摘要 | 第8-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
英文缩写词 | 第11-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-25页 |
1 应激研究进展 | 第13-16页 |
1.1 应激的简介 | 第13页 |
1.2 应激的免疫反应 | 第13-14页 |
1.3 应激的调节机制 | 第14-15页 |
1.4 应激的营养代谢模式 | 第15-16页 |
2 LPS应激模型简介 | 第16-20页 |
2.1 LPS免疫活性 | 第16-17页 |
2.2 LPS相关动物模型 | 第17-20页 |
2.2.1 LPS诱导炎症模型 | 第18-19页 |
2.2.1.1 炎症模型中促炎性细胞因子表达特征 | 第18-19页 |
2.2.1.2 炎症模型中促炎性细胞因子调节机制 | 第19页 |
2.2.2 LPS感染性休克模型 | 第19-20页 |
2.3 仔猪构建应激模型的优势 | 第20页 |
3 细胞增殖与凋亡 | 第20-23页 |
3.1 Skp2与细胞周期 | 第21页 |
3.2 Skp2与细胞凋亡 | 第21-22页 |
3.3 Caspase-3 与细胞凋亡 | 第22页 |
3.4 细胞凋亡检测技术 | 第22-23页 |
4 研究目的与意义 | 第23-25页 |
第二章 LPS诱导断奶仔猪应激模型的临床症状、脾脏指数及血常规研究 | 第25-31页 |
1 材料与方法 | 第25-26页 |
1.1 试验动物及模型设计 | 第25页 |
1.2 主要试剂 | 第25页 |
1.3 试验仪器 | 第25页 |
1.4 样品采集及指标测定 | 第25-26页 |
1.5 数据统计分析 | 第26页 |
2 结果 | 第26-29页 |
2.1 临床症状 | 第26-27页 |
2.2 脾脏指数 | 第27页 |
2.3 血常规指标 | 第27-29页 |
3 讨论 | 第29-31页 |
3.1 LPS诱导断奶仔猪临床症状 | 第29页 |
3.2 LPS促进断奶仔猪脾脏增殖 | 第29-30页 |
3.3 LPS改变断奶仔猪血细胞平衡 | 第30-31页 |
第三章 LPS诱导断奶仔猪应激模型脾脏形态结构研究 | 第31-38页 |
1 材料与方法 | 第31-33页 |
1.1 试验动物及模型设计 | 第31页 |
1.2 主要试剂 | 第31页 |
1.3 试验仪器 | 第31页 |
1.4 试验方法 | 第31-32页 |
1.4.1 脾脏观察及采集 | 第31-32页 |
1.4.2 切片制作 | 第32页 |
1.4.3 HE染色 | 第32页 |
1.5 脾脏组织形态 | 第32页 |
1.6 数据统计处理 | 第32-33页 |
2 结果 | 第33-36页 |
2.1 脾脏解剖形态变化 | 第33-34页 |
2.2 脾脏组织形态变化 | 第34-36页 |
3 讨论 | 第36-38页 |
第四章 LPS诱导断奶仔猪应激模型IL-1β、IL-6、TNF-α 表达分布研究 | 第38-46页 |
1 材料与方法 | 第38-40页 |
1.1 试验动物 | 第38页 |
1.2 试验试剂 | 第38页 |
1.3 仪器设备 | 第38页 |
1.4 试验方法 | 第38-39页 |
1.4.1 血样收集分离 | 第38页 |
1.4.2 脾脏采集 | 第38-39页 |
1.4.3 切片制作 | 第39页 |
1.4.4 免疫组化染色 | 第39页 |
1.5 OD值检测 | 第39页 |
1.6 Elisa法 | 第39页 |
1.7 数据统计分析 | 第39-40页 |
2 试验结果 | 第40-44页 |
2.1 血清IL-1β、IL-6、TNF-α 浓度 | 第40页 |
2.2 脾脏IL-1β 分布表达 | 第40-42页 |
2.3 脾脏IL-6 分布表达 | 第42-43页 |
2.4 脾脏TNF-α 分布表达 | 第43-44页 |
3 讨论 | 第44-46页 |
第五章 LPS诱导断奶仔猪应激模型脾脏Skp2与P27~(Kip1)关联性表达研究 | 第46-54页 |
1 试验材料与仪器 | 第46页 |
1.1 试验动物 | 第46页 |
1.2 主要试剂 | 第46页 |
2 试验方法 | 第46-48页 |
2.1 样品采集 | 第46页 |
2.2 切片制作 | 第46页 |
2.3 免疫组织化学技术 | 第46页 |
2.4 Skp2、P27~(Kip1)蛋白光密度测定 | 第46-47页 |
2.5 RNA提取及检测 | 第47页 |
2.6 RNA反转录 | 第47页 |
2.7 目的基因引物设计合成 | 第47-48页 |
2.8 荧光定量PCR | 第48页 |
2.9 统计分析 | 第48页 |
3 试验结果 | 第48-52页 |
3.1 脾脏Skp2分布表达 | 第48-49页 |
3.2 脾脏P27~(Kip1)分布表达 | 第49-50页 |
3.3 Skp2与P27~(Kip1)相关性 | 第50-51页 |
3.4 Skp2和P27~(Kip1)基因表达 | 第51-52页 |
3.4.1 总RNA完整性检测 | 第51-52页 |
3.4.2 Skp2与P27~(Kip1)基因相对表达量 | 第52页 |
4 讨论 | 第52-54页 |
4.1 LPS诱导脾脏淋巴细胞增殖 | 第52-53页 |
4.2 Skp2与P27~(Kip1)相关性分析 | 第53-54页 |
第六章 LPS诱导断奶仔猪应激模型脾脏淋巴细胞凋亡研究 | 第54-60页 |
1 试验材料与仪器 | 第54页 |
1.1 试验动物及模型设计 | 第54页 |
1.2 主要试剂 | 第54页 |
1.3 仪器设备 | 第54页 |
2 试验方法 | 第54-55页 |
2.1 样品采集 | 第54页 |
2.2 切片制作 | 第54页 |
2.3 免疫组织化学技术 | 第54页 |
2.4 TUNEL-POD染色 | 第54-55页 |
2.5 Caspase-3 和凋亡细胞OD值测定 | 第55页 |
2.6 透射电镜技术 | 第55页 |
2.7 统计分析 | 第55页 |
3 结果 | 第55-58页 |
3.1 脾脏Caspase-3 分布表达 | 第55-56页 |
3.2 脾脏凋亡细胞分布表达 | 第56-57页 |
3.3 脾脏凋亡细胞的超微结构 | 第57-58页 |
4 讨论 | 第58-60页 |
第七章 结论与展望 | 第60-61页 |
1 试验结论 | 第60页 |
2 研究的不足与展望 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-70页 |
致谢 | 第70页 |