英文缩写词表 | 第7-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
文献综述 | 第10-18页 |
1 PRV历史背景 | 第10页 |
2 疱疹病毒分类 | 第10-11页 |
3 PRV病原学研究进展 | 第11-14页 |
3.1 PRV粒子结构 | 第11-12页 |
3.2 PRV复制周期 | 第12-13页 |
3.3 立即早期基因IE180 | 第13页 |
3.4 TK基因 | 第13-14页 |
3.5 gE基因 | 第14页 |
4 疱疹病毒染色质表观遗传学的研究进展 | 第14-16页 |
4.1 染色质、核小体和组蛋白 | 第14-15页 |
4.2 疱疹病毒DNA与核心组蛋白H3互作的研究现状 | 第15-16页 |
5 CHIP-qPCR | 第16页 |
6 本研究的目的与意义 | 第16-18页 |
试验一 伪狂犬病病毒gE基因SYBR Green I实时荧光定量PCR检测方法的建立 | 第18-24页 |
1 材料 | 第18-19页 |
1.1 病毒株 | 第18页 |
1.2 主要试剂 | 第18页 |
1.3 主要仪器 | 第18-19页 |
2 方法 | 第19-20页 |
2.1 标准品的制备 | 第19页 |
2.2 标准曲线的建立 | 第19-20页 |
2.3 特异性、敏感性、重复性试验 | 第20页 |
3 结果 | 第20-22页 |
3.1 阳性标准品的制备 | 第20页 |
3.2 qPCR反应条件的优化 | 第20页 |
3.3 标准曲线的建立 | 第20-21页 |
3.4 特异性、敏感性、重复性试验 | 第21-22页 |
4 讨论 | 第22-24页 |
试验二 与组蛋白H3结合的鼠管家基因CHIP-qPCR方法的建立 | 第24-30页 |
1 材料 | 第24-25页 |
1.1 细胞 | 第24页 |
1.2 主要试剂 | 第24页 |
1.3 主要仪器 | 第24-25页 |
2 方法 | 第25-27页 |
2.1 Neuro-2a细胞染色质的甲醛交联固定 | 第25页 |
2.2 核裂解与染色质的超声打断 | 第25页 |
2.3 免疫共沉淀 | 第25-26页 |
2.4 DNA富集与纯化 | 第26页 |
2.5 DNA样品鼠GAPDH靶基因的qPCR检测 | 第26-27页 |
3 结果 | 第27-29页 |
3.1 染色质免疫共沉淀技术超声波破碎条件的确定 | 第27页 |
3.2 western blotting检测组蛋白H3抗体与组蛋白H3结合的特异性 | 第27-28页 |
3.3 鼠GAPDH普通PCR检测 | 第28页 |
3.4 鼠GAPDH qPCR方法的建立 | 第28-29页 |
3.5 鼠GAPDH靶基因的CHIP-qPCR检测 | 第29页 |
4 讨论 | 第29-30页 |
试验三 利用CHIP-qPCR研究宿主组蛋白H3结合的PRV部分DNA序列与病毒增殖动态的关系 | 第30-38页 |
1 材料 | 第31页 |
1.1 病毒和细胞株 | 第31页 |
1.2 主要试剂和仪器 | 第31页 |
2 方法 | 第31-32页 |
2.1 引物设计与合成 | 第31页 |
2.2 PRV相关基因的扩增与克隆 | 第31-32页 |
2.3 PRV相关基因qPCR方法的建立 | 第32页 |
2.4 0.1 MOI PRV在Neuro-2a细胞内的增殖动态 | 第32页 |
2.5 染色质免疫共沉淀 | 第32页 |
3 结果 | 第32-36页 |
3.1 PRV相关基因的PCR扩增 | 第32-33页 |
3.2 PRV相关基因qPCR的建立 | 第33-35页 |
3.3 PRV在Neuro-2a细胞内的增殖动态 | 第35-36页 |
3.4 感染细胞时PRV部分基因组染色质状态的确定 | 第36页 |
4 讨论 | 第36-38页 |
全文总结 | 第38-39页 |
参考文献 | 第39-48页 |
在读期间发表的文章 | 第48-49页 |
ABSTRACT | 第49-51页 |