摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
本文所使用的缩略词表 | 第10-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-21页 |
1.1 国内外研究现状 | 第13-19页 |
1.1.1 盐胁迫对植物的危害及植物耐盐机理 | 第13-14页 |
1.1.2 HKT基因研究进展 | 第14-19页 |
1.2 研究意义及研究技术路线 | 第19-21页 |
1.2.1 研究意义 | 第19-20页 |
1.2.2 研究技术路线 | 第20-21页 |
第二章 西伯利亚白剌HKT1 cDNA全长克隆及生物信息学分析 | 第21-35页 |
2.1 材料和方法 | 第21-29页 |
2.1.1 植物材料及培养 | 第21页 |
2.1.2 实验试剂及其配制 | 第21-22页 |
2.1.3 NsHKT1基因的克隆 | 第22-25页 |
2.1.4 RACE技术克隆NsHKT1基因末端序列 | 第25-29页 |
2.1.5 NsHKT1基因的生物信息学分析 | 第29页 |
2.2 结果和分析 | 第29-35页 |
2.2.1 RNA的凝胶变性电泳结果 | 第29-30页 |
2.2.2 NsHKT1基因序列的克隆 | 第30页 |
2.2.3 NsHKT1基因末端序列的克隆 | 第30-31页 |
2.2.4 cDNA全长的克隆 | 第31页 |
2.2.5 NsHKT1基因生物信息学分析 | 第31-35页 |
第三章 西伯利亚白刺HKT1基因的表达特性分析 | 第35-49页 |
3.1 材料和方法 | 第35-43页 |
3.1.1 NsHKT1基因的表达特性分析 | 第35-37页 |
3.1.2 NsHKT1基因启动子序列克隆及分析 | 第37-39页 |
3.1.3 pORE R1-pNsHKT1::GUS表达载体的构建 | 第39-41页 |
3.1.4 拟南芥遗传转化、筛选、鉴定 | 第41-42页 |
3.1.5 NsHKT1::GUS蛋白的检测 | 第42-43页 |
3.2 结果和分析 | 第43-49页 |
3.2.1 NsHKT1基因的表达特性分析 | 第43-44页 |
3.2.2 NsHKT1基因启动子序列克隆和功能元件分析 | 第44-46页 |
3.2.3 pORE R1-pNsHKT1::GUS表达载体的构建 | 第46-47页 |
3.2.4 拟南芥遗传转化、筛选、鉴定 | 第47-48页 |
3.2.5 NsHKT1::GUS蛋白的检测 | 第48-49页 |
第四章 西伯利亚白刺HKT1基因的功能分析 | 第49-63页 |
4.1 材料和方法 | 第49-55页 |
4.1.1 pET-32a(+)-NsHKT1载体的构建 | 第49-53页 |
4.1.2 pBI101-NsHKT1载体的构建 | 第53-55页 |
4.2 结果和分析 | 第55-63页 |
4.2.1 pET-32a(+)-NsHKT1载体的构建 | 第55-56页 |
4.2.2 大肠杆菌的转化及鉴定 | 第56页 |
4.2.3 NsHKT1蛋白的诱导表达 | 第56-57页 |
4.2.4 转基因大肠杆菌的抗逆性检测 | 第57-60页 |
4.2.5 pBI101-NsHKT1载体的构建 | 第60页 |
4.2.6 拟南芥遗传转化、筛选、鉴定 | 第60-61页 |
4.2.7 转基因植株的耐盐性分析 | 第61-63页 |
第五章 讨论 | 第63-66页 |
5.1 NsHKT1基因的分子特性 | 第63页 |
5.2 NsHKT1基因的表达特性 | 第63-64页 |
5.3 NsHKT1基因在大肠杆菌中的表达及抗逆性分析 | 第64-65页 |
5.4 NsHKT1基因在拟南芥中的表达及耐盐性分析 | 第65-66页 |
第六章 结论 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-74页 |
附录 | 第74-75页 |
附录 白刺NsHKT1基因cDNA及推测的氨基酸序列 | 第74-75页 |
致谢 | 第75页 |