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RNA模板介导同源重组修复的探讨及不同CRISPR/Cas9系统的比较研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-12页
第一章 文献综述第12-22页
   ·DNA损伤第12页
   ·DNA双链断裂第12-13页
   ·DNA重组第13-17页
     ·位点特异性重组和转座重组第13-15页
     ·同源重组第15-17页
   ·RNA介导的DNA重组与修复第17-19页
   ·CRISPR/Cas9技术第19-20页
   ·目的与意义第20-22页
第二章 β-actin基因mRNA介导的DNA重组修复第22-38页
   ·试验设计第22-23页
   ·材料方法第23-31页
     ·主要材料第23页
     ·Actin E3&4 报告载体系统第23-29页
     ·Actin E3&5 报告载体系统第29-31页
   ·结果分析第31-36页
     ·Actin E3&4 报告载体系统的探讨结果与分析第31-34页
     ·Actin E3&5 报告载体系统的探讨结果与分析第34-36页
   ·讨论第36-37页
   ·小结第37-38页
第三章 pB-293A整合细胞系的构建及RNA介导的DNA重组修复第38-44页
   ·试验设计第38-39页
   ·材料方法第39-41页
     ·主要材料第39页
     ·pB-293A随机整合细胞系的构建第39-40页
     ·RNA介导的DNA重组修复试验第40-41页
   ·结果分析第41-43页
     ·pB-293A随机整合细胞系的构建结果第41-42页
     ·pB-293A中RNA介导DNA重组的探讨结果第42-43页
   ·讨论第43页
   ·小结第43-44页
第四章 不同CRISPR/Cas9系统核酸酶活性的比较第44-53页
   ·试验设计第44-45页
   ·材料方法第45-48页
     ·主要材料第45页
     ·sgRNA二级结构研究第45-46页
     ·sgRNA 5’端酶切位点对其活性影响的研究第46-47页
     ·不同来源CRISPR/Cas9系统的比较研究第47页
     ·报告载体的构建第47页
     ·细胞培养及转染第47页
     ·流式细胞术检测荧光细胞第47-48页
   ·结果分析第48-51页
     ·sgRNA二级结构研究结果第48页
     ·sgRNA 5’端酶切位点对其活性影响的比较结果第48-49页
     ·不同来源CRISPR/Cas9系统效率比较结果第49-50页
     ·不同CRISPR/Cas9核酸酶活性比较的统计分析结果第50-51页
   ·讨论第51-52页
   ·小结第52-53页
结论及创新点第53-54页
参考文献第54-60页
附录第60-61页
缩略词第61-62页
致谢第62-63页
作者简介第63页

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