| Abstract | 第2-3页 |
| 摘要 | 第4-8页 |
| List of Abbreviations | 第8-10页 |
| 1 Introduction | 第10-19页 |
| 1.1 Transgenic Rice | 第10-12页 |
| 1.1.1 Rice Transformation | 第11-12页 |
| 1.2 The history of Heterotrimeric G-Proteins | 第12-16页 |
| 1.2.1 What are Heterotrimeric G-protein subunits? | 第12-14页 |
| 1.2.2. Heterotrimeric G-protein subunits review | 第14-16页 |
| 1.3 CRISPR/Cas9 system | 第16-19页 |
| 1.3.1. CRISPR/Cas9 System | 第16-17页 |
| 1.3.2. Advantage of using CRISPR/Cas9 system | 第17-19页 |
| 2 Materials and Methods | 第19-35页 |
| 2.1 Materials | 第19-21页 |
| 2.1.1 Plant material | 第19页 |
| 2.1.2 Strains and vectors | 第19页 |
| 2.1.3 Experimental reagent | 第19页 |
| 2.1.4 Medium and hormone formulation | 第19-21页 |
| 2.1.5 Common molecular biology laboratory equipments | 第21页 |
| 2.2 Methods | 第21-30页 |
| 2.2.1 Bioinformatics analysis | 第21-22页 |
| 2.2.2 Vector construction | 第22-26页 |
| 2.2.2.1 RGG1 and RGG2 overexpressed vector construction | 第22-23页 |
| 2.2.2.2 rgg1 and rgg2- CRISPR/Cas9 mutant vector construction | 第23-24页 |
| 2.2.2.3 Vector construction protocol | 第24-26页 |
| 2.2.3 Agrobacterium Transformation procedure | 第26-28页 |
| 2.2.3.1. Agrobacterium mediated transformation shock(electroporation) | 第26页 |
| 2.2.3.2. To check the right Agrobacterium colony and save the strain | 第26-27页 |
| 2.2.3.3. Plasmid extraction protocol(TIANprep Mini Plasmid Kit) | 第27页 |
| 2.2.3.4. Heat-shock transformation protocol | 第27-28页 |
| 2.2.3.5. Enzyme cleavage protocol | 第28页 |
| 2.2.4 Tissue culture | 第28-29页 |
| 2.2.4.1 Seed sterilization and cultivation | 第28页 |
| 2.2.4.2 Agrobacterium infection | 第28-29页 |
| 2.2.4.3 Selection and Regeneration of transformats | 第29页 |
| 2.2.5 DNA isolation and PCR to confirm rggl and rgg2 mutants | 第29-30页 |
| 2.3 Gene function and analysis of the phenotype | 第30-35页 |
| 2.3.1 Plant material, seed germination assay and potassium treatment | 第30-31页 |
| 2.3.2 Gene expression analysis | 第31-35页 |
| 2.3.2.1 RNA extraction protocol | 第31-32页 |
| 2.3.2.2 Reverse transcription | 第32-33页 |
| 2.3.2.3 RT-PCR | 第33页 |
| 2.3.2.4 RT-PCR | 第33-35页 |
| 3 Results | 第35-44页 |
| 3.1 Rice Transformation | 第35-38页 |
| 3.1.1 Confirmation of RGG2 overexpressed | 第36页 |
| 3.1.2 Confirmation of rggl and rgg2 mutants | 第36-37页 |
| 3.1.3 The sequence test of transgenic plants for rgg1 and rgg2 mutants | 第37-38页 |
| 3.2 Phenotype analysis of rgg1 mutants and RGG2(OE) lines | 第38-41页 |
| 3.3 Potassium treatment analysis | 第41-42页 |
| 3.3.1 Phenotype of K+treatment | 第41页 |
| 3.3.2 Expression level of genes related to potassium | 第41-42页 |
| 3.4 Different level of trace elements | 第42-44页 |
| 4 Discussion | 第44-47页 |
| 5 References | 第47-60页 |
| 6 Appendix | 第60-65页 |
| Acknowledgement | 第65-66页 |
