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植物乳杆菌LP69胞壁蛋白酶的制备及其应用研究

摘要第5-7页
ABSTRACT第7-9页
1 前言第13-18页
    1.1 植物乳杆菌第13页
    1.2 胞壁蛋白酶(CEP)第13-16页
        1.2.1 益生菌CEP研究进展第13-15页
        1.2.2 乳杆菌CEP的生化特性第15-16页
        1.2.3 乳杆菌CEP的提取和纯化第16页
        1.2.4 CEP在奶制品中的应用第16页
    1.3 胞壁蛋白酶提取方法第16-17页
        1.3.1 Ca~(2+)-free提取法第16-17页
        1.3.2 溶菌酶提取法第17页
        1.3.3 超声波破碎法第17页
    1.4 目的意义及研究内容第17-18页
2 材料与方法第18-27页
    2.1 材料第18-20页
        2.1.1 菌株第18页
        2.1.2 主要试剂第18-19页
        2.1.3 仪器及设备第19-20页
    2.2 技术路线及实验方法第20-23页
        2.2.1 技术路线第20页
        2.2.2 植物乳杆菌LP69的活化及培养第20页
        2.2.3 植物乳杆菌LP69菌体制备第20-21页
        2.2.4 胞壁蛋白酶(CEP)提取第21页
        2.2.5 培养基优化第21页
        2.2.6 培养条件优化第21-22页
        2.2.7 胞壁蛋白酶(CEP)提取条件优化第22页
        2.2.8 胞壁蛋白酶(CEP)酶学性质研究第22页
        2.2.9 功能性羊乳饮品制备第22-23页
    2.3 分析检测方法第23-27页
        2.3.1 pH及植物乳杆菌LP69生长测定第23页
        2.3.2 蛋白质及酪氨酸标准曲线绘制第23页
        2.3.3 酶活力测定第23页
        2.3.4 蛋白含量及比活力测定第23页
        2.3.5 ACE抑制率测定第23-24页
        2.3.6 抗氧化性测定第24-25页
        2.3.7 蛋白质水解度测定第25页
        2.3.8 功能性羊乳饮品苦味评定第25-26页
        2.3.9 功能性羊乳饮品稳定性第26-27页
3 结果与讨论第27-87页
    3.1 植物乳杆菌LP69产胞壁蛋白酶培养基优化第27-51页
        3.1.1 牛血清蛋白及酪氨酸标准曲线的建立第27页
        3.1.2 碳源对植物乳杆菌LP69蛋白酶的影响第27-29页
        3.1.3 氮源对植物乳杆菌LP69产蛋白酶的分析第29-30页
        3.1.4 益生元对产胞壁蛋白酶的促进效果第30-31页
        3.1.5 无机盐对胞壁蛋白酶的影响分析第31-33页
        3.1.6 氨基酸对产胞壁蛋白酶的效果分析第33-34页
        3.1.7 植物乳杆菌LP69产CEP培养基主要成分的筛选第34-39页
        3.1.8 最陡爬坡试验与结果分析第39-40页
        3.1.9 植物乳杆菌LP69产CEP培养基成分的响应面优化第40-51页
    3.2 植物乳杆菌LP69产蛋白酶发酵条件的优化第51-55页
        3.2.1 发酵时间对植物乳杆菌LP69产CEP的影响第51页
        3.2.2 发酵温度对产胞壁蛋白酶的影响分析第51-52页
        3.2.3 初始pH对产胞壁蛋白酶的影响第52-53页
        3.2.4 接种量对植物乳杆菌LP69产CEP的影响第53页
        3.2.5 正交设计优化CEP发酵条件第53-55页
    3.3 Ca~(2+)-free法提取胞壁蛋白酶的条件优化第55-65页
        3.3.1 单因素试验选取最佳CEP提取条件第55-56页
        3.3.2 析因试验筛选影响胞壁蛋白酶提取的主要因素第56-60页
        3.3.3 CEP提取条件的响应面优化第60-65页
    3.4 溶菌酶法提取胞壁蛋白酶的条件优化第65-75页
        3.4.1 各因素对溶菌酶法提取CEP的影响第65-66页
        3.4.2 析因试验筛选影响溶菌酶法提取CEP的主要因素第66-70页
        3.4.3 溶酶法提取CEP的响应面优化第70-75页
    3.5 胞壁蛋白酶酶学性质第75-79页
        3.5.1 CEP的最适酶活温度及稳定性第75-76页
        3.5.2 pH对胞壁蛋白酶酶活及稳定性的影响第76页
        3.5.3 金属离子对胞壁蛋白酶活力的影响分析第76-77页
        3.5.4 胞壁蛋白酶酶解乳清蛋白、乳球蛋白以及酪蛋白反应动力学第77-79页
    3.6 利用胞壁蛋白酶开发功能性羊乳饮品第79-87页
        3.6.1 制备脱脂羊乳功能性饮品的酶解条件第79-83页
        3.6.2 功能性羊乳饮品的脱苦与贮存第83-87页
4 结论、创新点和展望第87-89页
    4.1 结论第87-88页
    4.2 创新点第88页
    4.3 展望第88-89页
致谢第89-90页
参考文献第90-97页
攻读学位期间发表的成果目录第97-98页

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