| 摘要 | 第5-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 第1章 文献综述 | 第12-27页 |
| 1.1 极地海洋微生物来源的天然产物 | 第12-14页 |
| 1.1.1 极地微生物的多样性和适应机制 | 第12页 |
| 1.1.2 极地海洋微生物来源的天然产物的研究 | 第12-14页 |
| 1.2 海洋放线菌 | 第14-15页 |
| 1.2.1 海洋放线菌产次级代谢产物的多样性 | 第14页 |
| 1.2.2 海洋放线菌来源的药物筛选与研发 | 第14-15页 |
| 1.3 微生物次级代谢途径 | 第15-21页 |
| 1.3.1 聚酮途径 | 第15-16页 |
| 1.3.2 甲羟戊酸途径 | 第16-17页 |
| 1.3.3 莽草酸途径 | 第17-18页 |
| 1.3.4 外源添加前体和抑制剂对次级代谢产物的调控 | 第18-20页 |
| 1.3.5 基因的调控对次级代谢产物的影响 | 第20-21页 |
| 1.4 发酵工艺的优化及放大 | 第21-23页 |
| 1.4.1 培养基的优化 | 第21-22页 |
| 1.4.2 发酵工艺的控制和放大 | 第22-23页 |
| 1.5 大环四重内酯类抗生素的生物合成机制 | 第23-25页 |
| 1.6 课题背景和意义 | 第25-27页 |
| 第2章 链霉菌R-527F产二活菌素的发酵培养基优化 | 第27-40页 |
| 2.1 前言 | 第27页 |
| 2.2 实验材料和方法 | 第27-29页 |
| 2.2.1 实验菌株及种子保藏 | 第27页 |
| 2.2.2 培养基 | 第27-28页 |
| 2.2.3 培养条件 | 第28页 |
| 2.2.4 实验试剂及仪器 | 第28页 |
| 2.2.5 分析及检测方法 | 第28-29页 |
| 2.3 实验结果与讨论 | 第29-39页 |
| 2.3.1 种子培养条件的优化 | 第29-30页 |
| 2.3.2 接种量的优化 | 第30-31页 |
| 2.3.3 氮源的筛选 | 第31-33页 |
| 2.3.4 碳源的筛选和优化 | 第33-36页 |
| 2.3.5 正交实验 | 第36-37页 |
| 2.3.6 Plackett-Burman设计 | 第37-39页 |
| 2.4 本章小结 | 第39-40页 |
| 第3章 链霉菌R-527F产二活菌素的前体代谢调控 | 第40-47页 |
| 3.1 前言 | 第40-41页 |
| 3.2 实验材料和方法 | 第41页 |
| 3.2.1 实验菌种和培养基 | 第41页 |
| 3.2.2 培养方法 | 第41页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第41-45页 |
| 3.3.1 间接前体氨基酸的添加 | 第41-42页 |
| 3.3.2 直接前体的添加 | 第42-45页 |
| 3.4 本章小结 | 第45-47页 |
| 第4章 反应器发酵工艺优化及pH-营养联合调控 | 第47-61页 |
| 4.1 前言 | 第47页 |
| 4.2 实验材料和条件 | 第47-48页 |
| 4.2.1 实验菌种和培养基 | 第47页 |
| 4.2.2 培养仪器及条件 | 第47页 |
| 4.2.3 分析及检测方法 | 第47-48页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第48-59页 |
| 4.3.1 搅拌转速的影响 | 第48-49页 |
| 4.3.2 通气对Dinactin产量的影响 | 第49-50页 |
| 4.3.3 pH对Dinactin合成的影响 | 第50-52页 |
| 4.3.4 36h时调控pH对Dinactin合成的影响 | 第52-53页 |
| 4.3.5 pH-前体的联合调控 | 第53-54页 |
| 4.3.6 前体丁二酸钠与pH的联合调控 | 第54-56页 |
| 4.3.7 混合前体与pH的联合调控 | 第56-57页 |
| 4.3.8 前体丁二酸钠、pH和葡萄糖的联合调控 | 第57-59页 |
| 4.4 本章小结 | 第59-61页 |
| 第5章 nons基因过表达促进前体合成二活菌素 | 第61-72页 |
| 5.1 前言 | 第61页 |
| 5.2 实验材料 | 第61页 |
| 5.2.1 实验菌株及质粒 | 第61页 |
| 5.2.2 主要实验试剂及试剂盒 | 第61页 |
| 5.2.3 培养基配方及培养条件 | 第61页 |
| 5.3 实验方法 | 第61-65页 |
| 5.3.1 链霉菌R-527F基因组抽提 | 第61-62页 |
| 5.3.2 实验引物及PCR反应条件 | 第62页 |
| 5.3.3 nons基因的克隆 | 第62-63页 |
| 5.3.4 pIB139-nons质粒构建 | 第63-64页 |
| 5.3.5 Streptomyces sp.R-527F转化子筛选 | 第64页 |
| 5.3.6 转化子的发酵验证及目的基因的验证 | 第64-65页 |
| 5.4 结果与讨论 | 第65-71页 |
| 5.4.1 nons基因的克隆 | 第65-66页 |
| 5.4.2 pIB139-nons质粒的获取 | 第66-68页 |
| 5.4.3 含目的基因质粒的转化子的筛选 | 第68页 |
| 5.4.4 转化子的发酵及目的基因的验证 | 第68-70页 |
| 5.4.5 pH-前体-葡萄糖联合调控下的转化子的5L发酵 | 第70-71页 |
| 5.5 本章小结 | 第71-72页 |
| 第6章 总结、创新点与展望 | 第72-74页 |
| 6.1 总结 | 第72-73页 |
| 6.2 创新点 | 第73页 |
| 6.3 展望 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-80页 |
| 论文发表 | 第80-81页 |
| 致谢 | 第81页 |
