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PRV感染Neuro-2a细胞中部分病毒基因组染色质状态与病毒增殖的相关性研究

英文缩写词表第7-8页
摘要第8-10页
文献综述第10-18页
    1 PRV历史背景第10页
    2 疱疹病毒分类第10-11页
    3 PRV病原学研究进展第11-14页
        3.1 PRV粒子结构第11-12页
        3.2 PRV复制周期第12-13页
        3.3 立即早期基因IE180第13页
        3.4 TK基因第13-14页
        3.5 gE基因第14页
    4 疱疹病毒染色质表观遗传学的研究进展第14-16页
        4.1 染色质、核小体和组蛋白第14-15页
        4.2 疱疹病毒DNA与核心组蛋白H3互作的研究现状第15-16页
    5 CHIP-qPCR第16页
    6 本研究的目的与意义第16-18页
试验一 伪狂犬病病毒gE基因SYBR Green I实时荧光定量PCR检测方法的建立第18-24页
    1 材料第18-19页
        1.1 病毒株第18页
        1.2 主要试剂第18页
        1.3 主要仪器第18-19页
    2 方法第19-20页
        2.1 标准品的制备第19页
        2.2 标准曲线的建立第19-20页
        2.3 特异性、敏感性、重复性试验第20页
    3 结果第20-22页
        3.1 阳性标准品的制备第20页
        3.2 qPCR反应条件的优化第20页
        3.3 标准曲线的建立第20-21页
        3.4 特异性、敏感性、重复性试验第21-22页
    4 讨论第22-24页
试验二 与组蛋白H3结合的鼠管家基因CHIP-qPCR方法的建立第24-30页
    1 材料第24-25页
        1.1 细胞第24页
        1.2 主要试剂第24页
        1.3 主要仪器第24-25页
    2 方法第25-27页
        2.1 Neuro-2a细胞染色质的甲醛交联固定第25页
        2.2 核裂解与染色质的超声打断第25页
        2.3 免疫共沉淀第25-26页
        2.4 DNA富集与纯化第26页
        2.5 DNA样品鼠GAPDH靶基因的qPCR检测第26-27页
    3 结果第27-29页
        3.1 染色质免疫共沉淀技术超声波破碎条件的确定第27页
        3.2 western blotting检测组蛋白H3抗体与组蛋白H3结合的特异性第27-28页
        3.3 鼠GAPDH普通PCR检测第28页
        3.4 鼠GAPDH qPCR方法的建立第28-29页
        3.5 鼠GAPDH靶基因的CHIP-qPCR检测第29页
    4 讨论第29-30页
试验三 利用CHIP-qPCR研究宿主组蛋白H3结合的PRV部分DNA序列与病毒增殖动态的关系第30-38页
    1 材料第31页
        1.1 病毒和细胞株第31页
        1.2 主要试剂和仪器第31页
    2 方法第31-32页
        2.1 引物设计与合成第31页
        2.2 PRV相关基因的扩增与克隆第31-32页
        2.3 PRV相关基因qPCR方法的建立第32页
        2.4 0.1 MOI PRV在Neuro-2a细胞内的增殖动态第32页
        2.5 染色质免疫共沉淀第32页
    3 结果第32-36页
        3.1 PRV相关基因的PCR扩增第32-33页
        3.2 PRV相关基因qPCR的建立第33-35页
        3.3 PRV在Neuro-2a细胞内的增殖动态第35-36页
        3.4 感染细胞时PRV部分基因组染色质状态的确定第36页
    4 讨论第36-38页
全文总结第38-39页
参考文献第39-48页
在读期间发表的文章第48-49页
ABSTRACT第49-51页

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