| 中文摘要 | 第10-16页 |
| 英文摘要 | 第16-23页 |
| 英文缩略表 | 第24-25页 |
| 前言 | 第25-30页 |
| 技术路线图 | 第30-31页 |
| 第一章 PEG-多西紫杉醇白蛋白纳米粒的制备及鉴定 | 第31-44页 |
| 1.1 材料和方法 | 第31-36页 |
| 1.1.1 材料 | 第31-32页 |
| 1.1.1.1 实验材料 | 第31-32页 |
| 1.1.1.2 主要设备 | 第32页 |
| 1.1.2 方法 | 第32-36页 |
| 1.1.2.1 mPEG-HSA的制备及检测 | 第32页 |
| 1.1.2.2 乳化挥发交联法合成PEG-DANPs | 第32页 |
| 1.1.2.3 白蛋白纳米粒处方工艺的优化试验 | 第32-33页 |
| 1.1.2.4 动态光散射法测定白蛋白纳米颗粒的粒径和zeta表征 | 第33-34页 |
| 1.1.2.5 超速离心法测定载药量和包封率 | 第34页 |
| 1.1.2.6 高效液相色谱法(HPLC)药物含量测定 | 第34-35页 |
| 1.1.2.7 透射电子显微镜观察聚合物胶束 | 第35页 |
| 1.1.2.8 体外药物释放实验 | 第35-36页 |
| 1.2 结果 | 第36-41页 |
| 1.2.1 PEG-HSA制备后SDS-PAGE电泳分析 | 第36-38页 |
| 1.2.4 白蛋白纳米粒处方工艺优化结果 | 第38-39页 |
| 1.2.5 PEG-DANPs的表征 | 第39-40页 |
| 1.2.6 超速离心法白蛋白纳米粒载药量和包封率的测定 | 第40页 |
| 1.2.7 体外释放实验 | 第40-41页 |
| 1.3 讨论 | 第41-43页 |
| 1.4 本章小结 | 第43-44页 |
| 第二章 PEG-多西紫杉醇白蛋白纳米粒抑制4T1小鼠乳腺癌细胞增殖和诱导凋亡的研究 | 第44-56页 |
| 2.1 材料和方法 | 第44-49页 |
| 2.1.1 实验材料与仪器 | 第44-45页 |
| 2.1.1.1 实验材料 | 第44-45页 |
| 2.1.1.2 实验仪器 | 第45页 |
| 2.1.2 细胞培养 | 第45-46页 |
| 2.1.2.1 4T1细胞复苏 | 第45页 |
| 2.1.2.2 4T1细胞培养 | 第45页 |
| 2.1.2.3 4T1细胞传代 | 第45-46页 |
| 2.1.2.4 4T1细胞冻存 | 第46页 |
| 2.1.3 抑制4T1肿瘤细胞增殖实验(MTT法) | 第46-47页 |
| 2.1.3.1 噻唑蓝(MTT)溶液配置 | 第46页 |
| 2.1.3.2 4T1细胞铺板 | 第46页 |
| 2.1.3.3 加药干预 | 第46页 |
| 2.1.3.4 MTT法显色 | 第46-47页 |
| 2.1.3.5 酶标法测定各孔OD值 | 第47页 |
| 2.1.4 4T1肿瘤细胞爬片苏木素-伊红(HE)染色观察 | 第47页 |
| 2.1.4.1 盖玻片制作 | 第47页 |
| 2.1.4.2 4T1细胞铺板 | 第47页 |
| 2.1.4.3 含药培养基干预 | 第47页 |
| 2.1.4.4 细胞爬片HE染色 | 第47页 |
| 2.1.4.5 倒置显微镜下观察 | 第47页 |
| 2.1.5 荧光显微镜观察4T1肿瘤细胞凋亡 | 第47-48页 |
| 2.1.5.1 4T1细胞铺板 | 第47-48页 |
| 2.1.5.2 含药培养基干预 | 第48页 |
| 2.1.5.3 荧光染色及观察 | 第48页 |
| 2.1.6 流式细胞仪检测胶束化药物对4T1肿瘤细胞凋亡的影响 | 第48页 |
| 2.1.6.1 实验分组 | 第48页 |
| 2.1.6.2 含药培养基干预 | 第48页 |
| 2.1.6.3 流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第48页 |
| 2.1.6.4 分析细胞直方图 | 第48页 |
| 2.1.7 流式细胞仪检测药物对4T1肿瘤细胞增殖周期的影响 | 第48-49页 |
| 2.1.7.1 实验分组 | 第48-49页 |
| 2.1.7.2 含药培养基干预 | 第49页 |
| 2.1.7.3 流式细胞仪检测细胞周期DNA含量 | 第49页 |
| 2.1.8 统计学方法 | 第49页 |
| 2.2 结果 | 第49-55页 |
| 2.2.1 4T1肿瘤细胞的增殖特性 | 第49页 |
| 2.2.2 抑制细胞增殖实验结果(MTT法) | 第49-50页 |
| 2.2.3 4T1肿瘤细胞爬片苏木素-伊红(HE)染色观察结果 | 第50-52页 |
| 2.2.4 流式细胞仪检测各组药物对4T1肿瘤细胞凋亡的影响 | 第52-53页 |
| 2.2.5 荧光显微镜观察4T1肿瘤细胞的凋亡 | 第53-54页 |
| 2.2.6 流式细胞仪检测各组药物对4T1肿瘤细胞增殖周期的影响 | 第54-55页 |
| 2.3 讨论 | 第55页 |
| 2.4 本章小结 | 第55-56页 |
| 第三章 PEG-多西紫杉醇白蛋白纳米粒抗4T1小鼠乳腺癌细胞侵袭和转移的研究 | 第56-68页 |
| 3.1 材料和方法 | 第56-61页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第56-57页 |
| 3.1.1.1 实验材料 | 第56页 |
| 3.1.1.2 实验仪器 | 第56-57页 |
| 3.1.2 体外损伤愈合实验 | 第57页 |
| 3.1.2.1 原理 | 第57页 |
| 3.1.2.2 实验分组 | 第57页 |
| 3.1.2.3 包被基底膜 | 第57页 |
| 3.1.2.4 水化基底膜 | 第57页 |
| 3.1.2.5 划痕损伤 | 第57页 |
| 3.1.2.6 测量细胞迁移数量及速率 | 第57页 |
| 3.1.3 4T1肿瘤细胞侵袭实验(Transwell法) | 第57-58页 |
| 3.1.3.1 原理 | 第57-58页 |
| 3.1.3.2 实验分组 | 第58页 |
| 3.1.3.3 Transwell上室种入肿瘤细胞 | 第58页 |
| 3.1.3.4 穿膜细胞计数 | 第58页 |
| 3.1.4 荧光定量RT-PCR法检测4T1肿瘤细胞VEGF、MMP-9、C-met的mRNA表达 | 第58-60页 |
| 3.1.4.1 实验分组 | 第58页 |
| 3.1.4.2 含药培养基干预 | 第58页 |
| 3.1.4.3 引物设计 | 第58-59页 |
| 3.1.4.4 RNA提取 | 第59-60页 |
| 3.1.5 统计学方法 | 第60-61页 |
| 3.2 结果 | 第61-66页 |
| 3.2.1 体外损伤愈合实验结果 | 第61-62页 |
| 3.2.2 肿瘤细胞侵袭实验(Transwell法) | 第62-63页 |
| 3.2.3 4T1细胞中mRNA提取及引物测定 | 第63-64页 |
| 3.2.4 RT-PCR法测定4T1细胞中VEGF、MMP-9、C-met的表达 | 第64-66页 |
| 3.3 讨论 | 第66-67页 |
| 3.4 本章小结 | 第67-68页 |
| 第四章 活体生物发光成像法对侵袭性乳腺癌模型的观察 | 第68-75页 |
| 4.1 材料和方法 | 第68-70页 |
| 4.1.1 实验材料和仪器 | 第68页 |
| 4.1.2 实验方法 | 第68-70页 |
| 4.1.2.1 细胞培养 | 第68-69页 |
| 4.1.2.2 细胞悬液制备 | 第69页 |
| 4.1.2.3 乳腺癌自发转移模型制备及活体生物发光法检测 | 第69页 |
| 4.1.2.4 乳腺癌自发转移模型生物发光检测 | 第69-70页 |
| 4.1.2.5 生物发光模型检验及药物体内抗肿瘤疗效评价 | 第70页 |
| 4.1.3 统计学方法 | 第70页 |
| 4.2 结果 | 第70-72页 |
| 4.2.1 动物一般状态变化 | 第70页 |
| 4.2.2 三种不同细胞浓度接种动物制作乳腺癌自发转移模型 | 第70-72页 |
| 4.2.2.1 荧光强度和出瘤时间观察 | 第70页 |
| 4.2.2.2 活体生物发光法乳腺癌自发转移模型转移灶观察 | 第70-71页 |
| 4.2.2.3 生物发光模型检验及药物体内抗肿瘤疗效评价 | 第71-72页 |
| 4.3 讨论 | 第72-74页 |
| 4.4 本章小结 | 第74-75页 |
| 第五章 PEG-多西紫杉醇白蛋白纳米粒抗4T1小鼠乳腺癌转移作用的研究 | 第75-81页 |
| 5.1 材料和方法 | 第75-76页 |
| 5.1.1 实验材料和仪器 | 第75页 |
| 5.1.2 实验方法 | 第75-76页 |
| 5.1.2.1 细胞培养和细胞悬液制备 | 第75页 |
| 5.1.2.2 动物分组及模型制作 | 第75-76页 |
| 5.1.2.3 荧光素酶标记乳腺癌动物模型活体成像检测 | 第76页 |
| 5.1.2.4 乳腺癌肿物生长及肺转移癌的检测 | 第76页 |
| 5.2 结果 | 第76-79页 |
| 5.2.1 生物发光动态观察4T1乳腺癌移植瘤的生长 | 第76-77页 |
| 5.2.2 4T1乳腺癌移植瘤模型中肺转移观察 | 第77-78页 |
| 5.2.3 小鼠生存率观察 | 第78-79页 |
| 5.3 讨论 | 第79-80页 |
| 5.4 本章小结 | 第80-81页 |
| 第六章 结论及展望 | 第81-84页 |
| 6.1 主要结论 | 第81页 |
| 6.2 展望 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
| 文献综述 | 第85-117页 |
| 参考文献 | 第111-117页 |
| 附录 在读博士期间发表的论文及成果 | 第117页 |
