摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-8页 |
前言 | 第8-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-17页 |
·雷公藤的药理学活性与毒副作用 | 第9页 |
·雷公藤红素的药理学活性及其毒性 | 第9-13页 |
·药理活性 | 第10-12页 |
·雷公藤红素的不良反应 | 第12-13页 |
·心脏离子通道与膜片钳技术 | 第13页 |
·心脏HERG离子通道的特征 | 第13-14页 |
·药物对心脏HERG离子通道的阻断 | 第14-17页 |
第二章 试剂配制和实验方法 | 第17-21页 |
·常用试剂的配置 | 第17页 |
·实验方法 | 第17-20页 |
·细胞培养 | 第17-19页 |
·全细胞膜片钳实验 | 第19-20页 |
·实验数据处理 | 第20-21页 |
第三章 雷公藤红素对心脏HERG离子通道的阻断 | 第21-30页 |
·材料和试剂 | 第21-22页 |
·实验细胞 | 第21页 |
·实验主要药品及试剂 | 第21页 |
·主要仪器设备 | 第21-22页 |
·实验方法 | 第22页 |
·实验结果 | 第22-28页 |
·雷公藤红素浓度依赖性抑制h ERG离子通道电流 | 第22-23页 |
·雷公藤红素对h ERG离子通道电流(I-V)曲线的影响 | 第23-24页 |
·雷公藤红素对h ERG离子通道电流激活动力学影响 | 第24-25页 |
·雷公藤红素对h ERG离子通道阻断作用的频率依赖性 | 第25-26页 |
·雷公藤红素对h ERG离子通道onset影响 | 第26-28页 |
·讨论 | 第28-30页 |
第四章 雷公藤红素对心脏HERG离子通道的阻断的分子机制研究 | 第30-38页 |
·材料和试剂 | 第30-31页 |
·实验细胞 | 第30页 |
·菌株 | 第30页 |
·质粒 | 第30页 |
·实验主要药品及试剂 | 第30页 |
·主要仪器设备 | 第30-31页 |
·试剂配制 | 第31-32页 |
·Luria-Bertani(LB)培养基的制备 | 第31页 |
·琼脂糖凝胶电泳使用的相关试剂 | 第31-32页 |
·实验方法 | 第32-35页 |
·大肠杆菌培养 | 第32页 |
·质粒提取 | 第32页 |
·引物设计 | 第32-33页 |
·PCR定点突变 | 第33页 |
·PCR产物Dpn1酶切 | 第33页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第33-34页 |
·DNA凝胶回收 | 第34页 |
·PCR产物的转化 | 第34-35页 |
·实验结果 | 第35-36页 |
·T623A,S624A,V625A,Y652A和F656A位点突变成功 | 第35页 |
·hERG离子通道突变体的影响 | 第35-36页 |
·讨论 | 第36-38页 |
第五章 总讨论 | 第38-39页 |
第六章 结论与展望 | 第39-41页 |
·结论 | 第39页 |
·展望 | 第39-41页 |
参考文献 | 第41-48页 |
作者简介 | 第48-49页 |
致谢 | 第49页 |