| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-10页 |
| 第一章 霍乱弧菌研究概况 | 第10-17页 |
| ·霍乱流行概况 | 第10-11页 |
| ·霍乱弧菌的生物学性状 | 第11页 |
| ·霍乱弧菌毒力因子及其致病机理 | 第11-13页 |
| ·霍乱弧菌毒力岛VPI与噬菌体CTXΦ | 第12页 |
| ·毒素协同菌毛TCP | 第12-13页 |
| ·霍乱毒素CT | 第13页 |
| ·霍乱弧菌的毒素调控网络 | 第13-15页 |
| ·ToxR调控元件 | 第14页 |
| ·ToxT调控 | 第14-15页 |
| ·二硫键氧化还原蛋白 | 第15-16页 |
| ·胆汁酸 | 第16页 |
| ·胆汁酸诱导TcpP二聚体形成 | 第16-17页 |
| 第二章 霍乱弧菌DsbA蛋白表达纯化 | 第17-30页 |
| ·试验材料与仪器 | 第17-20页 |
| ·菌株与质粒 | 第17页 |
| ·试剂与溶液配制 | 第17-19页 |
| ·试验仪器 | 第19-20页 |
| ·试验方法 | 第20-27页 |
| ·蛋白原核表达重组质粒的克隆 | 第20-25页 |
| ·DsbA蛋白的表达纯化 | 第25-26页 |
| ·蛋白的透析 | 第26-27页 |
| ·试验结果与分析 | 第27-28页 |
| ·重组表达质粒的构建与鉴定 | 第27页 |
| ·重组蛋白的表达与纯化 | 第27-28页 |
| ·讨论 | 第28-30页 |
| 第三章 等温滴定量热(ITC)试验与还原酶活性测定 | 第30-37页 |
| ·试验材料与仪器 | 第30-31页 |
| ·试剂与溶液 | 第30页 |
| ·试验仪器 | 第30-31页 |
| ·试验方法 | 第31-33页 |
| ·DsbA蛋白与胆汁酸互作分析ITC试验 | 第31-32页 |
| ·DsbA蛋白还原酶活性测定试验 | 第32-33页 |
| ·试验结果与分析 | 第33-35页 |
| ·ITC互作分析 | 第33-34页 |
| ·胰岛素还原酶活性测定 | 第34-35页 |
| ·讨论 | 第35-37页 |
| 第四章 霍乱弧菌dsbA随机突变基因文库构建及突变株筛选 | 第37-49页 |
| ·试验材料与仪器 | 第37-38页 |
| ·菌株与质粒 | 第37页 |
| ·试剂与溶液 | 第37-38页 |
| ·试验方法 | 第38-44页 |
| ·随机突变库的构建 | 第38-41页 |
| ·dsbA突变株筛选 | 第41-44页 |
| ·试验结果与分析 | 第44-47页 |
| ·随机突变文库的构建 | 第44-46页 |
| ·疑似dsbA突变体定点突变 | 第46-47页 |
| ·讨论 | 第47-49页 |
| 第五章 霍乱弧菌dsbA突变体表型分析、蛋白表达纯化及还原酶活性测定 | 第49-57页 |
| ·试验材料与仪器 | 第49页 |
| ·菌株与质粒 | 第49页 |
| ·试剂与溶液 | 第49页 |
| ·试验仪器 | 第49页 |
| ·试验方法 | 第49-50页 |
| ·dsbA突变体在AML65(pMH501,Ptox T-lux)和V.C ΔdsbA Ptox T-lux中的荧光表达及运动性验证 | 第49-50页 |
| ·dsbA突变体蛋白表达纯化 | 第50页 |
| ·dsbA突变体蛋白还原酶活性测定 | 第50页 |
| ·试验结果 | 第50-55页 |
| ·dsbA突变体在AML65(pMH501,Ptox T-lux)中的荧光表达及运动性验证 | 第50-52页 |
| ·dsbA突变体在V.C ΔdsbA Ptox T-lux中的荧光表达及运动性验证 | 第52-53页 |
| ·DsbA_(H113L)，DsbA_(D135V)，DsbA_(E188A)蛋白的表达纯化 | 第53-54页 |
| ·DsbA_(H113L)，DsbA_(D135V)，DsbA_(E188A)蛋白还原酶活性测定 | 第54-55页 |
| ·讨论 | 第55-57页 |
| 全文总结 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-65页 |
| 缩略词 | 第65-66页 |
| 个人简介 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
