| 致谢 | 第4-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| 常用缩略词 | 第10-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-24页 |
| 1.1 新城疫病毒的概述 | 第11-14页 |
| 1.1.1 NDV形态特征与理化特性 | 第11页 |
| 1.1.2 基因组特性 | 第11-12页 |
| 1.1.3 NDV的致病性 | 第12-13页 |
| 1.1.4 ND的流行病学 | 第13-14页 |
| 1.2 新城疫检测方法的研究 | 第14-16页 |
| 1.2.1 临床症状和病理变化检测 | 第14页 |
| 1.2.2 血清学诊断 | 第14-15页 |
| 1.2.3 分子生物学诊断 | 第15-16页 |
| 1.3 HN蛋白的研究进展 | 第16-19页 |
| 1.3.1 HN蛋白的结构 | 第16-17页 |
| 1.3.2 HN蛋白的功能 | 第17-18页 |
| 1.3.3 HN蛋白的应用 | 第18-19页 |
| 1.4 融合标签 | 第19-24页 |
| 1.4.1 融合标签技术 | 第19-20页 |
| 1.4.2 融合标签的特点 | 第20-21页 |
| 1.4.3 载体上的标签 | 第21-24页 |
| 1.4.3.1 His标签 | 第21页 |
| 1.4.3.2 Grifin标签 | 第21页 |
| 1.4.3.3 GST标签 | 第21页 |
| 1.4.3.4 MBP标签 | 第21-22页 |
| 1.4.3.5 NusA标签 | 第22页 |
| 1.4.3.6 SUMO标签 | 第22-23页 |
| 1.4.3.7 Thioredoxin标签 | 第23页 |
| 1.4.3.8 proteinG标签 | 第23页 |
| 1.4.3.9 γ-crystallin标签 | 第23页 |
| 1.4.3.10 ArsC标签 | 第23页 |
| 1.4.3.11 PpiB标签 | 第23-24页 |
| 2 材料 | 第24-28页 |
| 2.1 质粒和菌株 | 第24页 |
| 2.2 实验动物 | 第24页 |
| 2.3 主要仪器 | 第24页 |
| 2.4 主要试剂 | 第24页 |
| 2.5 常规溶液的配制 | 第24-28页 |
| 3 方法 | 第28-35页 |
| 3.1 目的基因和引物的合成 | 第28页 |
| 3.2 重组表达载体的构建 | 第28-31页 |
| 3.2.1 标签载体的构建 | 第28-29页 |
| 3.2.2 大肠杆菌DH5α和BL21感受态细胞的制备（CaCl_2法） | 第29-30页 |
| 3.2.3 重组质粒的转化 | 第30页 |
| 3.2.4 重组表达载体的构建 | 第30-31页 |
| 3.3 重组质粒的鉴定 | 第31-32页 |
| 3.3.1 菌液PCR鉴定 | 第31页 |
| 3.3.2 双酶切鉴定 | 第31-32页 |
| 3.4 序列测定 | 第32页 |
| 3.5 重组HN蛋白诱导条件的优化 | 第32-33页 |
| 3.5.1 最佳IPTG诱导浓度的确定 | 第32页 |
| 3.5.2 最佳诱导温度的确定 | 第32页 |
| 3.5.3 最佳Amp浓度的确定 | 第32页 |
| 3.5.4 最佳诱导时间的确定 | 第32-33页 |
| 3.5.5 最佳培养基的确定 | 第33页 |
| 3.6 重组HN蛋白表达量的鉴定 | 第33-34页 |
| 3.7 重组HN蛋白的纯化 | 第34页 |
| 3.8 重组HN蛋白形态学分析 | 第34页 |
| 3.9 重组HN蛋白的免疫活性检测 | 第34-35页 |
| 3.9.1 Western blot检测 | 第34-35页 |
| 3.9.2 间接ELISA检测 | 第35页 |
| 4 结果与分析 | 第35-41页 |
| 4.1 重组表达载体的构建 | 第35-36页 |
| 4.1.1 标签质粒和pET 21b的双酶 | 第35-36页 |
| 4.1.2 目的基因与pET的双酶切 | 第36页 |
| 4.2 重组质粒的鉴定 | 第36-37页 |
| 4.2.1 菌液PCR鉴定 | 第36页 |
| 4.2.2 双酶切鉴定 | 第36-37页 |
| 4.3 重组HN蛋白诱导条件的优化 | 第37-38页 |
| 4.4 重组HN蛋白表达量的鉴定 | 第38-39页 |
| 4.5 重组HN蛋白的纯化 | 第39页 |
| 4.6 重组HN蛋白形态学分析 | 第39-40页 |
| 4.7 重组HN蛋白免疫活性检测 | 第40-41页 |
| 4.7.1 Western blot检测 | 第40页 |
| 4.7.2 间接ELISA检测 | 第40-41页 |
| 5 讨论 | 第41-42页 |
| 全文总结 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-52页 |
| Abstract | 第52-54页 |