.3.1 复合物的琼脂糖凝胶电泳 | 第63-64页 |
| 5.4 聚阳离子基因载体与SIRNA复合物的基因沉默活性 | 第64-65页 |
| 5.4.1 细胞培养 | 第64页 |
| 5.4.2 细胞直接转染 | 第64-65页 |
| 5.5 结果和讨论 | 第65-68页 |
| 5.5.1 PPI-siRNA复合物的琼脂糖凝胶电泳 | 第65-66页 |
| 5.5.2 PPI-siRNA复合物的体外基因沉默活性 | 第66-68页 |
| 5.6 本章小结 | 第68-69页 |
| 第六章 研究总结、存在问题和展望 | 第69-71页 |
| 6.1 全文总结 | 第69-70页 |
| 6.2 存在问题和展望 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 攻读硕士学位期间参与的科研项目 | 第75-76页 |
| 攻读硕士学位期间发表及录用的论文和专利 | 第76页 |
